掌叶大黄多糖纯化方法对比实验研究

目的探索掌叶大黄多糖高产量和高纯度的分离纯化方法。方法采用超滤法、超滤-醇沉法和传统水提-醇沉法,通过测定大黄多糖得率和含量(纯度)比较3种纯化方法的优劣。结果超滤法所得大黄多糖得率和纯度均高于超滤-醇沉法和传统水提-醇沉法。结论用超滤膜技术可以纯化、富集掌叶大黄多糖,具有工艺简单,成本低,环保无污染,所得制品收率高、纯度好等特点,克服了传统水提-醇沉法成本高、周期长的缺点,具有产业化的开发前景。

GC-MS分析当归熏硫前后挥发油的化学成分

目的:比较当归熏硫前后挥发油的变化,为评价熏硫加工对当归质量的影响提供依据。方法:对当归进行熏硫加工,采用水蒸气蒸馏法提取挥发油并采用GC-MS联用技术进行分析。结果:当归熏硫前后挥发油的含量未熏硫、0.2%熏硫、1.0%熏硫、5.0%熏硫分别为0.19%、0.31%、0.19%、0.25%;从其挥发油中分别鉴定出23、18、25、27个化合物,分别占总挥发油含量的99.84%、100%、99.84%、99.63%;当归挥发油的主要成分α-蒎烯、3,7-二甲基-1,3,6-辛三烯、藁本内酯和正丁烯基藁本内酯占总挥发油的相对含量分别为96.90%、95.51%、86.40%、86.97%。结论:当归熏硫加工后,挥发油的含量有所增加,但其主要成分占总挥发油的比例有所下降。说明采用低剂量的硫磺进行熏蒸,对当归挥发油的影响不大,但高剂量熏硫对当归挥发油影响较大。

盐酸小檗碱、吴茱萸挥发油、大黄总蒽醌促进苦参碱透皮吸收的量效关系研究

目的研究不同质量分数的盐酸小檗碱、吴茱萸挥发油、大黄总蒽醌对苦参碱透皮吸收的影响。方法采用YB-P6型智能透皮试验仪,以小鼠皮肤为渗透屏障进行体外透皮吸收试验,采用HPLC法测定苦参碱的量,计算累积透过量和透皮速率等渗透动力学参数。结果不同质量分数(5%、3%、1%)的3种物质对苦参碱透皮吸收的影响为吴茱萸挥发油3%>1%>5%>空白,大黄总蒽醌5%>空白>3%>1%,盐酸小檗碱空白>1%>3%>5%。结论吴茱萸挥发油对苦参碱有显著的促透作用,大黄总蒽醌不明显,盐酸小檗碱不仅无促透作用,反而抑制其透皮吸收。

微波干燥对党参中党参炔苷含量的影响

目的:考察微波干燥对党参中党参炔苷含量的影响,为科学评价及有效控制其质量提供依据。方法:采用HPLC法、梯度洗脱、超声提取法。所采用的色谱条件为:色谱柱:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流速:1.0 m L/min,检测波长:267 nm,柱温:25℃,流动相:乙腈-0.05%磷酸水梯度洗脱系统。结果:测定条件相同时,不同微波时间(5 min、5.5 min、6 min,中火),25%蜜炙党参微波5 min时,党参炔苷的含量较高。结论:不同微波时间会影响党参中党参炔苷的含量,25%蜜炙、微波5 min时,党参中党参炔苷含量较高,同时,采用HPLC方法测定党参中党参炔苷的含量,操作简单,结果可靠,重现性好,可作为甘肃道地药材党参及其炮制品质量控制的有效方法。

高乌头总生物碱定量测定方法优化研究

目的:建立高乌头总生物碱含量测定方法。方法:采用酸性染料比色法测定总生物碱含量。以氢溴酸高乌甲素为对照品,溴甲酚绿为酸性染料,用氯仿进行萃取(pH值5.4)。采用单因素实验,选择最佳显色条件和检测波长。结果:最佳显色条件为:醋酸-醋酸钠缓冲液(pH值3.0±0.1)和0.1%溴甲酚绿溶液用量均为10.0 mL,最佳检测波长为413 nm。氢溴酸高乌甲素在4.44-17.76μg/mL范围内浓度与吸光度呈良好的线性关系,回归方程为:A=41.977 C-0.1004(r=0.995 2),平均回收率为91.79%,RSD为2.52%(n=6)。结论:3批样品测定结果表明,所建立的方法简便、准确,可用于高乌头总生物碱含量测定。

