出入境人员丙型肝炎病毒感染者miRNA-122表达变化研究

目的探讨珠海口岸出入境人员丙型肝炎病毒(HCV RNA)感染者外周血miRNA-122表达的变化及其对丙型肝炎患者的临床意义。方法收集96例丙型肝炎IgG抗体初筛阳性患者外周血,定量检测HCV RNA水平。对HCV RNA阳性患者检测miRNA-122、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及检查肝脏超声影像学改变,并进行相关性分析。结果 96例HCV IgG阳性患者检测出49例HCV RNA阳性,占60.9%;两组患者miRNA-122表达水平差异有统计学意义(P<0.01);与ALT呈正相关,与HCV RNA无相关性。B超检查发现11例合并轻度脂肪肝,合并脂肪肝患者miRNA-122表达水平高于无脂肪肝患者。结论 HCV阳性患者循环miRNA-122表达可能与病毒复制无关,而是反映肝脏组织活动性损害和病变严重性的指标。

肝素抗凝血浆对钒酸盐氧化法测定总胆红素的影响

目的:观察肝素抗凝的血浆对钒酸盐氧化法测定总胆红素的影响。方法:将同一份新鲜血样分别注入肝素抗凝管、普通生化管、EDTA抗凝管等分离出血浆或血清后,再吸取1.0 ml血清注入肝素抗凝管摇匀,然后分别测定这4种样品的总胆红素及反应过程的光密度曲线。结果:观察了56份样品,测定结果显示:肝素抗凝血浆的总胆红素有46.4%(26/56)出现负值,41.1%(20/56)与对应的血清值相差超过20%以上;EDTA抗凝血浆的结果与血清结果基本吻合,相差均在10%以内;血清放入肝素抗凝管内混匀后的标本中有35.7%(20/56)与血清值相差超过20%;肝素抗凝血浆和血清放入肝素抗凝管内混匀后标本的光密度曲线100%出现不同程度的异常。结论:钒酸盐氧化法测定总胆红素不能使用肝素抗凝血浆。

基于表面等离子共振的适配体传感器应用研究进展

基于表面等离子共振的适配体传感器是利用适配体进行高特异性、高灵敏度、高通量检测的新型生物传感器。我们在简要阐述适配体的筛选方法、偶联技术及适配体传感器工作原理的基础上,结合最新的研究结果,对基于表面等离子共振的适配体传感器在生物活性小分子检测、传染病检测、肿瘤标志物检测、食品安全监测等方面的应用研究进展进行了综述。

珠海市冬春季节儿童病毒性腹泻的流行病学特征

目的探讨珠海市冬春季节儿童诺如病毒（NV）、扎如病毒（sV）和星状病毒（AstV）等3种重要病毒性腹泻的流行病学特征。方法采集2009年11月21日至2010年4月3日在珠海市妇幼保健院就诊的腹泻儿童粪便样本，选取轮状病毒和腺病毒筛查阴性的样本，采用逆转录-聚合酶链反应（RT．PCR）技术检测NV、SV和AstV的特异基因片段，并对诺如病毒检测阳性的样本进行分子分型。结果3种病毒季节总检出率为21．49％，其中2009年12月的检出率最高，为29．05％，而2010年2月检出率最低，为12．20％，87．96％的阳性样本来自0—30月龄患儿。NV、SV及AstV的季节检出率分别为14．70％、2．75％和4．04％，3种病毒中以NV和SV各月份阳性检出率差别较大，而AstV较为一致，12—18月龄患儿NV检出率最高（34．09％），60～120月龄患儿sV检出率最高（12．5％），24～30月龄患儿AstV检出率最高（16．67％）。诺如病毒经分子分型后均为GII型。结论NV是引起2009年冬春季节珠海市儿童病毒性腹泻的主要病原之一，SV与AstV也是重要的病原，应加强对婴幼儿NV、SV和AstV等3种重要病毒性腹泻的监测和防控工作。

珠海禽类养殖场从业人员SARS冠状病毒IgG抗体检测分析

〔目的〕 了解SARS冠状病毒在禽类养殖人员中的隐性感染情况 ,以探讨SARS冠状病毒的传播与家禽类动物的关系。〔方法〕 采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)间接法测定禽类养殖场从业人员血清样本中的SARS冠状病毒IgG抗体。〔结果〕 2 70份血清标本的OD值均小于临界值 ,表明在禽类养殖从业人员中未检出SARS冠状病毒IgG抗体阳性指标。〔结论〕 本次研究结果显示 ,在禽类养殖场从业人员中不存在SARS冠状病毒的隐性感染 ,说明SARS病毒的传播可能与家禽动物没有直接关系。

