基于形成性评价的《生物分离工程》课程考核方式改革探究

长江师范学院正按照"发展品质上新台阶、教育质量上新水平、学科建设有新成就、体制机制有新面貌"的"四新"要求,建设高水平应用型大学。面对当今社会高新技术产业对人才的需求,培养集知识、建设、管理、创新等为一体的高级专业技术人才是开展"应用型人才教育"的根本出发点。"应用型人才"的特点是基础知识扎实、市场洞察力敏锐、综合分析及创新能力强,可以服务于生产和管理第一线的高级专业人才。

龙眼花色素苷生物合成相关基因DlCHS9的序列与功能分析

查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)是植物类黄酮化合物合成途径的第一个关键酶。前期在龙眼(Dimocarpus longan Lour.)中鉴定了与花色素苷合成密切相关的DlCHS9,发现与红皮龙眼相比,其在石硖龙眼果皮中的表达水平较低。为了进一步探究DlCHS9的生物学功能,本研究分别克隆石硖龙眼DlCHS9-SX和红皮龙眼DlCHS9-HP基因,氨基酸序列比对分析发现,二者仅在第328位氨基酸位点有差异,但该位点并不是关键酶活性位点。进一步构建植物表达载体,并采用农杆菌介导的叶盘法将DlCHS9-SX转入烟草。结果表明,转基因烟草花瓣更红,花色素苷含量更高,说明DlCHS9-SX超表达能促进烟草花瓣花色素苷的积累。分析DlCHS9的启动子序列表明,相似度为96.2%,与DlCHS9-HP的启动子相比,DlCHS9-SX的启动子有32个SNP、14个碱基插入和12个碱基删除,多1个脱落酸响应元件(ABRE),少1个光反应元件(Box4)、1个低温响应元件(LTR)和1个MYC转录因子结合元件。综上所述,DlCHS9-SX是石硖龙眼花色素苷合成的关键结构基因之一,而其启动子序列与红皮龙眼差异较大,可能是其在石硖果皮中表达较低的重要原因之一。

工程教育认证背景下“食品工程原理”与地方产业需求融合的教学改革

文章从培养高质量工程型技术人才的教学目标出发,分析食品科学与工程专业在当前‘食品工程原理’课程教学中存在的问题。基于工程教育认证思想,结合地方产业需求,分别从“学生中心”“产出导向”和“持续改进”三方面提出了食品工程原理课程教学改革措施。

基于MaxEnt模型分析重庆马尾松适生的生物气候特征

马尾松是我国南部地区主要用材、产脂和荒山造林树种,具有较高的生态和经济价值。分析马尾松适生的气候特征,为马尾松林业生产提供科学依据。基于626个分布点和19个气候数据,利用MaxEnt模型模拟马尾松在重庆的地理分布并检测其气候主导因子及其适宜值。马尾松最适宜(分布值为p≥0.5)分布的地区是在南岸、大渡口、巴南、江北、云阳、渝北的东部和南部、北碚的东南部、沙坪坝的东北部、九龙坡的东部和南部、石柱的北部、江津的东北部、綦江的东北部、万盛的中西部、南川的中南部、涪陵的西部和北部、长寿的中南部和东部、丰都的中部和西北部、忠县的东部和南部、万州的中部和东北部、开州的中部和西南部以及武隆局部地区等。分布值0.50>p≥0.25的区域是以上高分布值区域的向外扩展。同时,渝东南部分区县西南方向也进入该分布值。最暖月份最高温度、最暖季度平均温度和全年平均温度对马尾松的分布影响较大,其中最暖月份最高温度的适宜值为大于32.8℃,最适值为大于34.2℃;最暖季度平均温度的适宜值为大于26.8℃,最适值为28.2℃;全年平均温度的适宜值为大于16.8℃,最适值为大于18.5℃。该结果反映出马尾松的潜在地理分布范围,并揭示马尾松在重庆分布上所需的气候条件。