吴茱萸挥发油、芥子油、大黄总蒽醌对阿魏酸体外经皮渗透的影响

目的:考察吴茱萸挥发油、芥子油、大黄总蒽醌作为促渗剂对阿魏酸经皮渗透的影响。方法:采用YBP6型智能透皮试验仪,以小鼠离体腹部皮肤为渗透屏障,采用HPLC法对阿魏酸进行含量测定,考察3种促渗剂在12 h内对阿魏酸累积渗透量、透皮吸收速率、透皮时滞等体外透皮吸收动力学参数的影响。结果:吴茱萸挥发油、芥子油、大黄总蒽醌的渗透速率分别为:1.9680、9.0627、5.7389μg/(cm2·h),增渗倍数(ER)分别为:0.95、4.39、2.77,透皮时滞分别为0.09、1.76、1.86 h。结论:3种天然透皮促渗剂均能明显促进阿魏酸的透皮吸收。

3种生物碱透皮促进剂对阿魏酸体外经皮渗透的影响

目的考察吴茱萸生物碱、芥子碱硫氰酸盐、盐酸小檗碱对阿魏酸的透皮促渗效果,筛选有效的透皮吸收促进剂,提高阿魏酸的透皮速率。方法采用YB-P6型智能透皮试验仪,以小鼠离体腹部皮肤为渗透屏障,采用HPLC法对阿魏酸进行测定,考察3种促进剂对阿魏酸累积渗透量、透皮吸收速率、透皮时滞等体外透皮吸收动力学参数的影响。结果吴茱萸总生物碱、芥子碱硫氰酸盐、盐酸小檗碱的渗透速率分别为:9.086 1、26.396 0、8.663 9μg(cm2·h),增渗倍数(ER)分别为:12.79、4.40、4.20,透皮时滞分别:0.03、0.74、1.50 h。结论 3种天然透皮促进剂均能明显促进阿魏酸的透皮吸收,为研究其透皮给药提供参考依据。

吴茱萸总生物碱的提取纯化及HPLC含量测定

目的:对吴茱萸生物碱进行提取纯化,并测定其含量,为中药外用制剂提供天然透皮促进剂。方法:利用吴茱萸碱和吴茱萸次碱的溶解性,采用浓度为70%乙醇提取吴茱萸生物碱,用中性氧化铝柱层析进行纯化,采用高效液相色谱法测定其含量。结果:吴茱萸碱的回归方程:y=5501x+35.37(r=0.999 5),线性范围为0.027-1.350μg,线性关系良好;吴茱萸次碱回归方程:y=1970x-4.018(r=0.999 5),线性范围为0.021 4-1.070 0μg,线性关系良好。吴茱萸总生物碱含量可达到86.6%。结论:该提取纯化方法所得样品纯度高,达到了提取有效部位要求,可为中药外用制剂选择天然透皮促进剂提供参考。

芥子碱的提取纯化及HPLC法含量测定

目的:从白芥子中提取纯化芥子碱硫氰酸盐,并测定其含量,为中药外用制剂提供高纯度的天然透皮吸收促进剂。方法:白芥子脱脂,用不同浓度乙醇提取、浓缩物加20%硫氰酸钾溶液析晶,用蒸馏水反复重结晶。采用高效液相色谱法测定含量。色谱柱:Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:2%醋酸-乙腈(15∶85),检测波长:326 nm,流速:1.0 m L/min,柱温:30℃。结果:用80%乙醇提取,蒸馏水和20%硫氰酸钾溶液比例为4∶1时,所得芥子碱呈浅黄色针状结晶,得率0.51%,含量95.70%。结论:采用本法提取纯化芥子碱,方法简单,纯度高,可为中药外用制剂选择天然透皮促进剂提供参考。

吴茱萸挥发油、芥子油及大黄总蒽醌对芍药苷体外经皮渗透的影响

目的考察吴茱萸挥发油、芥子油、大黄总蒽醌作为促渗剂对芍药苷经皮渗透的影响。方法采用YB-P6型智能透皮试验仪,以小鼠离体腹部皮肤为渗透屏障,采用高效液相色谱法对芍药苷含量进行测定,考察吴茱萸挥发油、芥子油、大黄总蒽醌3种促渗剂在12 h内对芍药苷累积渗透量、透皮吸收速率、透皮时滞等体外透皮吸收动力学参数的影响。结果吴茱萸挥发油、芥子油、大黄总蒽醌的渗透速率分别为8.188 6、3.4117、1.230 3 g/(cm2?h),增渗倍数分别为22.6、9.40、3.40,透皮时滞分别为0.93、0.51、0.83 h。结论 3种天然透皮促渗剂均能明显促进芍药苷的透皮吸收,为其作为透皮促渗剂提供了参考依据。