国境口岸13蚊种COⅠ部分基因序列分析及应用

目的分析国境口岸13蚊种的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）基因序列,为建立蚊种分子鉴定方法奠定基础。方法设计1对扩增COⅠ部分编码区的PCR引物,对广东、海南和云南等国境口岸采集的致倦库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊等成蚊进行PCR扩增和序列测定,分析COⅠ核苷酸的系统进化关系。结果 13种蚊种的COⅠ基因扩增片段长度均约为400 bp,A＋T含量为69.64%~72.78%。同源性比较表明,同一蚊种间核苷酸序列同源性〉95.6%;不同蚊种间COⅠ片段核苷酸序列同源性为79.1%~93.4%。COⅠ核苷酸系统进化关系显示,从种的水平上看,白纹伊蚊、致倦库蚊、中华按蚊等上述所有蚊种均聚集成簇,即同种之间呈明显的聚集,均与形态学鉴定结果相一致。结论建立的COⅠ核苷酸鉴别技术可应用于国境口岸范围内成蚊种的区分,基本上可正确反映蚊虫的系统发育关系。这可以弥补蚊虫形态特征信息量的不足等传统分类系统的缺点,为国境口岸范围内外来的或新发现的蚊种的鉴别提供分子水平的技术依据。

布鲁氏菌抗体时间分辨荧光检测方法的建立

用布鲁氏菌的Bp26蛋白包被免疫层析试纸条的检测线,以稀土荧光纳米颗粒标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)作为信号报告基团,建立了检测布鲁氏菌抗体的时间分辨荧光检测方法。用制备的稀土荧光试纸条检测715份牛血清,与虎红平板凝集试验结果的符合率为92%,且与牛巴贝斯虫阳性血清、牛结核菌阳性血清、牛副结核杆菌阳性血清、口蹄疫阳性血清均无交叉反应,检测灵敏性好于胶体金试纸条。

霍乱弧菌分子分型和溯源技术ISSR-PCR的改进

目的对简单序列重复区间聚合酶链反应(ISSR-PCR)进行改进和优化,以建立一种改进型霍乱弧菌分子分型和遗传溯源技术。方法通过设计、筛选优良扩增引物和优化反应体系对ISSR-PCR进行技术改进,并选择75株霍乱弧菌作为方法学的分型测试样品进行实验验证。结果经筛选以引物ISSR_GA5分型效果最佳。对ISSR-PCR实验条件进行优化,确定最佳反应体系:Mg2+浓度为2.0mmol/L,dNTPs浓度为0.3mmol/L、引物浓度为1.2μmol/L。采用改进型ISSR-PCR技术能正确区分霍乱弧菌菌株中的产毒株(流行株)和非产毒株(非流行株)、O1群/O139群和非O1/非O139群以及本地株和外地株。结论建立的改进型ISSR-PCR技术分型效率高,为我国卫生检疫和疾控部门开展霍乱等重要传染病的防控和疫情溯源提供了新的、简便实用的技术方法。

一种诺如病毒快检试剂盒的评价

目的系统评价一种诺如病毒快检试剂盒的检测性能。方法收集130份非轮状病毒感染的腹泻样本,分别采用德国拜发公司生产的RIDA快速检测试剂盒和检验检疫行业标准中推荐的RT-PCR方法平行检测诺如病毒,统计分析两种方法的检测结果 ,并用RT-PCR测定快检试剂盒的最低检测下限。结果在130例腹泻样本中,快检试剂盒检出21例诺如病毒阳性,检出率为16.2%,RT-PCR检出24例诺如病毒阳性,检出率为18.5%。两种检测方法的符合率为97.7%(127/130),两种方法的检测结果差异无统计学意义(P=0.25),快检试剂盒的最低检测下限可达到1 000拷贝数。结论基于固相膜免疫测定的诺如病毒快检试剂盒具有较高的特异性和灵敏度,可以用于临床病毒性腹泻样本的快速筛检和国境口岸的应急检测。