“互联网+”背景下《设施园艺学》教学改革探索与实践——以长江师范学院为例

《设施园艺学》是园艺专业一门重要核心课程,“互联网+”的应用不仅可为课程提供更为丰富的共享资源,也可为教与学提供更好的沟通平台。通过初步探索“互联网+”背景下《设施园艺学》课程“雨课堂”教学改革的实践过程,表明“雨课堂”能显著提升学生的积极性和自主性。

基于SPOC的微生物学混合式教学探索与实践

主要探索基于SPOC的微生物学混合式教学方法与途径,通过重塑课程教学目标、调整专业教师队伍、搭建线上教学环境、优化混合式教学设计、改进线下教学方法、完善教学评价模式,较好地实现了"以学生为中心"的教学变革,取得了良好的教学效果。

微生物学课程思政的教学探索与实践

本文主要探索微生物学的课程思政教学途径,通过整合教学内容、挖掘思想政治元素、重构教学设计、结合多方评价,将专业知识传授与思想政治育人元素有机结合,贯穿于课程教学的全过程,培养学生的科学和专业精神,激发学生的爱国情怀和责任担当意识,达到润物细无声的育人效果。通过专业课思想政治元素的挖掘,也大大提高了教师专业课程思政的意识和能力。

基于高通量测序分析复配小曲白酒发酵过程中微生物群落结构及多样性

利用高通量测序对复配小曲清香型白酒酿造过程中微生物多样性及变化规律进行比较分析。结果表明,样品中共检测出35个门、378个属的细菌和4个门、38个属的真菌。优势菌门为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、子囊菌门(Ascomycota)和毛霉菌门(Mucoromycota)。小曲白酒发酵过程中菌群结构不断发生变化,发酵前2 d细菌优势菌属为不明立克次体菌属(unidentified Rickettsiales),发酵3 d后的绝对优势菌属为乳杆菌属(Lactobacillus)直至发酵结束。真菌优势菌属为伊萨酵母属(Issatchenkia)、根霉属(Rhizopus)、酵母菌属(Saccharomyces)和曲霉属(Aspergilus)。随着发酵时间延长,根霉属和曲霉属相对丰度都在降低,而酵母菌属在发酵第2天后其相对丰度在不断提高并成为优势菌。本研究揭示了复配小曲白酒酿造发酵过程中微生物群落多样性及变化规律,为复配小曲白酒的生产提供理论支持。

构建氯化血红素/G-四链体DNA酶比色生物传感器检测食品中苏丹红

以苏丹红Ⅲ核酸适配体为识别元件,以氯化血红素/G-四链体DNA酶为信号探针,结合杂交链反应信号放大策略,构建一种简单、新颖、高灵敏的生物传感器,用于苏丹红比色检测。在优化条件下,对该方法的灵敏度、准确性、特异性进行评估,最后将其应用食品中苏丹红Ⅲ快速检测,并与GB/T 19681-2005法对比验证。结果显示,在优化条件下,苏丹红Ⅲ质量浓度在0.5~250 ng/mL范围与450 nm波长处的吸光度呈良好线性关系(相关系数为0.995),方法检测限为0.09 ng/mL。特异性分析显示,本方法可用于苏丹红I~IV的检测。实际样品分析中表明,食品中苏丹红Ⅲ加标回收率为84.3%~101.6%,相对标准偏差为4.13%~8.36%,本方法的加标回收率与GB 19681-2005法相比差异不显著(P>0.05)。该方法操作简便、准确可靠、灵敏度高,适用于批量食品中苏丹红的快速检测。

