亚临床甲状腺功能减退大鼠骨代谢改变及左旋甲状腺素疗效

目的探讨亚临床甲状腺功能减退(SCH)模型大鼠骨代谢改变及应用左旋甲状腺素(L-T4)治疗后的疗效。方法健康Wistar雄性大鼠60只,随机分为3组:亚临床甲减组(SCH组)、L-T4替代治疗组(SCH+T4组)、对照组(C组),每组20只。测定不同组别大鼠血清血脂、骨碱性磷酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP-5b)和骨密度(BMD)。比较不同组别大鼠甲状腺功能、骨代谢指标、骨密度及血脂相关指标的改变。结果 SCH组大鼠TRACP-5b(F=301.214,P<0.05)、BALP(F=16.432,P<0.05)、BMD(F=8.112,P<0.05)明显低于对照组。胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于对照组(P<0.05)。L-T4组大鼠促甲状腺激素(TSH)恢复至正常范围,TRACP-5b、BALP有所升高(P<0.01),TC、LDL-C有不同程度下降(均P<0.05)。相关分析显示,TSH水平与TC(R=0.425,P<0.05)、LDL-C(R=0.228,P<0.05)呈正相关,与BALP(R=-0.297,P<0.05)和TRACP-5b(R=-0.265,P<0.05)呈负相关。结论 SCH是骨质疏松的重要危险因素,可能通过升高TSH抑制骨细胞活性而降低骨密度,L-T4可部分改善实验大鼠骨代谢异常。

2型糖尿病骨钙素、25羟维生素D水平与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者外周血骨钙素(BGP)、25羟维生素D[25-(OH)-D]水平与颈动脉内膜中层厚度(IMT)的相关性。方法选取甘肃省人民医院内分泌科T2DM患者66例,健康对照组40例,采用电化学发光法测定血清BGP和25-(OH)-D水平,彩色多普勒超声诊断仪测定IMT。应用独立样本t检验、Pearson相关分析、多元线性回归分析及Logistic回归分析等统计学方法对数据进行分析。结果 T2DM组BGP水平较对照组显著降低(P<0.05);25-(OH)-D水平较对照组降低,但差异无统计学意义(P>0.05),IMT较对照组显著增高(P<0.05)。Pearson相关分析表明:IMT与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)呈正相关(r=0.410,P<0.05)、与BGP呈负相关(r=-0.274,P<0.05)。BGP水平与空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(Hb A1c)和甘油三酯(TG)呈负相关(r=-0.335、-0.256、-0.204均P<0.05)。多元线性逐步回归分析显示:BGP、年龄、FBG是IMT的独立影响因素。Logistic回归分析显示BGP水平降低是颈动脉斑块形成的危险因素。结论 BGP水平降低是2型糖尿病动脉粥样硬化的危险因素。

2型糖尿病患者血清透明质酸与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清透明质酸(HA)与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的相关性,以明确血清HA在T2DM大血管病变中的实验室诊断价值。方法选取我院T2DM患者144例,其中T2DM无并发症组33例,T2DM大血管并发症组47例,T2DM非大血管并发症组64例,另选健康体检者30例作为健康对照组(NC组)。测定血清HA、CIMT、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血脂、空腹血糖水平。结果 T2DM无并发症组、T2DM大血管并发症组、T2DM非大血管并发症组血清HA均高于NC组(P<0.05);T2DM大血管并发症组血清HA显著高于T2DM非大血管并发症组和T2DM无并发症组(P<0.01);血清HA与FPG、Hb A1c、HOMA-IR及CIMT呈正相关(r=0.853、0.711、0.779、0.328,P均<0.01),与HDL-C呈负相关(r=-0.749,P=0.000);CIMT与HA、FPG、Hb A1c、HOMA-IR及hs-CRP呈正相关(r=0.328、0.404、0.384、0.361、0.180,P<0.05),与HDL-C呈负相关(r=-0.303,P=0.000)。结论 T2DM及其血管并发症患者血清HA显著升高,且血清HA升高水平和CIMT显著相关,可能与糖代谢紊乱导致血管损伤影响细胞外基质HA产生有关,血清HA可以作为T2DM及其大血管并发症的辅助诊断指标。

