烧伤感染病原菌的DNA微阵列检测研究

目的观察DNA微阵列检测烧伤感染病原菌的灵敏度和特异度。方法分别采用DNA微阵列法和常规培养分离鉴定法对不同含菌量的菌液进行检测,比较二者鉴定病原菌的灵敏度;采用微阵列法检测经常规方法鉴定明确的烧伤感染病原菌62株,观察二者的阳性符合率和阴性符合率;采用上述两种方法检测103份烧伤创面分泌物标本,观察其符合率。结果与常规方法相比,DNA微阵列检测烧伤创面细菌具有快捷、高通量的优势,鉴定单一菌株的灵敏度比常规方法高10-100倍,鉴定已知菌株与常规方法的阳性符合率和阴性符合率均为100%;在检测103份烧伤创面分泌物时,DNA微阵列除鉴定出常规方法鉴定出的所有菌株外,还检出了一些常规方法未检出的菌株。结论与常规方法相比,DNA微阵列检测烧伤感染常见病原菌的符合率和灵敏度均达到较高水平,具有良好的临床应用前景。

玉米RIL群体的主要株型性状调查研究

本研究调查了玉米自交系Mo17、黄早4及由这两个材料构建的F9代重组自交系(Recombinant inbred line,RIL)群体的株高和穗位高两个株型性状,对这两个性状在群体中的表现用SPSS11.5软件作了描述性统计和相关分析,并构建了频数分布图。结果显示这两个性状在亲本间表现出显著差异;在群体中呈现连续变异,与正态分布曲线拟合较好。该结果为控制这两个性状的数量性状位点(Quantitative trait locus,QTL)的作图研究提供了田间表型数据。

基因芯片技术直接检测常见腹泻病致病菌的应用研究

目的探讨基因芯片技术在腹泻病粪便标本常见致病菌检测中的应用。方法筛选7种常见腹泻病致病菌的特异基因作为检测目的基因,分别为志贺菌ipaH基因、沙门菌hilA基因、副溶血弧菌tdh基因、空肠弯曲菌FlaA基因、肠出血性大肠埃希菌stxA2基因、肠产毒性大肠埃希菌st基因、霍乱弧菌ctxA2基因。设计相应的引物及探针,制备寡核苷酸芯片。对多重PCR扩增条件进行优化,将PCR扩增产物与带有7种特异探针的基因芯片杂交。检测标准菌株25株,模拟粪标本及临床腹泻病粪便标本64份。结果经优化多重PCR扩增出7种腹泻病致病菌特异的致病基因片段,与基因芯片特异的探针杂交后,全部产生特异性杂交信号。标准菌株及模拟粪标本检测的阳性和阴性对照符合率均为100%。单一菌株最低检测量为10～100cfu/ml。64份腹泻病粪便标本检测出45份致病菌,其中33份志贺菌、12份副溶血弧菌,检出率为70.3%(45/64)。粪培养检出16份志贺菌,6份副溶血弧菌,检出率为34.4%(22/64),基因芯片法明显优于粪培养方法(P<0.01)。结论该基因芯片直接检测腹泻病致病菌,检出率高,达到了高效的检测目的,具有较好的实用性。

基因芯片检测7种常见腹泻病致病菌方法研究

目的建立运用多重PCR和基因芯片技术一次检测腹泻病粪便同一标本中7种常见致病菌的方法。方法筛选7种常见腹泻病致病菌的特异基因作为检测目的基因,并据此设计引物及探针,制备相应的寡核苷酸芯片,检测了标准菌株,并直接检测腹泻病粪便标本64份。结果以多重PCR扩增出7种腹泻病致病菌特异的致病基因片段,并与基因芯片相应的探针杂交。最低检测菌数为10到100cfu/mL。64份腹泻病粪便标本检测出45份致病菌。其中33份志贺菌、12份副溶血弧菌。敏感性高于粪便培养方法。结论该基因芯片直接检测腹泻病致病菌,具有较高的敏感性和特异性,达到了高通量即高效的检测目的,具有较好的实用性。