呼吸道合胞病毒融合蛋白(RSV-F)mRNA疫苗设计及其在小鼠中细胞和体液免疫应答评估

目的开发候选的呼吸道合胞病毒融合蛋白(Respiratory syncytial virus fusion protein,RSV-F)信使核糖核酸(Messenger ribonucleic acid,mRNA)疫苗,初步评价在小鼠中的细胞和体液免疫应答。方法选择4个编码RSV A2毒株全长F蛋白的基因序列,在体外设计RSV_(A2)-F突变体(WT_(A2)-F、DS-CAV1-Tric、SC-DM和DS2)mRNA疫苗,利用免疫印迹法鉴定在人胚肾(HEK-293)细胞中的表达;在采用该4种mRNA疫苗和RSV-F疫苗免疫小鼠2剂次(间隔2周)后12d检测血清γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、特异性免疫球蛋白(IgG)抗体和中和抗体水平。结果4种RSV_(A2)F突变体mRNA疫苗均在HEK-293细胞中检测到表达。在小鼠免疫2剂次后,WT_(A2)-F mRNA疫苗组IFN-γ和IL-4水平显著高于RSV-F疫苗组;WT_(A2)-F mRNA疫苗组和RSV-F疫苗组均诱导特异性IgG且抗体水平无显著性差异,但前者诱导的中和抗体水平显著高于后者;post-F构象的WT_(A2)-F mRNA疫苗组与pre-F构象的mRNA疫苗组(DS-CAV1-Tric、SC-DM和DS2)均诱导特异性IgG抗体,但各mRNA疫苗组IFN-γ、IL-4和中和抗体水平均无显著性差异。结论RSV_(A2)F突变体mRNA疫苗在小鼠体内可诱导强烈的细胞和体液免疫应答,可作为潜在的RSV候选疫苗进一步研究。