血清微小RNA-21与2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的相关性研究

目的探讨血清微小RNA-21(miR-21)与2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)间的相关性。方法为横断面研究。选取2022年8月至2023年6月在甘肃省人民医院内分泌科住院的T2DM患者及同时期该院体检中心年龄、性别和体重指数(BMI)匹配的健康体检者作为研究对象。根据有无NAFLD将T2DM患者分为单纯T2DM组和T2DM合并NAFLD组,同期健康体检者纳入健康对照组。收集所有研究对象的年龄、性别、糖尿病病程、身高、体重,并计算BMI,检测其miR-21、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、白细胞介素-6(IL-6)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS),并计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。采用单因素方差分析、Kruskal-WallisH检验或χ^(2)检验进行组间比较,采用Spearman相关性分析法分析miR-21水平与各指标间的相关性,采用逐步线性回归分析法分析血清miR-21水平的独立影响因素。结果共纳入研究对象136例,包括T2DM患者91例,健康体检者45例。其中单纯T2DM组45例,T2DM合并NAFLD组46例,健康对照组45例。与健康对照组相比,单纯T2DM与T2DM合并NAFLD组研究对象血清miR-21均降低(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,调整年龄、性别、糖尿病病程和BMI后,血清miR-21水平与HDL-C、mTOR均呈正相关(r值分别为0.228和0.175,均P<0.05),与HbA_(1c)、FPG、FINS、HOMA-IR、IL-6均呈负相关(r值分别为-0.320、-0.230、-0.178、-0.283和-0.361,均P<0.05)。逐步线性回归结果显示,BMI、HbA_(1c)和IL-6均为血清miR-21水平的独立影响因素(t值分别为2.360、-2.354和-3.188,均P<0.05)。结论血清miR-21水平与T2DM合并NAFLD相关,miR-21水平下调可能与胰岛素抵抗、炎症反应和糖脂代谢途径相关。

补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13的研究进展

补体C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白13(CTRP13)是CTRP家族成员中一个新发现的脂肪因子,主要表达于大脑和脂肪组织,以三聚体作为基本结构单元发挥生物学功能。CTRP13具有明显的性别二态性,其基因表达和血清水平受饮食、代谢状况以及激素的调节,参与调节细胞能量代谢和糖脂代谢。此外,CTRP13可作为一种新型厌食信号调节食物摄取和体质量。CTRP13在代谢紊乱(糖尿病、肥胖和非酒精性脂肪肝)及心血管疾病中具有重要作用。现对CTRP13的分子结构与聚合形式、组织分布与表达调控、主要生物学功能及与疾病的关系做一综述。

透明质酸对游离脂肪酸引起的人主动脉血管平滑肌细胞表达IL-6、IL-8和TNF-α的影响

目的探讨透明质酸(HA)对游离脂肪酸(FFA)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)表达白细胞介素6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法培养HA-VSMC,用不同浓度(0、100、200、400μmol/L)FFA和不同浓度FFA+高分子量HA(HMW-HA)或低分子量HA(LMW-HA)处理细胞24、48 h。噻唑蓝法检测FFA和FFA+HA对HA-VSMC存活率的影响;Ed U染色检测细胞增殖活性;酶联免疫吸附法检测培养上清IL-6、IL-8和TNF-α含量;实时荧光定量PCR和Western blot检测IL-6、IL-8和TNF-αmRNA及蛋白表达水平。结果(1)FFA在400μmol/L内呈浓度依赖性诱导HA-VSMC增殖;(2)HMW-HA、LMW-HA均对FFA诱导的HA-VSMC增殖有抑制作用,且HMW-HA抑制作用强于LMW-HA;(3)FFA显著促进HA-VSMC IL-6、IL-8和TNF-α的分泌,且有明显的时间和浓度依耐性;HA可以抑制上述作用;(4)实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,FFA+HMWHA组、FFA+LMW-HA组IL-6、IL-8、TNF-αmRNA及蛋白表达水平均低于FFA组(均P<0.01),其中FFA+HMW-HA组又低于FFA+LMW-HA组(P<0.01)。结论 (1)FFA诱导HA-VSMC IL-6、IL-8、TNF-αmRNA和蛋白表达升高;(2)HA对FFA引起的HA-VSMC IL-6、IL-8和TNF-α的表达有抑制作用,且HMW-HA抑制效果强于LMW-HA。

