EB病毒潜伏感染的套细胞淋巴瘤模型研究

目的:建立EBV潜伏感染的套细胞淋巴瘤模型,为淋巴瘤预防与治疗的研究奠定基础。方法:利用新霉素耐性的重组遗传基因EBV(NeoR EBV)和B95-8 EBV对套细胞淋巴瘤细胞株SP49、SP53和Jeko-1进行感染,选出EBV阳性的MCL细胞株,采用免疫荧光法和Southern blot进行鉴定,采用Western blot和流式细胞仪检测EBV阳性的MCL细胞株的免疫表型及生物学活性。结果:成功获得SP49/EBV、SP53/EBV细胞株,均表达EBER1、EBNA2和LMP1,其免疫表型只有CD38表达增强,两细胞株均具有低增殖功能,凋亡抵抗性,成瘤能力下降等特点。结论:本研究建立的SP49/EBV和SP53/EBV细胞株,具有体内EBV潜伏感染的静息B细胞低增殖活性的特征,可成为研究体内EBV潜伏感染的良好模型。

卵巢上皮性肿瘤中Ezrin的表达及意义

目的:探讨埃兹蛋白Ezrin在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义。方法:选取1994-01～2003-12在哈尔滨医科大学附属第三医院和牡丹江医学院附属红旗医院手术治疗的卵巢上皮性肿瘤患者组织标本135例。采用免疫组织化学S-P法检测Ezrin在肿瘤组织的表达,分析其相关性和临床意义。结果:(1)恶性卵巢肿瘤中Ezrin的表达阳性率明显高于良性与交界性肿瘤,差异有显著性(P=0.0006);(2)Ezrin与FIGO临床分期、淋巴结转移、腹水显著相关(P<0.05)。结论:Ezrin的过表达与恶性卵巢上皮性肿瘤的浸润、转移密切相关,有可能成为新的治疗靶点。

山楂叶总黄酮对糖尿病大鼠睾丸病变及其EGFR表达的影响

目的:探讨山楂总黄酮对雄性Wistar糖尿病(DM)大鼠睾丸组织的保护作用及其EGFR表达影响。方法:Wistar雄性大鼠40只,分为正常对照组(对照组)、糖尿病模型组(模型组)、胰岛素治疗组(胰岛素组)和山楂叶总黄酮治疗组(HLF组),每组10只,尾静脉注射1%链尿佐菌素(STZ)溶液诱导糖尿病模型。HLF组给予山楂叶总黄酮200mg/(kg·d)定时灌胃给药。取一侧睾丸组织,制作免疫荧光及病理切片,光镜下观察。结果:2型糖尿病模型制备成功,模型组睾丸病理改变明显,曲细精管层次紊乱,精子数量减少或缺如,经HLF治疗后,生精细胞数量和形态明显恢复。HLF组EGFR表达量显著高于模型组(P<0.01),与胰岛素组相比差异无显著性。结论:山楂叶总黄酮能改善糖尿病大鼠睾丸病理损伤提升睾丸组织中EGFR的含量表达,对睾丸组织具有明显保护作用。

山楂总黄酮对糖尿病大鼠睾丸保护作用及其对PCNA表达的影响

目的:探讨山楂总黄酮对雄性Wistar糖尿病(DM)大鼠睾丸组织的保护作用及其PCNA表达影响。方法:Wistar雄性大鼠40只,随机分为正常对照组、糖尿病模型组、胰岛素治疗组和山楂叶总黄酮治疗组(HLF组)。,每组10只,尾静脉注射1%链尿佐菌素(STZ)溶液诱导糖尿病模型。HLF组给予山楂叶总黄酮200mg/(kg·d)定时灌胃给药。取一侧睾丸组织甲醛固定,用于制作免疫荧光切片,激光共聚焦显微镜观察。结果:2型糖尿病模型制备成功,HLF治疗后大鼠血糖显著低于模型组(p<0.01),大鼠体重和睾丸质量明显增加,曲细精管直径接近于正常,HLF组大鼠睾丸组织PCNA含量显著高于对照组(p<0.01)。结论:山楂叶总黄酮能改善糖尿病大鼠睾丸损伤提升睾丸组织中PCNA的含量表达,对睾丸组织具有明显保护作用。

