宫颈癌组织中miRNA-34c的表达水平分析及其靶基因PLK4的鉴定

目的:分析miRNA-34c在宫颈癌组织中的表达水平并鉴定其新的靶基因。方法:利用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)检测甘肃省妇幼保健医院34例宫颈癌和癌旁正常组织中miRNA-34c表达水平。利用miRNA靶基因预测数据库预测miRNA-34c新的靶基因Polo样激酶4(PLK4)。将含有PLK4的3‘UTR片段荧光素酶载体分别与miRNA-34c模拟物或阴性对照共转染HEK293T细胞,并检测其荧光素酶活性。在人宫颈癌细胞Si Ha细胞中分别转染miRNA-34c模拟物或阴性对照,利用q RT-PCR法和Western blot法分别检测靶基因的m RNA和蛋白质的表达水平。结果:与癌旁正常组织相比,miRNA-34c在宫颈癌组织中表达下调。在HEK293T细胞中,miRNA-34c模拟物显著抑制荧光素酶的活性(P<0.01)。miRNA-34c模拟物显著下调Si Ha细胞中PLK4的m RNA和蛋白质的表达(P<0.01)。结论:miRNA-34c在人宫颈癌组织中表达下调,且能与PLK4的3’UTR结合并下调其m RNA和蛋白质的表达。