扁蒴藤素对急性实验性炎症的作用及其机制研究

目的 研究扁蒴藤素对急性实验性炎症的作用及其机制。方法 用巴豆油致小鼠耳肿,角叉菜胶致小鼠足肿,醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高,角叉菜胶致大鼠腹膜炎模型,观察扁蒴藤素对小鼠耳肿、足肿、毛细血管通透性增高以及对大鼠腹膜炎渗出液中的白细胞计数、蛋白质含量、一氧化氮(NO)含量、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)释放、丙二醛(MDA)生成、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果 扁蒴藤素ip 0.156～0.625 mg·kg^(-1)或im 1～4 mg·kg^(-1)明显抑制小鼠耳肿和足肿(P<0.05);im 2～4 mg·kg^(-1)明显抑制小鼠毛细血管通透性增高(P<0.05);im 1～2 mg·kg^(-1)抑制大鼠腹膜炎白细胞渗出、蛋白质渗出及NAG释放,降低NO含量,抑制MDA生成,增强SOD及CAT活性。结论 扁蒴藤素有明显的抗炎作用;抗炎作用可能与其抑制NO生成、清除氧自由基、抗脂质过氧化、稳定溶酶体膜有关。

ELISA法研究新型重组人肿瘤坏死因子在小鼠体内的药代动力学

目的研究新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNFα)在小鼠体内的药代动力学。方法给小鼠分别im和ivnrhTNFα后,按不同时间点采血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中nrhTNFα的浓度,用DAS药动学软件进行曲线拟合并计算参数。结果nrhTNFα5.51μg·kg-1、24.60μg·kg-1小鼠im后药动学特征符合一室开放模型,呈一级动力学消除。nrhTNFαim给药能迅速吸收入血,Tmax分别为0.17h和0.33h。T1/2分别为1.25h和0.73h,AUC随剂量增加而成比例增加。nrhTNFα5.51μg·kg-1小鼠iv后符合二室开放模型,呈一级动力学消除,T1/2β为0.37h,AUC为771.24ng·L-1·h-1。结论nrhTNFαim和iv的药动学行为在小鼠体内分别符合一室和二室开放模型,均呈一级动力学消除。im给药的生物利用度为48.84%,可考虑作为替代iv的一种安全给药途径。

三种荧光分光光度法测定肿瘤组织中阿霉素含量的研究

目的 :通过比较测定肿瘤组织中阿霉素(ADR)含量的 3种荧光分光光度法 ,建立简便、快捷的测定肿瘤组织中阿霉素含量的荧光分光光法。方法 :分别采用正丁醇法、硝酸银法、酸性异丙醇法测定水溶液及肿瘤组织匀浆中ADR的含量 ,比较荧光光谱曲线、回收率和灵敏度。结果 :硝酸银法测定瘤组织匀浆中的ADR含量 ,背景荧光值低 ,线性范围0 .2～ 0 .8mg·L-1,最低检出量 0 .15mg·L-1,回收率超过 97%以上。酸性异丙醇法与正丁醇法测定瘤组织中的ADR含量 ,背景荧光值高 ,回收率分别 <4 0 %和 5 0 %。结论 :硝酸银法适合肿瘤组织中的ADR的含量测定 ,该方法准确、灵敏、可靠。

葡萄籽中原花青素对实验动物主动脉收缩和血小板聚集的影响

目的:研究葡萄籽中原花青素(PA)对大鼠离体主动脉平滑肌收缩活动和兔血小板聚集的影响。方法:采用大鼠离体主动脉环灌流方法,记录主动脉环张力变化,观察PA对去甲肾上腺素(NA)和KCl预收缩大鼠离体主动脉平滑肌收缩反应的舒张作用以及对NA量效曲线的影响。比浊法测定兔血小板聚集。结果:PA能明显抑制NA(10-6mol/L)预收缩大鼠离体主动脉环的反应,使NA量效曲线压低,最大反应降低,此作用无内皮依赖性,但对KCl预收缩主动脉环的舒张作用无明显影响,也不影响花生四烯酸(AA),ADP和胶原(collagen)蛋白诱导的兔血小板聚集。结论:PA能对抗NA而不影响KCl诱导的大鼠离体主动脉平滑肌的收缩,不影响兔血小板聚集。

