用激光微束穿刺法将双抗虫基因导入红掌的研究

红掌(Anthurium andraeanum Lind.)是世界名贵花卉,其花独特,佛焰苞艳丽,瓶插寿命长,作为切花栽培有很高的经济价值。慈菇蛋白酶抑制剂是来源于慈菇储藏器官(根茎)的一种天然抗虫物质,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂类,能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和激肽释放酶,对某些鳞翅目、双翅目以及鞘翅目等昆虫有毒杀作用。通过激光微束穿刺法将构建的含抗虫基因API-A、API-B和选择性标记基因NPT-Ⅱ的质粒pBUBA导入红掌细胞中,通过卡那霉素抗性筛选和聚合酶链式反应(PCR)技术分析表明,抗卡那霉素的绿苗中大部分为阳性植株。

白藜芦醇诱导人T淋巴瘤Jurkat细胞凋亡的研究

用荧光染色、透射电镜、Wright-Giemsa染色方法检测人T淋巴瘤Jurkat细胞在白藜芦醇(resveratrol,Res)诱导凋亡时的形态学变化情况,并用流式细胞仪对其进行定量分析,West blot检测部分凋亡信号分子分泌的变化情况.发现白藜芦醇能明显诱导该细胞凋亡,显现出典型的凋亡现象,且凋亡有明显的药物依赖性.流式细胞仪检测发现,各药物处理组(0.125,0.25,0.5,1.0,2.0μL/mL)的凋亡率(3.01%,8.93%,17.97%,22.45%,32.88%)和对照组的凋亡百分率(0.91%)比较有显著性差异.West Blot检测则发现,Res降低了bcl-xl,bax的表达,以至不能进一步产生bcl-2/bax和bcl-2/bcl-xL二聚体来抑制细胞凋亡,即减除了这些凋亡抑制因子对细胞凋亡的抑制,从而使细胞顺利进入caspase介导的凋亡途径.

甘蓝型油菜PEP基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建及转基因油菜的获得

丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制PEP基因的表达,可提高种子的含油量。本研究利用PCR法从甘蓝型油菜花油5号(H045)克隆了PEP基因片段,并与载体pBI121-B构建了反义PEP基因的种子特异性植物表达载体,通过激光微束穿刺法将其转化到甘蓝型油菜中,目前已获得了转基因植株。

红掌的离体培养和快速繁殖(简报)

建立了组织培养法繁殖红掌的技术,其流程为:切取带有叶柄的嫩叶,诱导丛生芽,丛生芽生根培养为成年植株。主要培养条件:诱导愈伤组织培养基1/2 MS+6-BA 1 mg/l+NAA 0.1 mg/l;诱导芽培养基1/2MS+KT 1 mg/l+NAA 0.05 mg/l;生根培养基1/2 MS+NAA 1.0 mg/l。利用此种方法,增殖的数量较多,且小苗生长健壮。