基于AHP-FCE模型的珠海进出口公共技术服务平台运行能力评价实证研究

加强公共技术服务平台建设对于提高中小企业质量技术水平、增强自主创新能力、实现战略转型具有重要意义,而建立科学、完善的绩效评价体系是推动平台健康发展的有力保障。以珠海进出口公共技术服务平台为例,从建设者和使用者的视角,应用层次分析法与模糊综合评判法构建平台运行能力综合评价模型,对其2015年运行状况进行实证分析,并根据分析结果提出改进措施和建议,为平台建设运行与可持续发展提供参考依据。

高效液相色谱-电喷雾串联技术测定奶及奶制品中三聚氰胺和环丙氨嗪

试样经1%三氯乙酸-二甲基亚砜提取,Waters Oasis MCX柱净化,电喷雾串联四级杆质谱进行检测。本方法检测三聚氰胺、环丙氨嗪的线性范围为10～5000μg/kg,线性相关系良好(r>0.99);在10～100μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为86%～98%;相对标准偏差为3.8%～7.5%;方法检出限为10μg/kg。

黄瓜绿斑驳花叶病毒广东分离物的分子鉴定

采用RT-PCR方法,扩增并测定了黄瓜绿斑驳花叶病毒广东分离物(CGMMV-GD-GZ,CGMMV-GD-LZ,CGMMV-GD-LF)的外壳蛋白(coat protein,CP)和运动蛋白(movement protein,MP)基因序列。结果显示,CP基因序列全长486 bp,编码161个氨基酸;MP基因全长795 bp,编码264个氨基酸。CGMMV广东分离物与其他15个CGMMV分离物之间外壳蛋白基因核苷酸的同源性在90.9%～100%之间,运动蛋白核苷酸同源性为92.7%～100%;与同属其他13种病毒基因组核苷酸序列同源性分别仅为29.5%～56.2%和38.8%～61.8%。基于外壳蛋白和运动蛋白基因序列构建系统发育树显示,CGMMV不同分离物进化为亚洲和欧洲两大群体,3种CGMMV广东分离物与韩国、日本等亚洲分离物同源性极高,可能具有共同的侵染源。

超高效液相色谱-电喷雾串联技术测定猪组织中7种β-兴奋剂

2g猪组织样品经β-葡萄糖苷酸酶酶解,0.2mol/L高氯酸沉淀蛋白,用乙酸乙酯-异丙醇(6+4,V/V)和叔丁基甲醚提取,旋转蒸发器减压蒸干,正己烷脱脂后,样液用UPLC分离,电喷雾串联四级杆质谱进行检测,本方法研究的7种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗和异舒普林)的线性范围为0.25～500μg/kg,线性相关系数r>0.99;0.5～10μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为75.2%～96.7%;相对标准偏差为5.6%～13.1%;方法检出限(LOD)为0.1～0.25μg/kg。

植物检疫性有害生物蔗扁蛾的PCR快速鉴定

基于PCR分子检测技术,建立了进境植物检疫性有害生物蔗扁蛾(Opogona sacchari)快速、准确的鉴定方法。该方法对待检样品的基因组DNA经PCR扩增后进行凝胶电泳图分析,实现对待检样品的准确鉴定,检测时间缩短至8 h内,检测基因组DNA质量浓度限度为1 ng/μL,最适检测限为10 ng/μL以上。

轻工纺织检测技术研究

随着中国社会经济的发展和科学技术的不断进步,现代纺织工业迅速发展,现代纺织机械检验技术也在不断升级。在信息时代,电子信息技术在各方面都得到了运用,自动化技术、电子通信技术等高新技术是在纺织品检测领域中得到充分应用的体现。一方面,它改进了现代纺织品检测技术的方法和手段,另一方面,提高了轻工纺织品的检测能力。在中国,现代纺织检测设备功能日臻完善,并向自动化和智能化方向发展。利用这些信息检测设备,在一定程度上提高了检测技术,并开发了传统的原材料性能测试,用来检测纱线和纤维的性能。本课题对现代纺织品检测技术的特点进行了分析,进一步探讨现代纺织品检测技术的发展方向。

超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺

饲料样品经1%三氯乙酸-二甲基亚砜提取,Waters OasisMCX柱净化,超高效液相色谱分离,最终采用电喷雾串联四极杆质谱进行检测。结果表明,三聚氰胺在饲料中的含量范围为10～5000μg/kg时,线性关系良好（r〉0.99）。在10～100μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为83%～94%,相对标准偏差为4.2%～6.5%。该方法的检出限为10μg/kg。