应用腘窝淋巴结实验评价干扰素的免疫毒性

目的用小鼠腘窝淋巴结实验(Popliteallymphnodassay,PLNA)以及检测淋巴细胞表面分子来预测干扰素的免疫毒性,探讨该方法的预测价值。方法采用小鼠腘窝淋巴结实验方法测定腘窝淋巴结重量及细胞指数,淋巴细胞亚群测定采用流式细胞技术法。结果干扰素可引起小鼠腘窝淋巴结肿大,并造成腘窝淋巴结CD4+/CD8+T细胞比例改变。结论本实验中干扰素的测试结果呈阳性,提示用腘窝淋巴结实验对干扰素(Interferon,IFN)的免疫毒性进行初步评估。

维生素E琥珀酸酯诱导耐药白血病K562/ADM细胞凋亡的研究

目的:研究维生素E 琥珀酸酯(vitamin E succinate , VES)对多药耐药白血病K562/ADM细胞的诱导凋亡作用及分子机制。方法: 以体外培养的K562/ADM细胞为研究对象,采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT) 比色法检测细胞增殖活性, Wright Giemsa染色、DNA凝胶电泳和流式细胞术(flowcytometry, FCM)检测细胞凋亡;FCM测定细胞Fas、Bcl-2 和p53 蛋白表达水平。结果:VES可显著抑制K562/ADM细胞的生长及增殖,P= 0 .004。光镜下可见K562/ADM细胞呈典型凋亡的形态学改变。DNA凝胶电泳显示典型的凋亡DNA梯形条带。FCM细胞周期分析显示,G1 期阻滞,亚G1 期细胞比例增高,P=0 .005;Fas蛋白表达明显上调,P=0. 002;Bcl -2蛋白表达下调,P=0. 000;p53蛋白表达无明显变化。结论:VES可诱导K562/ADM细胞凋亡,作用机制可能与其上调Fas表达和下调Bcl 2表达有关。

种植肿瘤细胞数对小鼠皮下移植瘤生长及抗癌药疗效的影响

目的 :研究种植肿瘤细胞数对小鼠皮下移植瘤生长及抗癌药疗效的影响。方法 :小鼠右前腋窝皮下种植不同数目的小鼠肉瘤S180 细胞、小鼠肝癌H2 2 细胞和小鼠Lewis肺癌细胞 ,观察肿瘤的生长情况 ,并观察常用抗癌药阿霉素、卡铂、环磷酰胺和 5 氟尿嘧啶在种植不同肿瘤细胞数时作用强度。结果 :种植肿瘤细胞数越多 ,肿瘤生长越快 ,出瘤时间越早 ,抗癌药抑瘤率越低。结论 :种植肿瘤细胞数直接影响小鼠皮下移植瘤的生长速度 ,也影响对抗癌药疗效的评价。抗癌药抑瘤率受种植肿瘤细胞数的影响 ,在进行抗癌药活性评价时 ,应加注意。

苦参碱和阿苯达唑治疗小鼠继发性泡球蚴病的疗效观察

目的探讨中药苦参碱与阿苯达唑联用对小鼠继发性泡球蚴病的治疗效果。方法将感染泡球蚴小鼠随机分为四组,即:苦参碱组、阿苯达唑组、联合用药组和阴性对照组,另设空白组。小鼠泡球蚴病用药物治疗60天后,检测各小鼠泡球蚴湿重、胸腺指数、脾脏指数和抑囊率,并进行病理组织学和超微结构观察。结果苦参碱单独及与阿苯达唑联合用药均对小鼠泡球蚴有明显抑制作用(抑囊率分别为77.61%和89.88%),各治疗组泡球蚴的平均湿重与对照组比较有显著性差异(P<0.01);接种泡球蚴的各组与空白组比较,胸腺普遍缩小而肝、脾增大(P<0.05)。结论苦参碱对小鼠泡球蚴的生长有明显的抑制作用,尤其联合阿苯达唑治疗效果更好,说明两种药物具有协同治疗作用。

显微数码互动系统在创新型人才培养中的应用

创新型人才是当前我国高等教育发展的人才培养新目标，实现这一目标除了依托高素质的教师队伍，还必须强化教学设备的更新换代。文章从显微数码互动系统在形态教学中所显示的独特优势出发，阐述了该系统不仅通过师生互动、图像共享的新模式激发了学生的学习兴趣，而且可明显提高教学质量，有效促进本科生形象思维和创新能力的培养。

