归芪益元膏对重离子辐射损伤模型大鼠肺肾旁效应的影响

目的探讨归芪益元膏防治重离子(12C6+)束辐射肺肾旁效应的作用机制,为临床辐射损伤防护提供新的思路。方法健康雄性Wistar大鼠60只,随机分为正常对照组(NCG组)、单纯辐射组(SRG组)、归芪益元膏组(GOG组),每组20只。灌胃给药7d,12C6+束辐射右侧肺部造模,造模后48h处死,取大鼠左肺、左肾及右肾组织,ELISAlike法检测DNA甲基化率,HE染色观察组织病理学改变,免疫组织化学法检测Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b的表达。结果与正常对照组比较,单纯辐射组大鼠DNA甲基化水平显著降低(P<0.01);左肺有炎症,左右肾无异常;Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b表达明显升高(P<0.01)。与单纯辐射组比较,归芪益元膏组大鼠DNA甲基化水平升高(P<0.01);左肺炎症减轻;Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b表达降低(P<0.01)。Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白均在支气管黏膜上皮细胞、肾小管上皮细胞的胞质内表达,各组均可见;正常对照组呈浅褐色-褐色染色,为弱阳性表达;单纯辐射组呈褐色-棕色染色,为强阳性表达;归芪益元膏组呈浅褐色-棕褐色染色,为中等程度阳性表达。结论归芪益元膏可减轻12C6+束辐射造成的肺肾旁效应,其机制可能与调控DNA甲基化水平有关。

归芪益元膏对^(12)C^(6+)束辐射损伤模型大鼠旁效应的影响

目的探讨^(12)C^(6+)束辐射大鼠的肺-心-肝-脾旁效应损伤及归芪益元膏对其的防治作用及机制。方法选取健康雄性Wistar大鼠90只,随机分为正常对照组(NC组)、单纯辐射组(SR组)、归芪益元膏组(GO组),每组30只。NC组给予2ml生理盐水灌胃,辐射剂量0Gy,SR组给予2ml生理盐水灌胃,辐射剂量8Gy,GO组给予11.83g/kg归芪益元膏灌胃,辐射剂量8Gy,大鼠连续灌胃给药7d,行^(12)C^(6+)束辐射右侧肺部造模。SR组和GO组大鼠造模后48h处死,取心、肝及脾组织。采用比色法测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;ELISA法检测DNA甲基化率;免疫组织化学法检测Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b表达。结果与NC组比较,SR组大鼠SOD、GSH、GSH-Px降低(P<0.01),MDA升高(P<0.01);DNA甲基化水平降低(P<0.01);Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b表达升高(P<0.01)。与SR组比较,GO组大鼠SOD、GSH、GSH-Px升高(P<0.01),MDA下降(P<0.01);DNA甲基化水平升高(P<0.01);Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b表达降低(P<0.01)。三组Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白均有表达,且分布在心肌细胞、肝细胞、脾脏白髓外周B细胞胞质内。NC组颜色为浅褐色-褐色,呈弱阳性表达;SR组颜色为褐色-棕色,呈强阳性表达;GO组颜色为浅褐色-棕褐色,呈中等度阳性表达。结论归芪益元膏能减轻^(12)C^(6+)束辐射造成的旁效应,其机制与改善氧化应激反应及DNA甲基化水平有关。

黄芪多糖的药理作用研究

黄芪多糖作为中药黄芪的主要活性成分,关于其药理作用的研究多涉及循环系统、神经系统、消化系统、免疫系统、内分泌系统、造血系统,对近年来黄芪多糖在抗动脉粥样硬化,保护视网膜,改善记忆力、认知功能、抗衰老、抗骨质疏松及防治帕金森病等方面的药理作用进行归纳,为今后研究提供参考。

病证结合大鼠辐射损伤模型构建初探

目的:建立一种稳定的、可操作性强的病证结合大鼠辐射损伤模型,以满足研究药物对辐射损伤防治评价的需求。方法:采用碳离子(^(12)C^(6+))束照射大鼠右侧肺部构建辐射损伤动物模型,同时设立正常对照组、单纯辐射组、辐射+黄芪汤组,从病因、症状、客观指标、药物反证等方面对辐射损伤大鼠模型进行综合判断,验证该模型的中医证候属性。结果:单纯辐射组大鼠的症状体征(摄食量、饮水量、心率、肛温、排尿量、体质量)、血象(WBC与RBC)、脾脏、胸腺指数等指标与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。辐射+黄芪汤组可明显改善大鼠的主观症状和上述客观指标,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:^(12)C^(6+)束照射大鼠辐射损伤模型的中医证候属性是气阴两虚证。

基于转录组学的归芪益元膏对^(12)C^(6+)束辐射损伤大鼠肺肾旁效应的作用机制

目的:探讨归芪益元膏对^(12)C^(6+)束辐射损伤大鼠旁效应的防护机制。方法:采用^(12)C^(6+)束照射大鼠右侧肺部构建辐射损伤动物模型,分层随机分为单纯辐射组、归芪益元膏组,同时设立正常对照组,取大鼠的左肺、左肾组织以提取总RNA,IlluminaHiSeq平台测序,检测各组大鼠所有基因转录本的差异表达,筛选出与旁效应保护相关的基因及代谢途径。结果:给予归芪益元膏能改善^(12)C^(6+)束辐射损伤大鼠旁效应,转录数据分析显示其作用机制主要涉及肿瘤坏死因子、细胞外基质、细胞-细胞黏附连接、钙离子、白细胞介素-1、4、8等蛋白基因表达上调/下调。结论:归芪益元膏对^(12)C^(6+)束辐射损伤大鼠旁效应具有一定的防护作用,其机制可能与抑制电离辐射响应及癌症信号转导通路有关。

基于全基因组甲基化探讨辐射损伤大鼠的旁效应机制

目的:从全基因组甲基化的角度探讨辐射损伤大鼠的旁效应发生机制。方法:采用12C6+束照射大鼠右侧肺部构建辐射损伤动物模型,同时设立正常组,取心、肝、脾、左肺、左肾组织以提取DNA。采用MethylRAD技术进行全基因组甲基化检测。结果:与正常组比较,模型组大鼠心、肝、脾、左肺、左肾组织中的甲基化位点(CCGG/CCWGG位点数,CCGG/CCWGG平均深度)显著降低(P<0.01),甲基化位点测序深度显著降低(P<0.01)。两组大鼠基因组不同功能元件上的甲基化位点水平高低不同,差异有统计学意义(P<0.01)。从染色体图谱来看,两组大鼠差异甲基化位点在染色体上的分布是不均匀的。结论:全基因组甲基化差异可能是辐射损伤大鼠旁效应的发生机制之一。