超高效液相色谱-串联质谱法快速检测水产品中喹乙醇及其代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羟酸的残留

建立了水产品中喹乙醇（OQX）及其代谢物3-甲基-喹噁啉-2-羟酸（MQCA）的超高效液相色谱串联质谱快速测定方法。试样经乙酸乙酯＋乙腈（1＋1，V／V）液液萃取提取和净化后，BEHC18UPLC进行分离，多反应选择离子检测。方法的回收率和变异系数分别在62．5％91．4％和2．6％-11．8％之间。本方法对水产品中喹乙醇和3-甲基-喹噁啉-2-羟酸的检测限均为1．0~g／kg。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量

建立了猪组织中9种β-兴奋剂(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、利托君、特布他林、班布特罗、妥布特罗、西马特罗和异舒普林)多残留的液相色谱-四极杆/线性离子阱串联质谱(QTrap LC-MS/MS)检测方法。样品经β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解提取,液液萃取净化,以乙腈-甲酸水溶液为流动相,经C18柱分离后用QTrap LC-MS/MS进行多反应监测(MRM)、信息相关采集(IDA)、增强子离子扫描(EPI)和谱库检索分析。9种β-兴奋剂的线性范围为0.1～50.0μg/L,线性关系良好(r>0.99);样品中9种目标物在0.5、1.0和5.0μg/kg添加水平下的回收率为72.0%～95.1%,相对标准偏差为3.1%～12.1%;方法检出限为0.1～0.2μg/kg。实际样品检测结果表明,本方法可实现猪组织样本中β-兴奋剂残留量的灵敏、准确的定性和定量分析。

可视芯片检测大豆、水稻和玉米中的转基因成分

本研究选取9种常见转基因食品外源基因,设计了引物对与探针,并制备可视芯片。通过PCR对样品核酸进行扩增,将扩增产物与固定于可视芯片的特异性探针进行杂交分析,验证了芯片的特异性和重复性,并对检测芯片灵敏度进行测试。该方法可以一次检测出5种的常见转基因植物,且实验结果表明该方法高效、准确、简便、高通量、实用性强,灵敏度可达0.1%,并摆脱了基因芯片在杂交结果分析阶段对荧光扫描仪的依赖,杂交结果明显直观。

高效液相色谱法同时测定葡萄酒中16种添加剂

研究同时测定葡萄酒中16种添加剂的高效液相色谱方法。该法主要采用CAPCELL PAK C_（18）柱（150 mm×4.6 mm,5μm）分离,以甲醇-20 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,采取梯度洗脱,在波长250 nm处进行测定。结果表明,在0.1~20 mg/L的质量浓度范围内线性相关系数良好,相关系数范围为0.999 3~0.999 7,方法检出限范围为0.01~0.5 mg/L,相对标准偏差在0.3%~6.3%之间,平均回收率范围在76.5%~108.5%之间。本方法简便、可靠,能满足对市场上葡萄酒中相关非法添加剂的检测监控要求。

LAMP实时浊度法快速检测转基因玉米MON810

LAMP实时浊度法是采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术通过实时浊度仪实时检测反应过程中所产生的白色沉淀,从而实现对扩增全过程的监控,弥补了显色法只能观看反应终点的缺陷,使引物筛选和反应体系的优化有数据可依。本研究以转基因玉米MON810为研究对象,针对外源基因苏云金芽孢杆菌杀虫毒蛋白CryIA(b)与内源基因边界序列设计6条特异性引物,通过实时浊度法在63℃的恒温条件下完成检测,对检测的灵敏度、特异性、稳定性进行了评价。建立了转基因玉米MON810的LAMP实时浊度检测方法,该方法最低检出限为0.5%,与LAMP显色法和实时荧光PCR法进行结果比对,符合率为100%,经评价具有特异性高、稳定性强、准确简便等优点,非常适合转基因玉米MON810的快速检测,有较好的应用价值。

RT-PCR法特异性快速检测黄瓜绿斑驳花叶病毒

根据黄瓜绿斑驳花叶病毒运动蛋白基因序列,设计并合成了特异性PCR检测引物,建立该病毒的快速检测方法。该方法可以从带毒叶片中扩增到约591 bp的片段,而TMV属其他9种病毒均无特异性扩增。本方法也适用于带毒种子的检测,具有准确、灵敏及时效性强等特点,为进出境植物检疫和农业安全生产提供可靠的技术支持。

