体外消化透析法测定朱砂中汞生物可接受率的实验条件确定

目的确定体外消化透析法测定朱砂中汞的生物可接受率的实验条件,建立实验流程,并测定朱砂中汞的生物可接受率。方法模拟胃肠消化环境,研究pH、接触时间等因素对朱砂中汞的溶出率及透析时间等对朱砂中汞的生物可接受率的影响规律,确定合适模拟条件。结果确定的实验流程模拟条件为:液/固比100,人工胃液pH=1.5,加入0.16%胃蛋白酶1 m l,接触时间100 m in,透析时间100 m in,加入胰液胆盐混合物量为5 m l。在确定的实验条件下,CV-AFS测得水飞朱砂中汞的溶出率为2.5×10-6(n=6,RSD=4.1%),生物可接受率为4.8×10-7(n=6,RSD=3.5%)。结论体外消化透析法可用于测定朱砂中汞的生物可接受率,可为测定含朱砂中成药中汞的生物可接受率提供方法学上的参考。

本科微生物学实验教学改革初探

微生物学是一门实验性很强的学科,加强实验教学改革对于培养学生的综合素质和创新精神具有重要意义。从实验内容选取,微生物实验教学方法和教学手段改革等三个方面,提出了实验教学改革的一些设想,目的在于提高实验教学质量,培养创新型人才。

野生热带灵芝Ganoderma tropicum(Jungh.) Bres.菌种分离与驯化研究

以新鲜的野生热带灵芝子实体为材料,经过表面消毒后,分别接种到米饭培养基、CA培养基和PDA培养基上.结果表明,在这3种供试培养基上均能获得纯化的菌丝体.米饭培养基上的菌丝体的生长速度最快;其次为PDA培养基;CA培养基的菌丝体生长最慢.对子实体、担孢子和菌丝体的形态特征进行了系统的形态学观察,证实所分离和驯化的菌种为热带灵芝[Ganoderma tropicum(Jungh.) Bres.].用木屑作为主要原料制备培养料对热带灵芝进行了驯化栽培,实验结果表明,冬季较低温条件下形成的子实体多为鹿角状畸形芝;而在2月份中旬以后较高温度下形成的子实体多为正常的掌状子实体.笔者据此认为,在海口地区,热带灵芝宜在春末至秋末气温较高的季节栽培.

海南产大尉芋螺的新型O-超家族芋螺毒素基因克隆

目的从海南产大尉芋螺毒液中分离克隆新型O-超家族芋螺毒素基因,为大尉芋螺毒素药物的研究与开发提供源头化合物。方法采用快速扩增cDNA 3’-末端(3’-RACE,Rapid Amplification of cDNA Ends)的方法,对我国海南产大尉芋螺(Conus capitaneus Linnaeus)的毒素cDNA进行分析,克隆测序所得基因片段,再进行序列比较,以及O-超家族芋螺毒素基因的遗传变异分析。结果发现了1种新的O-超家族芋螺毒素cDNA序列CaHr91N,编码长度为77个氨基酸(aa)的前体蛋白CaHr91P,具有典型的芋螺毒素前体结构特征,即由21aa的信号肽、22aa的前肽与34aa的成熟肽三部分组成。毒素区的成熟肽CaHr91M序列为ECREQSQGCTNTSPPCCSGLRCSGQSQGGVCISN,具有O-超家族芋螺毒素保守的半胱氨酸框架C-C-CC-C-C.同时比较分析了CaHr91P与其它同源性的O-超家族芋螺毒素的相似性,以及大尉芋螺毒素的研究状况。结论CaHr91P新芋螺毒素基因的发现,及其序列的阐明,为进一步研究其生物活性和应用奠定了基础,同时为更多大尉芋螺毒素的发现和研究利用积累了经验。

海南苦丁茶叶微量元素和挥发性成分研究

目的对海南苦丁茶叶中微量元素的含量及挥发性成分进行分析研究。方法用原子吸收光谱法测定Ca,Fe,Mn,Cu,Zn,Mg,Pb,Cd的含量;利用水蒸气蒸馏法提取苦丁茶叶中挥发性成分,用GC-MS进行成分分离鉴定,应用色谱峰面积归一化法确定各成分的相对百分含量。结果 3种等级苦丁茶叶中均呈现出Ca、Mg》Mn>Fe、Zn>Cu>Pb、Cd的分布,但各等级苦丁茶叶中同种元素的含量差异较大,且其含量与等级之间无明显规律;一级苦丁茶叶的挥发性成分中共鉴定出18种化合物,主要成分为:正十六酸、十八碳烷酸、6-甲基-2-庚醇和3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇等。结论获得了不同等级苦丁茶叶中微量元素含量的比较数据,并测定了一级苦丁茶叶中挥发性成分,为海南苦丁茶的深入开发利用提供一定依据。