人工合成胸腺素α1静脉注射后在小鼠和大鼠体内的分布与代谢

目的研究人工合成胸腺素α1(synthetic thymosin alpha 1,sTα1)在小鼠和大鼠体内静脉注射的分布和排泄特点。方法用竞争ELISA法测定sTα1在小鼠体内静脉注射后不同时间点组织中的药物浓度和不同时间段内尿液药物累计量;同法检测sTα1在大鼠体内静脉注射后不同时间段内胆汁药物累计量。结果分布特点:小鼠sTα1静脉注射后15 min时胸腺中药物分布最高,浓度为(1 533.4±712.4)ng/g,肝、脾、胸腺次之,在脑中含量较低;静脉注射后30 min时胸腺组织中药物分布依然最高,浓度为(25 583.4±6 244.7)ng/g,脾、肾、肝中次之。sTα1静脉注射后1 h时肾脏中药物分布最高,浓度为(6 164.1±4 821.8)ng/g,胸腺浓度为(5 665.8±3 881.9)ng/g。静脉注射后2 h时肾脏分布最高,浓度为(1 408.0±1 252.7)ng/g,而胸腺中浓度仅为(306.4±268.6)ng/g,其他组织中有少量分布,脑组织中的药物浓度接近血浆药物浓度,说明sTα1可通过血脑屏障。排泄特点:小鼠静脉注射sTα1 1 mg/kg后,12 h尿累计排泄量为给药量的26.35%,大鼠静脉注射0.5 mg/kg sTα1后,胆汁中未见有药物排出。结论小鼠静脉注射sTα1后可以浓集于免疫器官胸腺和脾脏内,且可进入血脑屏障,以原型经肾排泄为主要排泄途径。

苦参碱和阿苯达唑联合治疗小鼠泡球蚴病的机制探讨

目的探讨泡球蚴病小鼠经苦参碱(matrine,Mat)阿苯达唑(albendazole,ABZ)及两药联用治疗后机体的免疫应答状态和小鼠肝酶代谢的变化。方法泡球蚴病小鼠(AE小鼠)经Mat、ABZ及其联合用药治疗60d后,检测小鼠血清中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝组织匀浆中NO、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、乳酸(LD)、乳酸脱氢酶(LDH)、钠钾ATP酶和钙镁ATP酶的含量及活性。结果药物治疗组血清中IL-4、IL-6和TNF-α的含量较感染对照组降低(P<0.05),IL-2的含量高于感染对照组(P<0.05),其中联合用药组IL-4和TNF-α下降较感染对照组明显(P<0.05);各用药组肝组织LDH、NO、NOS和iNOS均较感染对照组明显下降(P<0.05),iNOS在Mat组及联合用药组下降幅度明显大于ABZ组(P<0.05),LD仅在联合用药组下降(P<0.05);各用药组钠钾ATP酶和钙镁ATP酶较之对照组升高(P<0.05),且Mat组及联合用药组钙镁ATP酶与ABZ组差异有统计学意义(P<0.05)。结论AE小鼠经治疗后,Th1型细胞因子分泌增加,Th2型细胞因子分泌减少,说明Mat能提高小鼠机体的免疫力,并能显著改善小鼠肝功能,这可能与Mat作用钙离子通道和逆转耐药性有关。

镍对大鼠肝细胞内离子和线粒体含量的影响

目的 探讨镍对大鼠肝细胞内〔Ca2 + 〕、〔Mg2 + 〕、〔Ni2 + 〕、〔Na+ 〕、〔H+ 〕和线粒体含量的影响。方法 健康Wistar大鼠腹腔注射硫酸镍 1 2 5 ,2 5 ,5mg/kg染毒 ,1次 /d ,连续 2 1d。染毒结束次日激光扫描共聚焦显微术测定肝细胞内离子浓度和线粒体含量。结果 染毒组动物肝细胞内〔Ca2 + 〕、〔Ni2 + 〕、〔Na+ 〕、〔H+ 〕均增加 ,〔Mg2 + 〕和线粒体含量下降。结论 NiSO4染毒可造成肝细胞内离子浓度和线粒体含量的改变。

