胃管灌注泛影葡胺和医用石蜡油治疗粘连性小肠梗阻对比研究

目的比较泛影葡胺、医用石蜡油及单纯输液等非手术方法对急性粘连性小肠梗阻的治疗作用。方法将123例急性粘连性小肠梗阻患者分成3组：单纯输液组（对照组）44例,行单纯液体保守治疗;医用石蜡油组34例,除对照组治疗外并经胃管注入10%医用石蜡油溶液100 mL;泛影葡胺组45例,除对照组治疗外经胃管注入76%泛影葡胺溶液100 mL。观察各组肠梗阻缓解时间及住院时间。结果泛影葡胺组平均住院时间、首次排便时间较石蜡油组与单纯输液组均明显缩短（P〈0.05~0.01）。结论胃管灌注泛影葡胺治疗急性粘连性小肠梗阻与常规非手术疗法有同样的效果,且具有明显缩短小肠梗阻缓解时间及住院时间的优点。

VEGFR-3 siRNA腺病毒表达载体对结肠癌细胞凋亡和侵袭的影响

目的探讨靶向血管内皮细胞生长因子受体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)腺病毒载体对人结肠癌Lo Vo细胞系凋亡及侵袭的影响。方法将靶向VEGFR-3 siRNA腺病毒转染结肠癌Lo Vo细胞,以Western blotting检测VEGFR-3蛋白的表达,Hoechst 33342染色法和流式细胞仪检测Lo Vo细胞的凋亡情况,用Transwell小室测定Lo Vo细胞的侵袭力。结果实验组与空白对照组和阴性对照组比较,实验组中转染靶向VEGFR-3 siRNA腺病毒后结肠癌Lo Vo细胞中VEGFR-3蛋白的表达被下调(P<0.05)。Hoechst 33342染色法和流式细胞仪检测Lo Vo细胞凋亡率明显升高(P<0.05),Transwell小室测定Lo Vo细胞侵袭能力下降(P<0.05)。结论靶向VEGFR-3 siRNA腺病毒能下调结肠癌LoVo细胞中VEGFR-3蛋白的表达,从而诱导结肠癌Lo Vo细胞的凋亡,抑制其侵袭能力,因此,VEGFR-3可以作为结肠癌靶向治疗的一个潜在靶点。

VEGFR-3小干扰RNA对结肠癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:研究血管内皮生长因子受体3(vascularendothelial growth factor receptor 3,VEGFR-3)小干扰RNA对结肠癌细胞移植瘤模型生长的影响.方法:构建VEGFR-3小干扰RNA表达载体.将结肠癌LoVo细胞注射入裸鼠皮下建造裸鼠移植瘤模型.将15只裸鼠结肠癌模型随机分成3组:实验组(pG-siRNA/VEGFR-3重组质粒)、阴性对照组(pG-HK重组质粒)与空白对照组.分别瘤体内注射相应的siRNA混合物或转染剂混合液,每3 d注射1次,共注射3次,观察肿瘤体积的变化;6 wk后处死裸鼠,肿瘤称取质量,并进行qRT-PCR和Western blot测定VEGFR-3 mRNA和蛋白的变化,通过免疫组织化学进行微淋巴管计数.结果:实验组移植瘤体积和质量明显小于阴性对照组和空白对照组,有显著的统计学意义(P<0.001).实验组抑制率为52.75%,与对照组相比,差异有显著(P<0.001).qRT-PCR和Western blot测定VEGFR-3 mRNA和蛋白的变化比较,实验组有明显降低(P<0.001).实验组淋巴管计数较对照组差异显著(P<0.05).结论:VEGFR-3 siRNA可以抑制裸鼠结肠癌细胞移植瘤的生长,并减少裸鼠移植瘤淋巴管生成,能有效抑制结肠癌细胞的生长.