沙格列汀通过降低整合素avβ5的表达缓解糖尿病合并非酒精性脂肪肝

目的观察沙格列汀对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠血清及肝组织中整合素avβ5表达及肝窦毛细血管化的影响,探讨糖尿病合并NAFLD的发病机制以及沙格列汀对糖尿病合并NAFLD的可能保护机制.方法利用高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM合并NAFLD大鼠模型.将10周龄雄性SPF级Wistar大鼠50只分为5组(每组各10只):正常对照组、单纯NAFLD组、糖尿病合并NAFLD模型对照组、整合素avβ5抑制剂干预组、沙格列汀干预组.avβ5抑制剂干预组通过尾静脉注射整合素avβ5抑制剂慢病毒质粒(109 TU/ml,20μl/d),沙格列汀干预组给予沙格列汀溶液(10 mg·kg^-1·d^-1)灌胃6周,对照组给予同体积生理盐水灌胃.实验结束后检测各组大鼠空腹血糖、胰岛素、血脂、肝功能、肝脏系数及病理变化,透射电镜检测肝脏超微结构,免疫组化及Western blotting检测整合素avβ5、玻连蛋白(Vn)在肝组织中的蛋白表达水平,采用RT?PCR检测整合素avβ5及Vn的mRNA表达水平,ELISA法检测大鼠血清整合素avβ5的水平.2组间比较采用t检验.结果(1)与模型组相比,沙格列汀能明显降低大鼠血清整合素avβ5的表达水平(0.47±0.06比0.96±0.12,t=3.36,P<0.05);(2)糖尿病合并NAFLD组大鼠肝组织中整合素avβ5和Vn蛋白的表达水平均明显高于正常对照组,而使用沙格列汀干预治疗后其表达水平均明显下降(t=3.16~9.86,均P<0.05),avβ5和Vn mRNA的表达结果与其蛋白表达结果一致(t=3.50~8.33,均P<0.05);(3)透射电镜结果显示:模型组大鼠肝窦内皮细胞基底膜明显增厚,呈连续的、无窗孔的基底膜,肝细胞胞质中内质网增生或扩张,肿胀的线粒体嵴减少或溶解消失,Disse氏间隙增宽,且间隙内可见大量胶原纤维增生,使用整合素avβ5或沙格列汀干预治疗后,基底膜逐渐恢复为有窗孔或不连续或变薄的基底膜,扩张的内质网和肿胀的线粒体明显改善;(4)与模型组相比,整合素avβ5或沙格列汀干预组肝脏系数、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、空腹胰岛素、稳态模型评估胰岛素抵抗指数均明显降低(t=6.11~9.7,均P<0.05).结论沙格列汀通过抑制整合素avβ5的表达及其诱导的肝窦毛细血管化而发挥保护糖尿病合并非酒精性脂肪肝的作用.

肝窦内皮功能障碍：糖尿病肝脏微循环障碍合并脂肪肝的推手

2型糖尿病（T2DM）常常合并有肝脏微血管病变和肝脏炎症，是非酒精性脂肪肝（NAFLD）形成的独立危险因素[1]。近年来，T2DM患者NAFLD患病率逐年上升，据最新研究报道，T2DM患者NAFLD的患病率为42.6%～76.0%，约33%的NAFLD患者合并有糖尿病[2]。微循环障碍是NAFLD形成的重要原因之一，而肝窦内皮细胞（LSEC）功能障碍是肝脏微循环障碍的始动和关键环节[3]。LSEC是构成肝窦壁的主要成分，具有提供多窗孔屏障、清道夫、保持肝星状细胞（HSC）的静止状态及介导肝损伤的自我修复等生理功能[4]。LSEC的窗孔结构是区别于血管内皮细胞的特有标志，在调节肝窦血流与周围组织的物质交换中起着重要作用。LSEC功能障碍可造成肝窦血流异常、脂质代谢紊乱、肝窦毛细血管化及肝细胞代谢障碍等，引起肝脏结构和功能异常。糖尿病状态下持续的高糖和脂毒性加剧了LSEC功能的损伤，因此，LSEC功能障碍在NAFLD形成中的作用不容忽视。本文着重分析糖尿病患者LSEC功能在肝脏微循环障碍及NAFLD的发生、发展中作用机制。