柚子皮制备磁性生物炭的表征及其对水中氯胺酮的检测

该研究以柚子皮为原料,制备了性能优良的磁性生物炭吸附剂,建立了快速检测氯胺酮的磁性固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法。扫描电镜和振动样品磁强计表征结果表明成功合成了磁性生物炭。采用单因素实验优化了吸附剂用量、吸附时间、溶液pH值,并采用Box-Behnken设计实验考察了解吸剂比例、解吸体积、解吸时间对水中氯胺酮回收率的影响。结果表明,在1~100μg·L^(−1)范围内,氯胺酮标准曲线的相关系数r>0.999,检出限为0.263μg·L^(−1),定量下限为0.878μg·L^(−1)。方法在不同水样中的加标回收率为84.0%~99.9%,日内和日间相对标准偏差分别为0.40%~3.4%和0.25%~1.9%。所建立的方法操作简便,准确高效,灵敏度高,适用于水中氯胺酮的检测。

野生Paxillus ammoniavirescens菌的分子鉴定及生物学特性研究

[目的]对野生食用菌进行分子鉴定及生物学特性研究,为其进一步液体深层发酵培养和开发利用奠定基础。[方法]采用rDNA ITS序列分析方法对一野生菌进行分子鉴定,通过单因素和正交试验确定了该菌株的生物学特性。[结果]由新鲜子实体分离得到的纯菌株为Paxillus ammoniavirescens,其菌丝体生长的最适碳源和氮源分别为可溶性淀粉和蛋白胨,最适培养温度为25℃,最适pH为4.5。[结论]卷边网褶菌菌丝体液体培养的最佳配方为:可溶性淀粉20 g,蛋白胨2 g,KH2PO43.0 g,MgSO44.5 g,水1 L。按此配方培养,可获得平均干质量为80 mg的菌丝体,明显高于其他配方。

食品生物化学线上线下混合式教学的探索与实践

食品生物化学是食品科学与工程专业的一门专业基础必修课。如何在课程学时有限学习难度较大的背景下,增加学习兴趣,保障学习效果是教师急需解决的问题。线上+线下混合式教学模式是顺应“互联网+教育”改革理念的新型教学模式。本文详细介绍了食品生物化学混合式教学的必要性、教学模式构建、教学效果及存在的问题和优化方向。

基于应用型人才培养的园艺植物生物技术教学改革探讨

在应用型人才培养的目标下,分析了园艺植物生物技术课程教学中存在的主要问题,提出了优化教学内容,改进教学方法,改革实践教学环节和注重课外实践的一系列提高学生的生物技术应用能力的改革思路与措施,为提高教学质量和高素质应用型园艺专业人才的培养提供参考。

羊妊娠相关糖蛋白5的制备及生物信息学分析

旨在异源表达羊妊娠相关糖蛋白5(ovPAG5),并对其蛋白结构及功能进行预测分析,为ovPAG5抗体制备和羊早孕诊断技术的研发提供技术支撑。利用生物信息学方法对ovPAG5基因的编码序列进行密码子偏好性分析,根据宿主细胞HEK293的密码子偏好性对ovPAG5基因进行优化,全基因合成后构建重组表达载体pcDNA3.1(-)-ovPAG5,转染至HEK293细胞中诱导表达重组蛋白并纯化,进一步利用生物信息学软件对ovPAG5蛋白的结构及功能进行预测。结果显示,ovPAG5基因有效密码子数(NEC)和密码子适应指数(CAI)分别为51.91和0.78,表明该基因密码子选择偏性较弱。优化后ovPAG5基因密码子适用指数(CAI)由0.78提高到0.96,GC总含量由48%提高到57%,并成功合成优化的ovPAG5基因,大小与预期结果相符。重组质粒测序结果显示,其核苷酸序列与优化后基因完全一致,氨基酸未发生突变。表达的重组蛋白ovPAG5经SDS-PAGE和Western Blot鉴定分析,其相对分子质量约52 kDa。生物信息学预测分析结果显示,ovPAG5蛋白具有2个糖基化修饰位点、12个B细胞抗原表位以及31个氨基酸残基组成的信号肽。其二级结构由无规则卷曲(40.81%)、延伸链(31.74%)、α-螺旋(22.17%)和β转角(5.29%)组成。本研究为今后ovPAG5抗体的制备和羊早孕检测技术的研发奠定了基础。

