维生素D对实验性自身免疫性葡萄膜炎影响机制

目的探讨维生素D活性形式1-25二羟维生素D_(3)[1,25-Dihydrovitamin D_(3),1,25(OH)2D_(3),VD]对实验性自身免疫性葡萄膜炎(Experimental autoimmune uveitis,EAU)的影响及其机制研究。方法选择6~8周龄,雌性Lewis大鼠40只,随机数字表法分为5组:Control组和EAU组,EAU+VD 0.5μg/kg组、EAU+VD 1.0μg/kg组、EAU+VD 2.0μg/kg组,每组8只。Control组在大鼠躯干上皮下、后肢足垫及两侧腹壁各点一次性注射200μL无菌磷酸盐缓冲液(phosphate buffer saline,PBS)。其余各组在相同位置一次性注射200μL含有光感受器间维生素A结合蛋白(Interphotoreceptor binding protein,IRBP)、结核菌素(tuberculin,TB)、完全弗氏佐剂(CFA)和无菌磷酸盐缓冲液的乳糜液免疫诱导EAU。EAU+VD 0.5μg/kg组、EAU+VD 1.0μg/kg组、EAU+VD 2.0μg/kg组均在建模前3天分别给予VD 0.5μg/kg、1.0μg/kg、2.0μg/kg,1次/d灌胃给药,持续19 d。免疫后10 d、12 d、14 d分别在裂隙灯显微镜、眼科90D前置镜观察大鼠眼部前节及视网膜炎症表现;免疫后16 d处死大鼠,HE染色观察眼部组织病理变化;q-PCR检测TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-17、IL-23、CD80,CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCR3、CCL2、CCR2表达;Western Blot检测蛋白激酶B(Protein kinase,AKT)及磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)表达。结果与EAU组相比,EAU+VD 2.0μg/kg组眼前节及眼部组织病理均表现轻度炎性改变;与EAU组相比,EAU+VD 2.0μg/kg组TNF-α、IL-23、CXCL9、CXCL10及CXCR3 mRNA表达量降低(P<0.05);磷酸化AKT表达量明显降低(P<0.01)。结论VD 2.0μg/kg预防给药有可能通过干扰AKT磷酸化,抑制炎症相关因子表达,缓解实验性自身免疫性葡萄炎病情。