研究生生物化学课堂讨论式教学方法探讨

通过在研究生生物化学课程中进行讨论式教学方法改革,改变了传统以课堂为中心,以教师为主体,学生为客体的灌输式教学模式。讨论式教学方法以学生为主体,通过课前自学、课堂上师生之间和学生之间的讨论与交流,使学生从被动接受知识转变为主动获取知识,激发学生对学习的兴趣,开发学生的思维资源,培养学生的自学能力和创造性思维能力。实践证明,讨论式教学方法提高了教学质量和教学效率,提高了学生的综合素质,取得了良好的效果。

发芽糙米微量元素锌的生物强化

目的 发芽糙米的锌生物强化培育及对人体补锌的适用性探讨。方法 选取3个品种（吉梗81号、博优209号、黑糯米）的糙米为材料,用不同质量浓度锌培养液（0-250μg·m L^-1）浸种24 h（28℃）并发芽36 h（30℃）,在萌发过程中实行锌的生物强化,培育富锌发芽糙米。通过测定不同锌含量条件下发芽糙米的萌发参数（吸水率、发芽率）,以及锌、Vc和矿物质（Fe、Mn、Mg）含量,探明培养液锌的适宜含量条件和富锌发米糙米的补锌适用性。结果 对吉梗81号、博优209号、黑糯米等3个品种,富锌发芽糙米培育的锌培养液适宜质量浓度均为75-150μg·m L^-1,最佳质量浓度为100μg·m L^-1。3个品种发芽糙米对锌的富集能力由强到弱顺序为：吉梗81号,博优209号,黑糯米。与对照处理（CK）相比,富锌发芽糙米Vc、GABA含量较高,而矿质元素（Fe、Mn、Mg）渗漏损失略低。富锌发芽糙米每10 g（DW）的锌积累量,对吉梗81号、博优209号及黑糯米等3个品种可提供锌占中国成人RNI百分数分别是：53.8%（男性）和89.7%（女性）,45.6%（男性）和76.0%（女性）,以及41.1%（男性）和68.5%（女性）。结论 发芽糙米可能是进行锌生物强化的优良载体,预计富锌发芽糙米适用于人体补锌。

基于数量分类学的海南产芋螺多样性研究

利用NTsys-pc2.10e软件对20种海南产芋螺的27个性状特征分别进行了Q型聚类分析、R型聚类分析和主成分分析,据此对芋螺的多样性进行了研究。结果表明,利用Q型聚类分析可将20种海南产芋螺分为二大组3个亚组;利用R型聚类分析可将27种性状特征分为2个大组;主成分分析反映出芋螺分类的重要特征是贝壳大小、内唇和壳口特征;基于芋螺前3位主成分基础上的三维图与聚类分析结果图一致。聚类分析树状图较好地反映了20种芋螺之间的亲缘关系,R型聚类分析与主成分分析相结合有助于选择关键而重要的芋螺分类特征。

槟榔活性成分诱导口腔黏膜下纤维化的机制:基于网络药理学结合临床样本验证

目的探究槟榔的成分及其促进口腔黏膜下纤维化的机制。方法采用Thermo QE plus液相色谱串联高分辨质谱仪和Compound discover 3.2数据处理软件进行槟榔中药化学成分分析,将检测到的化合物以质谱响应值排序,分析排名前20化合物的活性。化合物活性来源根据《中国药典(2015版)》汇总,数据查询基于PubChem、Chemical book以及Scifinder数据库。借助网络药理学方法分析槟榔影响口腔黏膜下纤维化(OSF)的潜在活性成分、核心靶点及主要影响的生物功能、信号通路。通过整合人类基因数据库(Genecards)、基因组百科全书数据库(KEGG)等数据库获取OSF的作用靶点。以OB≥30%为条件,在中药系统药理学技术平台(TCMSP)中筛选出槟榔可作用于靶点的化合物,并构建靶点-化合物、化合物-中药、靶点-化合物-中药网络。运用MOE软件的分子对接技术,分析成分-靶点结合的可能性,再利用Pymol软件进行分子对接可视化。最后通过免疫组化在临床样本中验证槟榔是否影响PI3K-Akt、MAPK两条通路涉及的主要蛋白,初步验证槟榔诱导OSF的潜在作用机制。结果基于网络药理学和槟榔粗提物中筛选出前10的化合物与OSF核心靶点中核心交集基因,确定了槟榔可能通过调控PI3K-Akt与MAPK通路。通过免疫组化在临床样本中验证,细胞膜上的PI3K蛋白表达量在OSF患者组中表达下降(P=0.0002),p-PI3K(P=0.0002)表达量上升,进一步激活下游的AKT1蛋白表达增加(P=0.0006),加剧磷酸化蛋白p-AKT蛋白的表达及堆积(P=0.0013);而在MAPK通路中,OSF患者组对比正常组,通过上调JNK蛋白(P=0.0130),诱导下游AP-1复合蛋白c-jun及c-fos转录因子的活性增加,促使其向细胞核聚集;且OSF患者组较正常组血浆的IL-6(P<0.0001)与IL-8(P=0.0095)含量均上升。结论槟榔碱、槟榔次碱、异去甲槟榔碱等槟榔中的主要活性成分可能通过刺激PI3K-Akt与MAPK信号通路,促进炎症介质IL-6及IL-8的表达,诱导胶原增生,导致口腔黏膜下纤维化病变。

