丙型肝炎病毒结构基因转基因小鼠引起肝脏脂肪变

目的:建立持续表达和诱导表达型丙型肝炎病毒(HCV)结构基因(包括核心蛋白和包膜蛋白E1、E2编码基因)的转基因小鼠动物模型,探讨HCV结构基因表达导致肝脏脂肪变的病理改变.方法:以含有近全长HCVcDNA的质粒为模板,通过多聚酶链反应(PCR)技术扩增HCV结构基因的DNA片段(约2.2kb),克隆到真核表达载体pcDNA4HisMas和pMT/BiP/V5-HisA中,分别构建成持续表达型表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和诱导表达型表达载体pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2.以限制性内切酶分析和目的DNA片段的核苷酸序列分析,证实构建HCV结构基因的真核表达载体正确无误.以脂质体体外转染COS-7细胞系,利用抗-HCVE2的多克隆抗体进行Westernblot杂交分析,证实转染细胞中有HCVE2蛋白的表达.利用小鼠受精卵细胞核微注射方法,导入线性化表达载体的DNA,利用假孕小鼠的受精卵植入方法,建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠模型.对于持续表达型转基因小鼠的死胎、6月龄以及硫酸铜诱导表达型的转基因小鼠模型的肝脏组织,进行HE染色和病理学特征的分析.结果:构建了持续性表达和可诱导性表达型的HCV结构基因表达载体pcDNA4HisMas-HCVCore-E2和pMT/BiP/V5-HisA-HCVCore-E2,体外转染COS-7细胞证实转染细胞中有HCVE2抗原的表达.对于持续表达型转基因小鼠死胎肝脏病理学特征进行分析,发现肝组织尚未分化发育完成,肝内有大量造血细胞,肝细胞空泡变性,单个核细胞聚集现象.对于持续表达HCV结构基因的6月龄转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现中央静脉区肝细胞小泡型脂肪变性,中央静脉周围细胞溶解坏死,中央静脉明显扩大,少数组织中亦见大泡型脂肪变性.对于可诱导型转基因小鼠的肝脏进行病理学分析,发现肝小叶内中央静脉周围坏死区累及5-10个小叶,周围无淋巴细胞浸润,交界区可见多数肝细胞核异常,或固化,或呈花环状,或溶解为淡蓝色无定形基质.泡浆内残留大量脂肪小泡,肝脏脂肪变与核异常有一移行过程.结论:建立了表达HCV结构基因的转基因小鼠,发现HCV结构基因的转基因小鼠肝脏有典型的脂肪变病理改变,为进一步研究HCV感染引起的慢性丙型肝炎合并脂肪变的特征和机制研究奠定了基础.

牛初乳提取物乳珍对老年人中性粒细胞吞噬功能的影响

将健康老年人分为三组,分别口服了牛初乳提取物乳珍(B组)、淀粉(C组)及奶粉(A组)三种胶囊制剂并测定其外周血中性粒细胞的吞噬功能。结果表明乳珍提高老年人外周血中粒粒细胞的吞噬百分率(8.78±10.02)明显高于其他两组(P<0.01),老年人服乳珍后能显著增强中性粒细胞的吞噬活性,提高免疫功能,因此认为乳珍是一种有一定效果的延缓衰老营养品。

类风关患者血浆和关节积液中纤维结合蛋白含量测定

本文运用ＥＬＩＳＡ法分别测定了９名正常献血员、１５例类风关患者血浆及其中３例患者关节积液中的纤维结合蛋白总含量（ＦＮＴ）、细胞型纤维结合蛋白（ＦＮＡ＋）的含量。结果显示类风关患者血浆中ＦＮＡ＋的含量高于对照组（Ｐ＞０．０５）。５３％患者（８例）血浆中ＦＡＡ＋含量高于正常值，而合并有血管炎或干燥综合征的患者ＦＮＡ＋含量明显高于无合并症者（Ｐ＜０．０１）。关节积．液中ＦＮＡ＋与ＦＮＴ的比值明显高于血浆中ＦＮＡ＋与ＦＮＴ比值，结果提示，在类风关的病变过程中，关节局部有ＦＮＡ＋生物合成的加快，部分ＦＮＡ＋进而进入血液循环，导致血浆中这一型纤维结合蛋白含量的增高。