新型重组人肿瘤坏死因子-α对四氯化碳及刀豆蛋白A诱导小鼠肝损伤的影响

目的 :研究不同剂量的新型重组人肿瘤坏死因子 (nrhTNFα)对肝功能及肝脏组织形态学的影响。方法 :用四氯化碳 (CCl4)或刀豆蛋白A(ConA)诱导小鼠肝损伤 ,nrhTNFα低、中、高剂量 (5× 10 4,5×10 5,5× 10 6IU·kg-1)im ,测血清中ALT、AST、LDH、IFN α、IL 2和NO浓度变化 ,检查肝脏组织形态学变化。结果 :3个剂量的nrhTNFαim对正常小鼠肝功能及肝脏组织形态学无影响 ;低、中剂量nrhTNFα对CCl4诱导肝损伤小鼠的肝功能及肝脏组织形态学无影响 ,高剂量nrhTNFα加重肝损伤 ;3个剂量的nrhTNFα降低ConA诱导的肝损伤小鼠血清ALT、AST、LDH和IFN γ浓度增加 ,且nrhTNFα低剂量作用明显 ,能明显减轻肝脏病理学改变。结论 :nrhTNFα低、中、高剂量im对正常小鼠无肝毒性 ;nrhTNFα低、中剂量im不影响CCl4诱导的肝损伤 ,高剂量则加重之 ;3个剂量的nrhTNFαim抑制ConA诱导的肝损伤 ,其作用机理与抑制ConA诱导的小鼠IFN γ产生有关。

静脉注射和肌肉注射不同剂量rhIFNα2a对小鼠体温的影响

目的 :研究静脉注射和肌肉注射不同剂量rhIFNα2a对小鼠体温的影响。方法 :测量给药前后不同时间点的小鼠体温和血清rhIFNα2a的浓度。结果 :相同剂量的rhIFNα2a静脉注射与肌肉注射比较 ,引起小鼠体温升高的作用更强 ,而且rhIFNα2a引起的发热可被吲哚美辛阻断。结论 :rhIFNα2a肌肉注射较静脉注射引起不良反应轻 ,对于rhIFNα2a引起发热敏感的机体可联合用非甾体类抗炎药。

人工合成胸腺素α1静脉注射或皮下注射在小鼠和大鼠体内的药动学研究

目的:研究人工合成胸腺素α1(sTα1)静脉注射或皮下注射在小鼠和大鼠体内的药动学特征。方法:取小鼠45只(sTα1,1mg·kg-1)、大鼠3只(sTα1,0.5mg·kg-1),尾静脉注射相应药物,分别于注射前及注射后6h内小鼠眼眶静脉采血和大鼠心脏采血;另取小鼠180只,随机分为高、中、低(sTα1,5、1、0.32mg·kg-1)剂量组,取大鼠9只,随机分为高、中、低(sTα1,2.5、0.5、0.16mg·kg-1)剂量组,皮下注射相应药物,分别于注射前及注射后10h内小鼠眼眶静脉采血和大鼠心脏采血,用酶联免疫吸附法检测各时间点的血药浓度,并计算其药动学参数。结果:sTα1静脉注射在小鼠体内的t1/2β为0.68h、AUC0～∞为554.32μg·h·L-1,在大鼠体内的t1/2β为(1.87±0.50)h、AUC0～∞为(1602.91±360.41)μg·h·L-1;sTα1高、中、低剂量组皮下注射在小鼠体内的t1/2分别为0.76、0.54、0.268h,AUC0～∞分别为3222.95、417.67、366.60μg·h·L-1,在大鼠体内的t1/2分别为(1.23±0.23)、(1.40±0.37)、(1.99±0.94)h,AUC0～∞分别为(22436.74±5641.94)、(1539.63±203.30)、(729.60±320.0)μg·h·L-1。结论:sTα1在大鼠和小鼠体内静脉注射的药动学过程属于一级二室开放模型,皮下注射的药动学过程属于一级一室开放模型。

高效液相色谱法测定贞芪扶正制剂中8种生物活性化合物的含量

目的：建立测定贞芪扶正制剂中8种生物活性化合物的高效液相色谱法。方法：应用Hypersil ODS柱,柱温30℃。色谱系统Ⅰ：以甲醇和水为流动相,流速1.0 mL·min^-1,梯度洗脱,用二极管阵列检测器检测,波长为254,275,328 nm。色谱系统Ⅱ：以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺（90∶10∶0.03∶0.06）为流动相,流速0.6 mL·min^-1,用蒸发光散射检测器检测,漂移管温度75℃,载气流速2.0 L·min^-1。结果：8种成分的峰面积与浓度的线性关系良好（r〉0.999）,加样回收率为95.4%-103.2%。结论：本研究为贞芪扶正制剂的多组分定量测定和质量控制提供了一种简单、可靠的方法。同时在传统工艺生产的制剂中检测不到的有效成分齐墩果酸和熊果酸,经生产工艺改进后可以检测到。此改进为该制剂生产工艺的研究提供了理论基础。