ICP-MS法同时测定海南油茶不同部位的24种矿质营养元素含量及富集作用

建立油茶矿质营养元素的测定方法,并评价海南油茶中的不同部位对栽培土壤中矿质营养元素的富集能力。采用电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry,简称ICP-MS)法测定海南油茶及其栽培土壤中的矿质营养元素含量。本研究测定海南油茶根、果和叶中的24种矿质营养元素(Li、Be、B、Na、Mg、Al、K、Ca、Ti、V、Mn、Fe、Co、Ni、Zn、Ga、Se、Sr、Sn、Ba、Sb、Tl、Bi、Mo),其中根和果中含量最大的元素是K,分别达到50.47、69.72 mg/kg,而在叶中含量最大的是Ca(103.8 mg/kg);Li、Ti、V、Ni、Se、Sb、Bi、Mo等元素含量较低,这些结果和生物必需矿质营养元素的含量一致。矿质营养元素的富集系数均存在差异,表明海南油茶不同部位对矿质营养元素具有不同的富集能力。海南油茶不同部位的矿质营养元素和生物必需矿质营养元素的含量一致,这可为评价油茶品质和开发利用油茶资源提供重要的试验依据和保障。

减水剂对混凝土耐久性影响的研究进展

分析当今国内外混凝土耐久性的现状和导致混凝土耐久性下降的因素,提出使用减水剂是解决混凝土耐久性经济有效的方法之一。综述了近十年减水剂对混凝土耐久性影响的研究现状,指出目前研究的关键问题是系统全面地研究减水剂对混凝土耐久性的影响及其作用机理,为工程正确选用减水剂配制具有良好耐久性的高性能混凝土提供工程和理论指导依据。

人工培养条件下环境因子对微小小环藻生长的影响

在实验室培养条件下,研究了温度、光照、盐度、pH值和氮、磷、铁、硅等营养盐对微小小环藻(Cyclotella caspia)生长繁殖的影响。实验结果表明:微小小环藻生长的适宜温度为10～40℃,最适温度为30～35℃;适宜光照为500～10 000 lx,最适光照为2 000～8 000 lx;适宜盐度为2～85,最适盐度为25～50;适宜pH值为4～9,最适pH为8.0～8.5。筛选出微小小环藻培养液配方是每立方米海水加入(NH2)2CO-N 30g,NaH2PO4-P 1 g,FeC6H5O7-Fe 0.1 g,Na2SiO3-Si 25 g。

高质量毕赤酵母基因组DNA提取方法比较

旨在比较5种毕赤酵母基因组DNA的提取法,以便获得简便高效的提取高质量酵母基因组DNA的优化方法。分别使用蜗牛酶破壁法,超声波破碎法,液氮研磨法,Lyticase破壁法,试剂盒法提取毕赤酵母基因组DNA,然后进行DNA电泳检测以及紫外分光光度计测定DNA浓度和纯度。结果显示,5种方法均能提取出酵母基因组DNA,而酶法所提取的酵母基因组DNA质量最好。由此证实,蜗牛酶法成本低、效果好,是理想的提取高质量酵母基因组DNA的方法,完全满足后续试验要求。

巴斯德毕赤酵母表达系统及其高水平表达策略

毕赤酵母表达系统是目前最为成功的外源蛋白表达系统之一,与现有的其它表达系统相比,巴斯德毕赤酵母在表达产物的加工、外分泌、翻译后修饰以及糖基化修饰等方面有明显的优势,现已广泛用于外源蛋白的表达。该文综述了其自身的优点,表达载体和宿主菌的特点,以及高水平表达外源基因的策略。

