高脂饮食诱导肥胖大鼠心肌细胞内钙调节机制的研究

目的建立高脂饮食诱导肥胖易感(OP)大鼠,研究肥胖大鼠心肌细胞内钙调节的机制。方法高脂饲料喂饲健康雄性SD大鼠10周后,筛选出肥胖易感(OP)大鼠动物模型。实验结束后,处死动物,测量体脂肪含量,并收集血清,以检测血脂水平。采用酶法分离心肌细胞,Fluo-3/AM负载后采用激光共聚焦扫描显微镜观察心肌[Ca2+]i对KCl除极及咖啡因诱导的反性。结果OP大鼠肾周脂肪、睾周脂肪、网膜脂肪、体脂肪含量均显著高于基础组大鼠,甘油三酯水平和总胆固醇显著高于基础对照组。肥胖模型组心室肌[Ca2+]i的升高幅度、速度以及不同时间点的恢复程度均显著低于基础组(P<0.05)。结论肥胖心肌细胞[Ca2+]i在KCl除极后升高速度、幅度及恢复程度都发生改变,可能是肥胖心律失常发生机制之一。

肥胖大鼠心律失常易感性的分析

目的研究高脂饮食诱导肥胖易感(OP)大鼠心律失常易感性的发生机制。方法高脂饲料喂饲60只健康雄性SD大鼠12周后,筛选出OP大鼠、基础组大鼠动物模型,二组分别为15只大鼠。实验结束后,处死动物,测量体脂肪水平,并收集血清,以检测血脂水平。采用酶法分离心肌细胞,Fluo-3/AM负载后采用激光共聚焦扫描显微镜观察各组大鼠心肌细胞内钙离子强度([Ca2+]i)。同时取心脏组织常规抽提总RNA,采用含有468种miRNA的芯片检测系统进行miRNA表达谱差异分析。结果 OP大鼠睾周脂肪、肾周脂肪、网膜脂肪、体脂比[(20.15±3.38)、(8.74±1.66)、(9.23±0.94)、(7.71±0.74)mmol/L]均显著高于基础组大鼠[(8.98±1.19)、(4.70±0.59)、(6.28±0.40)、(4.69±0.37)mmol/L],OP组与基础组比较差异有统计学意义(P<0.05);OP大鼠血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白水平[(1.26±0.04)、(0.58±0.10)、(0.51±0.04)mmol/L]显著高于基础组大鼠[(0.92±0.08)、(0.29±0.03)、(0.31±0.04)mmol/L],OP组与基础组比较差异有统计学意义(P<0.05);OP组大鼠心室肌细胞内游离钙离子荧光强度(247.96±20.03)明显高于基础组大鼠(174.25±23.13),OP组与基础组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与基础组相比,OP模型组的miRNA表达谱中明显差异表达的miRNA共有7个,其中有3个miRNA上调,4个miRNA下调。结论肥胖大鼠miRNA的表达异常可导致心肌细胞内[Ca2+]i发生改变,可能是肥胖心律失常发生机制之一。

饮食诱导肥胖和肥胖抵抗大鼠及肥胖心律失常易感性的分析

目的通过高脂饮食诱导方法筛选出肥胖易感(OP)大鼠和和肥胖抵抗(OR)大鼠动物模型,分析肥胖大鼠心律失常易感性的发生机制。方法高脂饲料喂饲60只健康雄性SD大鼠12周后,筛选出肥胖易感(OP)大鼠,基础组大鼠和肥胖抵抗(OR)大鼠动物模型,各组分别为15只大鼠。实验结束后,处死动物,测量体脂肪含量,并收集血清,以检测血脂水平。采用酶法分离心肌细胞,Fluo-3/AM负载后采用激光共聚焦扫描显微镜观察各组大鼠心肌细胞内钙离子强度([Ca2+]i)。结果 OP大鼠睾周脂肪、肾周脂肪、网膜脂肪、体脂比[(20.15±3.38)、(8.74±1.66)、(9.23±0.94)、(7.71±0.74)mmol·L-1]均显著高于基础组大鼠[(8.98±1.19)、(4.70±0.59)、(6.28±0.40)、(4.69±0.37)mmol·L-1]和OR组大鼠[(6.83±1.05)、(3.35±0.48)、(6.16±0.30)、(4.08±0.22)mmol·L-1],OP组与基础组和OR组比较差异有统计学意义(P<0.05);OP大鼠血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平[(1.26±0.04)、(0.58±0.10)、(0.51±0.04)mmol·L-1]显著高于基础组大鼠[(0.92±0.08)、(0.29±0.03)、(0.31±0.04)mmol·L-1]和OR组大鼠[(0.81±0.05)、(0.21±0.03)、(0.29±0.02)mmol·L-1],OP组与基础组和OR组比较差异有统计学意义(P<0.05);OP组大鼠心室肌细胞内游离钙离子荧光强度(247.96±20.03)明显高于基础组大鼠(174.25±23.13)和OR组大鼠(145.12±19.11),OP组与基础组和OR组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论肥胖大鼠心肌细胞内钙离子变化可能是肥胖心律失常发生机制之一。