补骨脂异黄酮对β-淀粉样肽_(25-35)损伤的神经干细胞存活及调亡的影响

目的:探讨补骨脂异黄酮对β-淀粉样肽(β-amyloid,Aβ)_(25-35)损伤的神经干细胞增殖及凋亡的影响。方法:取第3代神经干细胞细胞悬液,平均分为阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)模型组、实验组、拮抗剂组、空白对照组。AD模型组细胞加入Aβ_(25-35)5μmol/L制成阿尔茨海默病神经干细胞模型;实验组细胞加入Aβ_(25-35)5μmol/L和补骨脂异黄酮;拮抗剂组细胞加入Aβ_(25-35)5μmol/L的同时加入补骨脂异黄酮及雌激素受体拮抗剂;空白对照组细胞加入培养液;分别接种于96孔板。采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测补骨脂异黄酮对Aβ_(25-35)损伤神经干细胞增殖的影响,Western blot法检测补骨脂异黄酮干预后Aβ_(25-35)损伤的神经干细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性的变化,观察补骨脂异黄酮对Aβ_(25-35)损伤神经干细胞凋亡的影响。结果:MTT法显示,实验组细胞的吸光度在12、24、48、72 h及7 d均明显高于AD模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组细胞Caspase-3的表达在1、2、3、7、14、21 d均明显低于AD模型组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:补骨脂异黄酮经抗凋亡机制对Aβ25-35损伤大鼠海马神经干细胞发挥保护作用,该作用是通过雌激素受体介导的。