VEGFR-3 siRNA腺病毒载体对结肠癌细胞生长和运动能力的影响

目的:探讨血管内皮生长因子受体3(vascularendothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)siRNA腺病毒载体对结肠癌细胞增殖、迁移、黏附和侵袭能力的影响.方法:将VEGFR-3 siRNA腺病毒转染结肠癌LoVo细胞,以qRT-PCR和Western blot分别检测VEGFR-3 mRNA和蛋白的表达,通过MTT比色法、划痕实验、Transwell实验、黏附实验检测LoVo细胞的增殖、迁移、侵袭和黏附能力.结果:与空白对照组和阴性对照组相比,实验组VEGFR-3 mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P<0.05).与空白对照组和阴性对照组相比,实验组细胞增殖明显抑制(P<0.05),迁移能力减弱(P<0.05),实验组的穿膜细胞数明显减少(P<0.05),黏附能力减弱(P<0.001).结论:腺病毒介导的VEGFR-3 siRNA可以通过下调结肠癌细胞VEGFR-3的表达从而抑制结肠癌细胞的增殖、黏附、侵袭和迁移能力.

靶向血管内皮细胞因子受体3小干扰RNA腺病毒表达载体的构建

目的构建靶向血管内皮细胞因子受体3(VEGFR-3)的小干扰RNA重组腺病毒表达载体。方法将构建的靶向VEGFR-3特异性小干扰RNA真核表达载体pGenesil-siRNA的启动子及siRNA序列克隆入穿梭质粒pAdTrack,将质粒线性化处理后转化入pAdEasy。重组腺病毒载体线性化处理后转染HEK293细胞,包装重组腺病毒,并进行PCR鉴定、病毒滴度测定;扩增后感染结肠癌LoVo细胞并进行Western blotting检测VEGFR-3蛋白的表达。结果双酶切鉴定及测序证实pAdTrack-pG-siRNA及pAd-VEGFR3-siRNA质粒构建正确,扩增纯化测定重组病毒pAd-VEGFR3-siRNA的滴度为5.6×109pfu/mL。病毒感染结肠癌LoVo细胞后测定VEGFR-3蛋白表达明显降低。结论靶向VEGFR-3小干扰RNA的腺病毒载体构建成功。

组织因子基因siRNA对胃癌侵袭力的影响

目的探讨应用RNA干扰技术抑制胃癌细胞组织因子(TF)基因表达对胃癌侵袭能力的影响。方法构建pSUPER/TF-siRNA重组载体,并将其转染入胃癌细胞SGC-7901中;RT-PCR和Western blot检测转染前后TF的表达水平;应用Boyden小室检测对胃癌细胞的侵袭能力。结果双酶切鉴定重组载体构建成功。RT-PCR和Western blot检测显示pSUPER/TF-siRNA1重组载体明显抑制SGC-7901细胞TF基因的表达(P<0.05)。Boyden小室体外侵袭实验证实,转染pSUPER/TF-siRNA1质粒的SGC-7901穿膜细胞均数较其他无干扰组的细胞均数明显减少(P<0.05)。结论以TF基因作为靶点应用RNA干扰技术抑制其表达可降低胃癌细胞体外侵袭移能力,故其有望成为胃癌治疗的一个新靶点。

三种抗血管生成药物治疗晚期结直肠癌研究进展

血管生成在结直肠癌的发生、发展中发挥重要作用。靶向血管内皮生成因子信号通路的药物治疗晚期结直肠癌获得了重要的生存改善。在化疗基础上联合贝伐珠单抗一线、二线和跨线治疗晚期结直肠癌可进一步延长生存期。阿柏西普联合含伊立替康的化疗方案治疗晚期结直肠癌延长了生存期。对抵抗所有化疗药物的晚期结直肠癌患者使用瑞格非尼后仍延长了生存期。这些抗血管生成药物为晚期结直肠癌患者带来了生存获益，并拥有良好的安全性，可以和化疗药物联合用于晚期结直肠癌患者的的治疗。