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题名大鼠体外肝细胞集落的建立及生长调控研究
被引量:1
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作者
汤习锋
周东耀
徐智民
周晓东
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机构
第一军医大学南方医院实验诊断科
第一军医大学珠江医院实验诊断科
第一军医大学南方医院消化科
中山医科大学第二附属医院医学实验中心
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出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2003年第2期106-109,113,共5页
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基金
九五国家重点科技攻关项目(967500166)
四川省卫生厅医学科研课题(920039)~~
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文摘
目的研究建立体外培养肝细胞集落的关键条件,探讨肝细胞克隆生长的调控机制。方法采用原位预灌流和胶原酶循环灌流分离肝细胞,观察在化学限定培养条件下,肝细胞生长素(HPN)、二甲亚砜(DMSO)及尼克酰胺(NA)对肝细胞DNA合成、有丝分裂象、光镜形态和电镜超微结构的影响。结果肝细胞培养时间进程显示:10 mmol/L NA显著协同HPN促进肝细胞3H-TdR掺入作用,在60和84 h出现2个DNA合成峰;2% DMSO抑制3H-TdR掺入,但在NA共同作用下,肝细胞在132 h表现为DNA合成峰。有丝分裂象显示:HPN+NA+DMSO培养72 h时肝细胞为正常二级分裂,168 h后仍保持相当的有丝分裂活性。光镜下形态及电镜超微结构观察到培养28 d的肝细胞克隆生长特征及增殖潜在性。结论NA及DMSO加入-移除方案可交叉控制HPN作用的肝细胞增殖,所构建的肝细胞克隆生长系统可用于人肝细胞代谢、诱变、细胞中毒及生物转化等研究,并为实施体外克隆肝细胞治疗肝衰竭及遗传性肝疾病提供实验依据。
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关键词
克隆
胶原酶循环灌流
原位预灌流
生长素
细胞培养
肝细胞集落
细胞分裂
肝细胞生长因子
二甲亚砜
烟酰胺
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Keywords
hepatocyte clone
cell division
hepatocyte growth factor
dimethyl sulfoxide
niacinamide
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分类号
R329
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名一氧化氮诱导对肝细胞内环境稳定的影响
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作者
汤习锋
周东耀
康格非
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机构
第一军医大学南方医院实验诊断科
珠江医院实验诊断科
重庆医科大学检验医学系
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出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2002年第2期117-120,共4页
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基金
"九五"国家重点科技攻关项目(967500166)
四川省卫生厅科研基金(920039)
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文摘
目的研究肝细胞诱导性一氧化氮(NO)及外源性NO对肝细胞内环境稳定的影响。方法用内毒素及细胞因子诱导培养大鼠肝细胞内源性NO及应用外源NO供体硝普钠(SNP)与原代肝细胞作用,观察肝细胞丙二醛(MDA)、还原型谷胱苷肽(GSH)及细胞内游离钙的变化规律。结果内毒素+细胞因子作用肝细胞24h后,肝细胞MDA增高7.97倍及GSH降低57.9%,一氧化氮合酶(NOS)竞争性抑制剂NG-甲基-L-精氨酸使肝细胞MDA及GSH分别逆转43.5%和98.4%。异搏定显著抑制内源性NO合成及相关氧应激,A23187的作用不显著,而氯丙嗪和α-生育酚并不导致内毒素+细胞因子诱导肝细胞释放的NO下降。SNP作用肝细胞表现为可逆性增强氧化态,但外源NO显著抑制K+去极化及肝细胞生长素诱导动员的肝细胞游离钙瞬增。结论在内毒素及细胞因子导致肝细胞代谢和功能应激反应中,诱导NO、独立介导脂质过氧化和抗氧化能力下降,可能具有起始关键作用;NO抑制肝细胞内游离钙动员,可能通过负反馈调节与蛋白激酶C相关的NOS诱导而作为一种重要的肝细胞内伺服调控机制。
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关键词
一氧化氮
脂质过氧化
钙
内毒素
肝
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Keywords
nitricoxide
lipidperoxidation
calcium
endotoxins
liver/cytology
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分类号
R446
[医药卫生—诊断学]
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