液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中13种氟喹诺酮类药物

采用MRM→IDA→EPI→谱库检索模式建立了猪组织中13种氟喹诺酮类药物的液相色谱-电喷雾串联质谱多残留检测方法,结合谱库检索功能同时实现了定性定量分析。组织样品经N,N-二甲基甲酰胺-乙腈混合溶液提取,Waters HLB柱净化,本方法13种氟喹诺酮类药物的线性范围为1.0～5000.0μg/kg,线性相关系良好(r>0.99);在2.0～20.0μg/kg的添加水平范围内的平均回收率为81.6～114%;相对标准偏差为1.1～11.2%;方法检出限为0.1～0.5μg/kg。

直接甲醇提取气相色谱测定BHA、BHT

目的:该设计方案不需预先萃出测定组分,直接用甲醇将含油脂试样中的抗氧化剂丁基羟基茴香醚(BHA)与2,6二叔丁基对甲酚(BHT)提取。方法:气相色谱氢火焰离子化检测。结果:BHA和BHT的定量检测范围分别为0.008～0.104g/kg和0～0.088g/kg,RSD4%,标准曲线的r>0.999,加标回收率95%～108%。结论:方法简便,结果准确,满足出入境食用油及食品中抗氧化剂(BHA、BHT)的定量分离测定。

PCR法检测动物源性食品中布氏弓形菌

弓形菌是一种新型食源性致病菌,其中以布氏弓形菌污染率最高。本研究采用扩增23S rRNA的PCR法特异性检测布氏弓形菌,方法灵敏度可达103CFU/mL。2株布氏弓形菌均特异性地扩增出了长度为2061 bp的条带;嗜低温弓形菌、斯氏弓形菌、空肠弯曲菌等共18株不同种类的菌株均无扩增产物出现,表明此PCR法能特异性的将布氏弓形菌鉴定到种一级水平。比较实验结果表明,API CAMPY鉴定试剂盒对于布氏弓形菌鉴定仅能到弓形菌属一级水平,本PCR法能实现布氏弓形菌种一级水平的鉴定,用于布氏弓形菌的检测具有优势。55份动物源性食品样品用Johnson-Murano肉汤增菌后用PCR法进行检测,其中5份样品为布氏弓形菌阳性,阳性检出率为9.1%。上述实验结果表明,本方法特异性强、操作简便,节省了检测时间,可用于动物源性食品中布氏弓形菌的快速检测。

5种乳白蚁ITS序列及系统发育关系分析

对我国口岸截获的5种乳白蚁及黄胸散白蚁的ITS区基因序列进行克隆并测序,进行序列分析和构建系统发育树,探讨其系统发育关系。研究结果表明:乳白蚁rDNA-ITS基因序列长度约900 bp,CG碱基含量为62.3%,明显高于AT含量(37.7%)。同巢群3种不同品级的乳白蚁(工蚁、兵蚁、有翅成虫)ITS序列没有遗传分歧。乳白蚁属内不同种间的同源性为94.3%～98.7%,同种不同地理种群之间的同源性均大于99%。大家白蚁C.curvignathus和塞庞乳白蚁C.sepangensis关系最近,婆罗乳白蚁C.travians与其他种进化距离最远。

婴幼儿配方乳粉中唾液酸含量的测定

建立婴幼儿配方乳粉中唾液酸含量测定的液相色谱方法.用酸水解法释放婴幼儿配方乳粉中存在的唾液酸,在80℃下与邻苯二胺衍生50 min;采用SB-AQ C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）对衍生产物进行分离,流动相为乙腈-1％四氢呋喃水溶液（含0.2％的磷酸）进行梯度洗脱,荧光检测器检测（激发波长231 nm,发射波长465 nm）.结果表明,唾液酸在1.0～60.0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为R2=0.999 8,回收率在95.0％～105.2％之间,变异系数在0.6％ ～1.9％之间,检测限为10.0 mg/100g.该方法简便、快速、可靠,可用于市售婴幼儿配方乳粉中唾液酸含量的测定.

食品和饲料中转基因植物FMV35S启动子环介导等温扩增检测方法的建立

[目的]建立FMV35S基因启动子环介导等温扩增的检测方法。[方法]建立一种检测食品和饲料中FMV35S转基因成分的环介导恒温扩增(LAMP)检测方法,并利用实时浊度法对该LAMP检测方法进行灵敏度、特异性和稳定性评价。[结果]该方法的检测限为0.5%,特异性和稳定性良好。采用LAMP法与荧光PCR方法进行了实际样品对比检测,结果一致可靠。[结论]可采用LAMP法对食品和饲料中FMV35S转基因成分进行检测。