LcMYB1激活荔枝花色苷生物合成关键基因LcDFR和LcUFGT1的启动子区域分析

花色苷含量是荔枝果实呈现鲜红色的重要次生代谢产物,前人研究结果表明,LcMYB1通过调控关键基因的表达而影响荔枝果皮中花色苷的积累,其中LcDFR和LcUFGT1是荔枝果皮花色苷生物合成的关键基因,但是LcMYB1如何影响基因的表达,是否与结构基因启动子结合以及具体结合区段目前还不清楚。本研究通过克隆和分析LcDFR和LcUFGT1的启动子区域并对其进行分段处理,利用双荧光素酶和酵母单杂交实验,探究LcMYB1与LcDFR和LcUFGT1的启动子的结合区域。结果表明,LcDFR起始密码子上游1927 bp和LcUFGT1起始密码子上游1584 bp的启动子上分别有3个可能的MYB结合位点;双荧光素酶和酵母单杂交实验均显示LcMYB1可以结合LcDFR基因起始密码子上游904 bp到1425 bp包含有1个MYB-CORE元件的区域,LcMYB1与LcUFGT1基因启动子结合的区域是起始密码到上游610 bp,此区域包含有2个MYB-CORE元件。研究结果进一步证实了LcMYB1通过与基因LcDFR和LcUFGT1启动子结合发挥调控作用,并缩小了结合位点的范围。

基因工程理论案例教学探索——以转基因植物为例

为培养学生的科学思维,激发学生的主动思考,探索基于案例教学的基因工程理论教学内容,阐述案例教学对提高教学成效的重要性。本文选择3个转基因植物的案例进行介绍,从试验的设计思路、采用的主要技术及原理和最终获得的试验结果等方面对案例进行详细的分析。通过案例介绍,旨在为学生展示所学技术方法的使用环境,使学生能更直观地认识所学技术及原理,提高学习兴趣及培养解决复杂问题能力的意识。

基于适配体-杂交链式反应比色检测生鲜牛乳中四环素类抗生素

)以特异性识别四环素类抗生素(TCs)的广谱型适配体为识别元件,结合杂交链式反应(HCR)信号放大策略,提出了一种TCs多残留比色检测方法,并优化了检测条件和进行了方法学考察。取40 nmol·L^(-1)生物素化检测探针(bio-DP)溶液加入到包被有亲和素的酶标板中,室温孵育后加入牛血清白蛋白(BSA)溶液,封闭反应1 h。加入生鲜牛乳样品稀释液,室温孵育20 min,如果样品中含有TCs,TCs与bio-DP的适配体序列结合,其发夹结构被打开。加入200 nmol·L^(-1)生物素化发夹DNA1(bio-H1)溶液和200 nmol·L^(-1)生物素化发夹DNA2(bio-H2)溶液,室温下进行HCR 40 min,从而形成具有多个重复单元的双链DNA(dsDNA)纳米线。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA-HRP),室温孵育标记dsDNA。加入显色剂[含3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)],HRP催化TMB生成蓝色物质,显色5~8 min后终止反应,在酶标仪中于450 nm测量上述体系的吸光度。结果显示,bio-DP对四环素、土霉素、金霉素和多西环素具有高特异性,和卡那霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、泰乐菌素、磺胺嘧啶和恩诺沙星等抗生素无交叉反应。四环素、土霉素、金霉素和多西环素的质量浓度总和在0.8~100μg·L^(-1)内与对应的吸光度总和呈线性关系,检出限(3s/k)为0.18μg·L^(-1)。对生鲜牛乳样品进行加标回收试验,TCs回收率为86.4%~106%,测定值的相对标准偏差(n=3)为2.5%~7.1%。方法应用于生鲜牛乳样品的分析,检测结果与国家标准方法GB 31658.6-2021差异不显著(P>0.05),检出的TCs总量也均未超标(GB 31650-2019)。与文献报道的其他方法相比,上述方法兼具简单、快速、检出限低、准确度高等优点,适用于食品中四环素类抗生素多残留的快速检测。