2型糖尿病Toll样受体4与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究

目的探讨2型糖尿病患者外周血单个核细胞Toll样受体4（TLR4）信号与颈动脉内膜中层厚度（CIMT）的相关性。方法选取本院2型糖尿病住院患者66例，其中2型糖尿病无大血管病变组[CIMT〈0．9mm]20例，2型糖尿病合并大血管病变组（CIMT≥0．9mm或有颈动脉斑块）46例。性别、年龄匹配的健康志愿者40名作为对照组。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞TLR4表达水平，测定CIMT、超敏C反应蛋白（hs—CRP）、白细胞介素（IL）-6和单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）水平。应用单因素方差分析、Pearson相关分析、多元线性回归分析及logistic回归分析等进行数据分析。结果2型糖尿病合并大血管病变组TLR4表达水平显著高于2型糖尿病无大血管病变组和对照组[（18．60±4．64对14．92±3．47，12．80±2．60），P〈0．05]；2型糖尿病合并大血管病变组IL-6、hs—CRP及MCP-1水平较对照组显著增高I（6．08±3．16对4．52±2．04）pg／ml，（2．67±2．40对1．53±1．49）mg／dl，（307．99±113．39对242．50±48．04）pg／ml，均P〈0．05]，但与2型糖尿病无大血管病变组比较无显著性差异（均P〉0．05）；Pearson相关分析表明：CIMT与TLR4、IL45、hs．CRP、MCP-1、年龄、空腹血糖、HbA，，和稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）呈正相关（r=0．540、0．244、0．271、0．329、0．381、0．490、0．471、0．410，均P〈0．05），与高密度脂蛋白胆固醇（HDL．C）呈负相关（r=-0．323，P〈0．05）。TLR4与CIMT、HOMA—IR．IL-6、hs．CRP和MCP．1呈正相关（r=0．540、0．428、0．214、0．242、0．385，均P〈0．05），与HDL—C呈负相关（r=-0．384，P〈0．05）。多元线性逐步回归分析显示：TLR4、年龄、空腹血糖是CIMT的独立影响因素（R。=0．292、0．423、0．492，均P〈0．05）。Logistic回归分析显示TLR4水平升高是颈动脉斑块形成的危险因素（OR=1．345，95％C11．10～1．54，P〈0．05）。结论提示TLR4炎症信号通路参与2型糖尿病大血管并发症的发生，TLR4水平升高可能是颈动脉斑块形成的一个危险因素。

Endocan与糖尿病周围神经病变的相关性研究

目的探讨血清endocan水平与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性。方法选取2015年4月至2015年11月在甘肃省人民医院内分泌科住院的2型糖尿病(T2DM)患者67例,分为DPN组(25例)和单纯T2DM组(42例),同期性别、年龄匹配的28名健康志愿者作为正常对照组(NC组)。采用ELISA法测定血清endocan水平,同时测定其他代谢指标。应用Pearson相关分析、logistic回归及受试者工作特征(ROC)曲线分析endocan与DPN的相关性。结果与NC组相比,DPN组及单纯T2DM组血清endocan水平明显升高(F=24.26,P<0.05),且与单纯T2DM组相比,DPN组血清endocan水平显著升高(t=5.668,P<0.05)。Endocan与病程、年龄呈正相关(r=0.438、0.394,P均<0.05)。Endocan、吸烟、年龄是DPN的危险因素(OR=1.692、9.880、1.093,95%CI:1.279~2.237、2.039~47.878、1.024~1.168,P均<0.05)。ROC分析结果显示,endocan曲线下面积为0.824(95%CI:0.727~0.921,P=0.000)。结论Endocan与DPN相关,可能是DPN的一种新的生物学标志物。

高糖下调miR-99a对肝窦功能障碍的影响及二甲双胍干预的机制研究

目的观察高糖下调微小RNA(microRNA, miR)-99a对肝窦内皮细胞功能障碍的影响及二甲双胍的干预作用, 探讨糖尿病发生脂肪肝的病理机制与二甲双胍对其可能的保护机制。方法将人肝窦内皮细胞培养后随机分为正常对照组、高糖模型组、miR-99a过表达组、miR-99a过表达阴性对照组、胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor, IGF-1R)抑制剂组、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)抑制剂组、二甲双胍治疗组。采用实时荧光定量PCR(realtime quantitative PCR, RT-qPCR)法检测miR-99a mRNA的表达水平, Western印迹、免疫荧光法检测IGF-1R、磷酸化(phosphorylated, p-)mTOR、玻连蛋白(vitronectin, VN)的表达水平及定位分布, 扫描电镜观察人肝窦内皮细胞超微结构。结果与正常对照组相比, 高糖模型组miR-99a mRNA表达明显下调(P=0.008), 而IGF-1R、p-mTOR、VN蛋白表达均显著升高, 其窗孔直径变小且数量减少;与高糖模型组相比, 二甲双胍干预后miR-99a mRNA表达明显上调, 而IGF-1R、p-mTOR、VN蛋白表达均明显降低(P=0.001,P=0.016,P=0.005), miR-99a过表达组、IGF-1R抑制剂组、mTOR抑制剂组和二甲双胍治疗组其窗孔直径变大、数量增多;miR-99a过表达后, IGF-1R、p-mTOR和VN的蛋白表达明显降低(P=0.007,P=0.013,P=0.003);给予IGF-1R抑制剂后, p-mTOR和VN的蛋白表达明显降低(P=0.006,P=0.009);给予mTOR抑制剂后, VN的蛋白表达明显降低(P=0.008), 而IGF-1R表达无明显变化(P=0.553)。结论高糖下调miR-99a诱导肝窦功能障碍, 其作用机制可能与调控IGF-1R/mTOR信号通路有关;二甲双胍增加miR-99a的表达从而抑制高糖诱导的肝窦功能障碍。