蒲公英赛醇通过调节AMPK通路保护胃黏膜细胞的作用和机制

目的通过体外实验研究,探讨AMPK信号通路在蒲公英赛醇保护乙醇损伤的胃黏膜细胞的作用。方法以乙醇刺激胃黏膜细胞为模型,蒲公英赛醇进行干预。采用CCK-8法检测乙醇刺激胃黏膜细胞状态下蒲公英赛醇对胃黏膜细胞存活率的影响,生化法检测各组胃黏膜细胞GSH-Px、SOD和MDA含量变化。流式细胞术检测各组胃黏膜细胞周期变化。Western blotting检测各组胃黏膜细胞AMPK、CaMKK和LKB1蛋白表达水平。结果蒲公英赛醇可浓度依赖性地改善乙醇刺激胃黏膜细胞的活性,胃黏膜细胞被乙醇损伤后的SOD和GSH-Px活性显著下降,MDA含量的明显升高;细胞增殖明显降低(P<0.05),G 1期细胞下降,S期和G 2期细胞上升;同时下调胃黏膜损伤细胞AMPK、CaMKK、LKB1蛋白表达水平。而蒲公英赛醇治疗后胃黏膜细胞内SOD、GSH-Px活性明显升高(P<0.01),MDA含量显著下降(P<0.01);细胞增殖明显增强(P<0.05),G 1期细胞上升,S期和G 2细胞下降(P<0.05)。并浓度依赖性地上调乙醇刺激下胃黏膜细胞中AMPK、CaMKK、LKB1蛋白表达水平。结论蒲公英赛醇可有效活化AMPK通路,从而保护受损的胃黏膜细胞。

NASH患者外周血乏氧诱导因子1a-反义RNA 1和自噬基因Beclin1变化及其临床意义

目的研究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者外周血单个核细胞(PBMC)乏氧诱导因子1a-反义RNA 1(HIF1a-AS1)和血清自噬基因beclin1水平变化及其临床意义。方法2019年1月~2021年4月我院诊治的NASH患者118例(早期纤维化、进展期纤维化和肝硬化分别为43例、46例和29例)和同期健康体检者118例,使用全自动生化分析仪检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,采用实时荧光定量PCR法检测PBMC HIF1a-AS1水平,采用ELISA法检测血清beclin1水平。结果NASH患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(5.9±1.6)mmol/L、(6.2±0.5)mmol/L、(2.4±0.6)mmol/L、(3.7±0.9)mmol/L、(1.9±0.2)和(5.7±1.9)ng/mL,显著高于健康者【分别为(4.8±0.7)mmol/L、(5.3±0.3)mmol/L、(1.3±0.3)mmol/L、(2.3±0.6)mmol/L、(1.0±0.1)和(4.1±1.5)ng/mL,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.2±0.2)mmol/L,显著低于健康者【(1.4±0.3)mmol/L,P<0.05】;肝硬化患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(6.8±2.0)mmol/L、(6.8±0.8)mmol/L、(2.8±0.7)mmol/L、(4.4±1.2)mmol/L、(2.5±0.3)和(6.4±2.1)ng/mL,显著高于早期纤维化患者【分别为(5.2±1.1)mmol/L、(5.7±0.4)mmol/L、(1.9±0.5)mmol/L、(3.1±1.0)mmol/L、(1.4±0.1)和(5.1±1.3)ng/mL,P<0.05】;49例有高血压、糖尿病或/和高脂血症合并症的NASH患者FBG、血清TC、TG、LDL-C、PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平分别为(6.5±1.9)mmol/L、(6.9±0.8)mmol/L、(2.7±0.8)mmol/L、(4.0±1.1)mmol/L、(2.2±0.3)和(6.3±2.0)ng/mL,显著高于69例无合并症者【分别为(5.5±1.3)mmol/L、(5.7±0.4)mmol/L、(2.2±0.5)mmol/L、(3.5±0.7)mmol/L、(1.7±0.2)和(5.3±1.6)ng/mL,P<0.05】,而血清HDL-C水平为(1.1±0.2)mmol/L,显著低于无合并症者【(1.3±0.4)mmol/L,P<0.05】。结论NASH患者PBMC HIF1a-AS1和血清beclin1水平异常升高,监测其水平可能有助于病情评估。