“二轴三阶四思”模型下园林史课程思政系统化建设探索

基于高校推进与落实课程思政教学改革背景,结合“园林史”课程特点,从园林史思政育人目标与价值导向出发,挖掘课程思政要素,将园林历史发展过程中的3个阶段与价值内涵中的4个维度进行系统化整合,提出“三阶明智、四思融合”的课程思政主线,构建“二轴三阶四思”“园林史”思政教学模型,以期提高课程教学质量,为国内专题史类课程思政建设提供参考。

辣椒根际土壤细菌群落与理化性质互作分析

【目的】分析辣椒根际土壤细菌群落与理化性质的互作,为科学防治辣椒土传病害和辣椒高产优质栽培提供参考依据。【方法】以辣椒苗期、花期和坐果期根际土壤(分别标记为SD、FR和FT)为研究对象,测定3组土壤样本中pH、有机质、总氮、碱解氮、总磷、有效磷、总钾和有效钾含量,采用Illumina HiSeq 2500测序平台进行高通量测序,分析辣椒不同生育期根际土壤细菌Alpha多样性指数及门和属分类水平上相对丰度,通过主坐标分析(PCoA)和基于Bray_Curtis距离的细菌群落不相似性检验,分析辣椒不同生育期根际土壤细菌与理化因子的相关性。【结果】随着辣椒生长,SD、FR和FT三者间的pH和碱解氮含量2个指标具有显著差异(P<0.05,下同);3个生育期土壤细菌的Alpha多样性指数和丰富度、Chao1指数均无显著差异(P>0.05);SD中特有操作分类单元(OTUs)数目最多;3个生育期土壤中变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、酸杆菌门(Acidobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和蓝细菌门(Cyanobacteria)均属于优势菌门;SD根际土壤中链霉菌属(Streptophyta)、嗜酸菌属(Acidovorax)、亚硝化球菌属(Nitrososphaera)和Gp6相对丰度较高,FR根际土壤中链霉菌属、亚硝化球菌属(Nitrososphaera)和红游动菌属(Rhodoplanes)的相对丰度较高,FT以链霉菌属和Trinickia为主。主坐标分析(PCoA)和不相似性检验结果显示,不同生育期根际土壤样本细菌群落之间差异显著。相关分析结果显示,土壤pH和碱解氮与细菌群落呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】辣椒根际土壤理化性质及细菌群落结构因生育期不同存在差异,pH和碱解氮是影响细菌群落变化的关键因子。

基于适配体-MOF模拟酶比色检测bPAG9

该研究基于金属有机框架Fe-MIL-101和双适配体夹心原理建立了一种比色检测牛妊娠相关糖蛋白9(bPAG9)的新方法。将生物素化适配体1固定在微孔板上作为捕获探针,Fe-MIL-101功能化的适配体2作为信号探针,当测试样品中含有bPAG9时,适配体1和适配体2与bPAG9结合,在固相载体表面形成双适配体夹心结构,随后适配体2偶联的Fe-MIL-101催化无色过氧化物酶底物产生比色输出信号,通过比色信号的变化即可实现对bPAG9的定性和定量分析。结果显示:在优化条件下,bPAG9在缓冲液中的线性检测范围为0.5~50 ng/mL(r=0.996),检出限为0.13 ng/mL。bPAG9在空白血清中的加标回收率为89.4%~104%,相对标准偏差小于10%。将该方法应用于人工受精28 d的奶牛血清检测,妊娠诊断结果显示,该法的诊断敏感性、特异性和准确率分别为92.5%、90.0%和91.5%。所建方法具有无创、简便、经济等特点,在奶牛早孕检测领域具有良好的应用前景。