黄管秦艽中总裂环烯醚萜苷对白细胞介素-1β诱导下大鼠软骨细胞的影响

目的通过考查甘肃习用药材黄管秦艽栽培种和野生种中总裂环烯醚萜苷对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的大鼠软骨细胞的影响,探讨栽培种和野生种黄管秦艽中总裂环烯醚萜苷治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的可行性。方法取大鼠关节软骨细胞第4代,将第4代软骨细胞分为4组:空白组(A组)软骨细胞用完全培养基培养;白细胞介素-1β诱导组(B组)软骨细胞以10ng·mL-1重组大鼠白细胞介素-1β培养24 h;白细胞介素-1β和栽培种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷组(C组:分为C1组50μg·mL-1;C2组200μg·mL-1;C3组400μg·mL-1)软骨细胞以10 ng·mL-1重组大鼠白细胞介素-1β和栽培种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷(以下称栽培组)培养24 h;白细胞介素-1β和野生种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷组(D组:分为D1组50μg·mL-1;D2组100μg·mL-1;D3组200μg·mL-1)软骨细胞以10 ng·mL-1重组大鼠白细胞介素-1β和野生种黄管秦艽总裂环烯醚萜苷(以下称野生组)培养24 h。培养后取各组细胞进行免疫细胞化学染色,收集细胞培养液,检测其上清液中表达前列腺素E2的情况。结果四甲基偶氮唑蓝法结果显示,栽培组(50、200、400μg·mL-1)对软骨细胞作用24 h时无毒性作用,野生组(50、100、200μg·mL-1)对软骨细胞作用24 h时无毒性作用。免疫细胞化学染色显示,栽培组和野生组与诱导组相比Ⅱ型胶原阳性表达明显增强,但弱于空白组,并且随着质量浓度的增大Ⅱ型胶原阳性表达逐渐增强,差异有统计学意义(P<0.05)。酶联免疫法结果显示,栽培组和野生组与诱导组相比前列腺素E2含量明显降低,但高于空白组,并且随着质量浓度的增大前列腺素E2含量越低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论栽培种和野生种黄管秦艽中的总裂环烯醚萜苷均对炎症软骨细胞具有一定的保护作用。

大黄不同品种不同产地加工品的蒽醌含量比较

目的:比较大黄不同品种、不同产地加工品蛋吉、苏吉和水根的蒽醌含量。方法:采用RP-HPLC法测定大黄不同种类不同产地加工品中蒽醌的含量。色谱柱:Hypersil ODS-2 C18(4.6 mm×250 mm,5μm);Kromasil ODS保护柱(4.6 mm×10mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸(85∶15);流速:0.8 mL.min-1;检测波长:435 nm;柱温:25℃。结果:大黄不同品种、不同规格的产地加工品,其蒽醌含量存在很大差异。无论是蛋吉、苏吉和水根,以四川药用大黄蒽醌含量为最高,甘肃礼县掌叶大黄次之,再次为青海和四川若尔盖唐古特大黄,甘肃渭源和陇西掌叶大黄为差;对同一品种、不同规格的产地加工品的蒽醌含量,蛋吉≥苏吉>水根。结论:大黄不同品种、不同规格的产地加工品,其蒽醌含量存在很大差异。不同品种大黄其蒽醌含量:药用大黄>掌叶大黄>唐古特大黄;不同规格加工品:蛋吉≥苏吉>水根。主根明显优于支根。

掌叶大黄多糖超滤工艺优选

目的:探讨超滤膜技术分离纯化掌叶大黄多糖的可行性工艺。方法:采用正交设计法优选超滤前离心条件;以超滤压力、料液温度及料液浓度为考察因素,以粗多糖得率和含量为考核指标,均匀设计优选超滤工艺参数。结果:最佳超滤条件为药液以3 000 r.min-1离心处理12 min,用分子截留量10万的膜,超滤压力为0.05～0.09 MPa,药液温度40℃,药材与提取液质量比1∶10～1∶30,pH 6.0,超滤膜先用tween-80(5 g.L-1)处理10 min。结论:优化所得超滤工艺与未超滤相比有较高的多糖得率和含量。超滤技术可用于纯化、富集掌叶大黄多糖,具有产业化开发前景。