末梢血中EB病毒潜伏感染的静息B细胞模型的建立

目的应用EB病毒(EBV)感染末梢血CD5+B细胞,建立体内储存EB病毒的静息B细胞模型。方法应用磁珠技术分离脐胎血中的CD5+B细胞;从新酶素耐性的Atada-EBV细胞中提取EB病毒对CD5+B细胞进行转染制备CD5+B/EBV细胞;流式细胞仪、Western blot法检测CD5+B/EBV细胞的病毒免疫表型和基因表型;免疫荧光双重染色BrdU、Ki67和EBNA2检测CD5+B/EBV细胞增殖活性。结果流式细胞仪检测显示CD5+B/EBV细胞病毒免疫表型CD20、CD80、CD38和CD86表达增强,CD23没有表达;CD5+B/EBV细胞EBNA2和LMP1病毒相关潜伏感染基因显著增高;免疫荧光染色检测EBNA2阳性的CD5+B/EBV细胞可见BrdU阴性细胞。经因子激活CD5+B/EBV后可见Brdu阴性细胞中有Ki67阳性细胞存在,而在EBNA2阳性细胞中可见Ki67阴性细胞,验证CD5+B/EBV细胞中静息B细胞的存在。结论本研究建立的CD5+B/EBV细胞具有体内EBV潜伏感染的静息B细胞的特征。

KiSS-1及MTA1基因在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1与肿瘤转移相关基因MTA1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义。方法选择1994年1月至2003年12月在哈尔滨医科大学附属第三医院和牡丹江医学院附属红旗医院进行卵巢肿瘤切除术的121例卵巢肿瘤患者为研究对象。采用免疫组织化学SP法检测受试者切除卵巢肿瘤组织中KiSS-1及MTA1的表达,并统计学比较二者在不同病理类型卵巢上皮性肿瘤中的表达阳性率差异,在卵巢上皮性癌的不同临床病理参数下表达阳性率差异,以及在卵巢上皮性癌中表达的相关性及其表达与卵巢上皮性癌患者5年生存率之间的关系。结果 1卵巢良性上皮性肿瘤及卵巢交界性上皮性肿瘤细胞质中,KiSS-1表达阳性率均显著高于卵巢上皮性癌,且差异均有统计学意义(83.3%vs 29.5%,χ2=23.375,P=0.000 1;63.3%vs 29.5%,χ2=29.536,P=0.000 2);而卵巢良性上皮性肿瘤及卵巢交界性上皮性肿瘤细胞质中,MTA1表达阳性率均显著低于卵巢上皮性癌,且差异均有统计学意义(23.3%vs 73.8%,χ2=20.889,P=0.000 4;40.0%vs 73.8%,χ2=9.800,P=0.002 0)。2 KiSS-1或MTA1在卵巢上皮性癌的国际妇产科联盟(FIGO)临床分期、淋巴结转移及腹水等临床病理参数下的表达阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而在年龄、肿瘤直径、组织学类型及世界卫生组织(WHO)病理分级的临床病理参数下,表达阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3 KiSS-1和MTA1在卵巢上皮性癌中的表达呈负相关关系(r=-0.268,P=0.038)。4在卵巢上皮性癌中,KiSS-1表达呈阳性者的5年生存率(33.3%)显著高于KiSS-1表达呈阴性者(14.0%),而MTA1表达呈阳性者的5年生存率(11.1%)显著低于MTA1表达呈阴性者(43.8%),且差异均有统计学意义(χ2=6.473,14.869;P<0.05)。结论 KiSS-1与MTA1基因可能参与了卵巢上皮性肿瘤的发生、发展和转移过程,或可作为评估恶性上皮性卵巢肿瘤预后的可行性指标。