高频振荡通气联合肺表面活性物质治疗吸入性肺损伤并急性呼吸衰竭的实验研究

目的探讨高频振荡通气(HFOV)和常规机械通气(CMV)及其联合肺表面活性物质(PS)对重度蒸汽吸入性肺损伤并呼吸衰竭的治疗效果。方法新西兰大白兔37只制成重度蒸汽吸入性肺损伤并呼吸衰竭模型,随机分为五组,采用四种方法进行通气治疗(CMV,HFOV,CMV+PS及HFOV+PS),分别在治疗后1,2,3及4h取动脉血行血气分析。治疗4h后处死动物,取右肺下叶称重后,计算湿质量/干质量比值(W/D);右肺中叶4个不同部位(依赖区和非依赖区)取标本,行病理学检查。对照组不行机械通气。结果伤后PaO2均降至60mmHg以下,各组伤前、伤后组内比较均有显著性差异(P<0.01),各组PaCO2伤前、伤后组间比较均无显著性差异(P>0.05)。4个治疗组的PaO2均在通气治疗1h后明显上升,通气治疗4h内PaO2维持在良好水平。HFOV组和HFOV+PS组的PaO2分别高于CMV组和CMV+PS组(P<0.01,P<0.05);CMV+PS组在伤后2h,HFOV+PS组在伤后2和3h,PaO2明显优于相应未加PS组(P<0.05)。肺泡气-动脉血氧分压差[P(A-a)O2]在HFOV组和HFOV+PS组分别低于CMV组和CMV+PS组(P<0.01,P<0.05);CMV+PS组和HFOV+PS组在治疗2,3及4h,P(A-a)O2均分别显著低于CMV组和HFOV组(P<0.05)。4个治疗组伤后各时点的PaCO2均无明显变化(P均>0.05);伤前、伤后各时点的动脉压和中心静脉压也无明显变化(P均>0.05)。肺组织W/D在HFOV和CMV组,HFOV+PS组和CMV+PS组间比较均无显著性差异(P均>0.05);加用PS组与相应未加PS组比较有显著性差异(P<0.05)。肺组织病理学检查发现HFOV组的损伤程度较CMV组明显减轻,HFOV+PS组损伤最轻,CMV组损伤最重。结论HFOV联合PS能提高蒸汽吸入性损伤兔的PaO2,减轻肺损伤,且对循环功能无不良影响,是治疗吸入性损伤并呼吸衰竭较好的方法。

表达人骨形成蛋白4的非复制型腺病毒的构建与鉴定

目的构建含有人骨形成蛋白4(human bone morphogenetic protein4,hBMP-4)的非复制型腺病毒表达载体pAdE/hBMP-4并检测其表达。方法酶切质粒pCS2(+)/hBMP-4获得目的基因片段,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),再亚克隆至pShuttle-CMV,电转化至含有pAdEasy-1骨架质粒的E.coliBJ5183/p中进行同源重组,重组质粒转染HEK293细胞包装成含有hBMP-4基因的非复制型腺病毒。病毒颗粒感染HEK293和HeLa细胞,提取总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western-blot检测。结果获得了含有目的基因hBMP-4的非复制型腺病毒表达载体pAdE/hBMP-4,酶切鉴定提示构建正确,RT-PCR检测到hBMP-4基因的转录,Western-blot检测到hBMP-4蛋白表达。结论将目的基因hBMP-4克隆至非复制型腺病毒表达载体中,为进一步研究其在基因治疗骨缺损中的应用奠定基础。