土壤pH、Eh对土壤-苦丁茶树系统中铅分布的影响

以苦丁茶冬青(Ilex kudingcha C.J.Tseng)扦插苗(15个月生)进行盆栽实验,通过土施H2SO4、Ca(OH)2和复合肥,改变土壤pH和氧化还原电位(Eh),研究土壤pH、Eh条件对土壤-苦丁茶树系统中铅分布的影响。结果表明:在所研究的土壤pH范围内,从酸性到碱性变化,铅在土壤中含量分布趋于减少,在苦丁茶树根、茎、叶中的含量分布趋于增多,呈现出酸性增大有利于降低铅对苦丁茶树的污染风险。随pH的变化,铅在土壤各层中含量改变较大的是中层,在苦丁茶树的根、茎、叶中含量变化较大的是根。随pH增大,苦丁茶树中铅含量增大,但铅主要被富集在茶树根部。改变土壤的Eh条件,对苦丁茶树及其土壤中铅的分布均有明显影响,其中以土壤的表层和茶树的根、叶影响较大。从减少铅污染的角度,存在适宜的土壤Eh值,如在Eh=260.5时茶树土壤将铅富集在表层,从而降低铅在茶树叶中的含量,对茶叶的安全性有利。

减水剂对水泥水化产物微观形貌的影响

研究木素磺酸钙、改性木素磺酸钙、萘磺酸甲醛缩合物、氨基磺酸甲醛缩合物和三聚氰胺脲醛树脂5种减水剂对水泥水化产物微观形貌的影响。结果表明,掺木素磺酸钙的水泥石中生成较多短柱状钙矾石(AFt);掺改性木素磺酸钙的水泥石中短柱状和长柱状AFt交错生长;掺萘磺酸甲醛缩合物、氨基磺酸甲醛缩合物和三聚氰胺脲醛树脂可分别使水泥石中AFt呈长杆柱、波浪状和规则六方柱状生长。当水化龄期达到60d时,0.8%木素磺酸钙、改性木素磺酸钙的水泥石中出现连通孔洞;掺0.8%萘磺酸甲醛缩合物和氨基磺酸甲醛缩合物造成水泥石中出现微裂缝;掺加0.4%三聚氰胺脲醛树脂和改性木素磺酸钙的水泥石结构致密。减水剂的分散性、引气性和缓凝性是其对水化产物微观形貌影响的主要原因。

外源锌浸种对大豆种子萌发、大豆芽生长及锌积累的影响

采用不同浓度的锌溶液(0～100μg·mL-1)浸种8 h后水培5 d培育大豆芽,测定了外源锌浸种后大豆种子吸水率、发芽率和大豆芽生长过程中芽长、鲜重、含水量、生物产率及锌积累,并对富锌大豆芽中锌的生物可利用性进行了评估。结果表明:10～100μg·mL-1外源锌浸种可以提高大豆种子的吸水率,对大豆芽芽长、鲜重、含水量和生物产率的影响不明显。当浸种液中锌浓度超过30μg·mL-1时,大豆种子的萌发受到显著抑制(P<0.05)。随着浸种液中锌浓度的升高,大豆芽可食部分、不可食部分的含锌量均较对照显著增加(P<0.05),且不可食部分大于可食部分。从锌元素生物利用性上看,大豆芽可食部分在外源锌浓度10μg·mL-1时、不可食部分在外源锌浓度10～30μg·mL-1范围内锌的生物可接受率均显著高于对照(P<0.05),且不可食部分大于可食部分。综上可见,在不影响种子萌发和芽苗生长的前提下,10μg·mL-1的外源锌浸种有利于大豆芽对锌的积累。

毕赤酵母表达体系中重组蛋白的分离纯化

随着基因重组技术的快速发展，基因工程产品的利用越来越广泛，但其分离纯化的成本约占总成本的60％-70％。因此，探索一些简单有效的分离纯化方法尤为必要。简单介绍了目前较为流行的毕赤酵母表达体系，着重概述了重组蛋白分离纯化技术方法的应用情况。

三丫苦的化学成分研究

采用硅胶柱层析从三丫苦的乙酸乙酯萃取物中分离得到6种化合物,经波谱分析鉴定为4,7-二甲氧基呋喃喹啉生物碱(1)、顺式-3,4,5-三羟基-6-乙酰基-7-甲氧基-2,2-二甲基色烷(2)、3-羟基-4-乙氧基-5,7-二甲氧基-6-乙酰-2,2-二甲基色烷(3)、3,5-二羟基-4-乙氧基-6-乙酰基-7-甲氧基-2,2-二甲基色烷(4)、异吴茱萸酮酚(5)和异吴茱萸酮酚甲醚(6)。所有化合物均首次从该植物的根部分离得到。