应用rRNA基因间隔区碱基测序对中药(大黄)进行鉴定

目的:对大黄种子中提取的DNA中rRNA基因内转录间隔区进行PCR扩增,对于PCR扩增,并对PCR扩增产物进行碱基序列测定,以期从分子水平建立对中草药的鉴定标准。方法:常规提取当归、大黄种子DNA,利用合成的特异性引物对其DNA中rRNA基因内转录间隔区进行套式PCR扩增,将扩增产物以四色荧光标记的双脱氧末端终止循环法进行碱基序列测定。结果:经琼脂糖凝胶电泳证实大黄种子中rRNA基因内转录间隔区PRC基因内转录间隔区的完整碱基序列。RRNA基因内转录间隔区的碱基序列可作为分子水平鉴定植物中药材的又一有效途径。

延经丸对去卵巢骨质疏松模型大鼠E_2、IL-1、IL-6水平和腰椎组织病理学的影响

目的:观察延经丸对去势卵巢骨质疏松模型大鼠血清雌激素(E2)、白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)水平及骨组织形态学的改变,以期阐明该药防治绝经后骨质疏松症的机制。方法:选取6月龄SD雌性大鼠60只,采用双侧卵巢切除法复制绝经后骨质疏松模型。将造模成功大鼠随机分为模型对照组、尼尔雌醇组、延经丸高剂量组、延经丸低剂量组和假手术组4组,每组12只。术后第7天开始灌胃给药,尼尔雌醇组给予尼尔雌醇1μg/g(相当于成人日临床用量2mg/60 kg体质量的10倍)灌胃,使用前配成混悬液(浓度为0.167 g/L),1次/周。延经丸给药高、低剂量依次给予1.8,0.45 mg/g(依次相当于成人日临床用量6,1.5倍),以蒸馏水配成180 g/L和45 g/L,灌胃给药,1 d 1次。用药组灌胃10μL/(g·d)相应药液,假手术组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水,连续给药4周。末次给药结束后,股动脉取血,测定血清E2、IL-1、IL-6含量;取第4腰椎,观察骨组织形态结构变化。结果:①与假手术组对比,模型对照组血清E2水平降低,血清IL-6和IL-1水平升高,差别有统计学意义(P<0.01);骨小梁明显变细、排列稀疏、数目减少、中断、粗细不一,骨髓腔增宽。②治疗4周后,与模型对照组对比,尼尔雌醇组及延经丸高、低剂量组的血清E2水平升高、IL-6水平下降(P<0.05或P<0.01),而IL-1水平虽下降,但差别无统计学意义(P>0.01)。延经丸两剂量组血清E2、IL-6和IL-1水平与尼尔雌醇组对比,差别均无统计学意义(P>0.05)。延经丸两剂量组间3个指标对比,差别亦无统计学意义(P>0.05)。各用药组骨小梁明显增多、排列较整齐、网状结构相对完整,骨量明显增加。结论:延经丸可以有效改善大鼠去卵巢后骨组织损害,升高血清E2水平,降低血清IL-1和IL-6水平,增加骨小梁数目,从而抑制骨吸收,促进骨形成,起到防治骨质疏松症的作用,高剂量治疗效果优于低剂量。