研究生生物化学课堂讨论式教学方法探讨

通过在研究生生物化学课程中进行讨论式教学方法改革,改变了传统以课堂为中心,以教师为主体,学生为客体的灌输式教学模式。讨论式教学方法以学生为主体,通过课前自学、课堂上师生之间和学生之间的讨论与交流,使学生从被动接受知识转变为主动获取知识,激发学生对学习的兴趣,开发学生的思维资源,培养学生的自学能力和创造性思维能力。实践证明,讨论式教学方法提高了教学质量和教学效率,提高了学生的综合素质,取得了良好的效果。

药用植物内生菌及其对道地药材影响的研究进展

对近年来药用植物内生菌的研究进展及其对中药材道地性的影响进行综述,以期为内生菌资源的利用和中药材的开发提供参考。

低浓度尿素对橡胶籽β-葡萄糖苷酶活性和稳定性的影响

为了促进橡胶籽资源的充分利用,本研究以橡胶籽β-葡萄糖苷酶为研究对象,通过对其添加不同浓度的尿素后,测定了β-葡萄糖苷酶残余酶的活性变化,探讨了尿素对β-葡萄糖苷酶活性及其热稳定性的影响,同时以内源荧光光谱分析法研究了不同浓度的尿素对酶结构的影响.结果表明,添加低浓度的尿素时,β-葡萄糖苷酶水解p NPG的活力上升,极限温度下其失活半衰期也得以延长,72℃下等电点纯化β-葡萄糖苷酶的热失活半衰期延长47. 62%;当在β-葡萄糖苷酶溶液中添加高浓度尿素时,酶活下降明显,72℃下其失活半衰期缩短30%.荧光光谱显示,添加低浓度尿素时所引起的酶蛋白结构的变化更利于蛋白结构的稳定;低浓度尿素作用下β-葡萄糖苷酶的活性和稳定性提升,这可能是由于蛋白结构的变化有利于酶与底物的相互作用,从而致使酶活提升的缘故;此外,由于该结构较为稳定,因此热处理时其稳定性较高.

变性剂对橡胶籽中β-葡萄糖苷酶结构及酶活的影响

本文以橡胶籽蛋白溶液为原料,分离得到提取β-葡萄糖苷酶,研究了不同浓度的变性剂对β-葡萄糖苷酶酶活的影响,并通用激光粒径分析和分子荧光光谱分析等方法研究了变性剂对酶的空间结构的影响。结果表明:β-葡萄糖苷酶的酶活随变性剂浓度的增加大体上呈现下降趋势,温度的增加会加速下降的速度,通过对β-葡萄糖苷酶的空间结构分析发现尿素变性酶后,酶溶液的分子粒径变小,推断为β-葡萄糖苷酶的多聚体结构发生解聚。低浓度尿素在1 h时间内对β-葡萄糖苷酶有激活作用,酶活力明显提高,表明酶的空间结构变化与尿素浓度大小有关。通过分子荧光光谱分析发现随酶溶液中尿素浓度增加,荧光峰位红移,表明色氨酸残基不断暴露,蛋白质分子结构不断展开。本研究为进一步开发利用橡胶籽中β-葡萄糖苷酶提供了实验依据。

橡胶籽β-葡萄糖苷酶固定化酶学性质的研究

采用戊二醛交联的方法将来源于橡胶籽的β-葡萄糖苷酶固定到壳聚糖球上,对比研究了固定化酶和游离酶的酶学性质。固定化后的β-葡萄糖苷酶最适温度为65℃,比游离酶提高了10℃;固定化酶热稳定性相比于游离酶,在55～70℃范围内有所提高;固定化酶的最适pH为6.0,游离酶的pH为5.5;固定化酶与游离酶相比,其耐酸耐碱性有所提高;金属离子对固定化酶的抑制作用与游离酶相比有所改变;葡萄糖对固定化酶的影响相对于游离酶更为明显;以p-NPG为底物,固定化酶的Km为3.5 mmol/L,游离酶的Km为1.75 mmol/L;固定化酶在操作和贮藏方面的性质都有明显提高。固定化酶相对游离酶部分酶学性质得到显著提高和改善,有效拓宽了其使用范围,提高了其应用价值。

固定化橡胶籽β-葡萄糖苷酶的制球工艺研究

将从橡胶籽中提取的β-葡萄糖苷酶采用戊二醛交联吸附的方法固定到壳聚糖微球上,在单因素实验基础上,以壳聚糖浓度、乙酸浓度及凝结液配比为自变量,酶活回收率为响应值,采用响应面法对制球工艺进行优化。最优制球工艺为:2.5%壳聚糖、2%乙酸、NaOH浓度为7.5%、凝结液7.5%NaOH:95%乙醇(v/v)=1:1、静置时间为14 h,固定化酶酶活回收率为74.97%。

双溶剂冷冻结晶法分离橡胶籽油中α-亚麻酸工艺研究

以橡胶籽油为原料,经皂化制得混合脂肪酸,采用双溶剂冷冻结晶法分离橡胶籽油中α-亚麻酸。通过正交实验确定了最佳的双溶剂冷冻结晶工艺条件为:以乙腈和丙酮为混合溶剂,乙腈:丙酮(v:v)为4:6,m(混合脂肪酸):v(乙腈与丙酮)=1:15,冷冻结晶时间为10 h,固液分离方式为-18℃、7000 r/min冷冻离心3 min。最佳条件下,橡胶籽油中α-亚麻酸的相对含量由16.32%提高到31.52%,总不饱和脂肪酸含量也达98.28%。