精子DNA损伤与精液常规参数、辅助生殖技术的相关性研究进展

随着不育症发病率的逐年增高,常规精液检测已难以满足临床精准评估男性生育能力的需求。近年来,精子DNA损伤检测成为生殖领域的研究热点。除精液常规检查和形态学评估外,该法也是常规评估男性生育力的一个重要检测方案。精子DNA损伤机制复杂,包括精子凋亡异常、氧化应激损伤、精子发育异常,可导致精子形态异常、浓度降低、数目减少及运动能力下降等精液参数的异常,与不育的发生、辅助生殖治疗结局、子代生长发育等情况密切相关。然而,精子DNA损伤与精液常规参数、辅助生殖技术的关联性尚未得到广泛证实,现对精子DNA损伤与精液常规参数、辅助生殖技术的相关性进行综述,为不育症的诊疗提供参考。

月经血源性间充质干细胞在女性生殖系统疾病中的应用进展

月经血源性间充质干细胞(MenSCs)是近年来在月经液中发现具有间充质干细胞(MSCs)特性的新型干细胞。它的特点是增殖迅速、高克隆潜能和长期存活,在妇女的整个月经周期内都可以获得,而且还可以从废弃的组织中获得,从而避免了伦理问题和侵入性手术。本文就MenSCs的基本特征、免疫表型和功能、分化潜能和免疫调节特性的可塑性、治疗机制及其在女性生殖系统疾病如卵巢癌、盆腔器官脱垂、严重子宫内膜损伤及薄型子宫内膜、卵巢早衰、子宫内膜异位症、胚胎反复植入失败中的应用研究进展、安全性、未来发展的方向作一综述。

精子DNA碎片与辅助生殖结局关系的研究进展

我国不孕症患病率大约为10％～15％，而在众多的不孕原因中，男方因素所致不孕可达40％。约10％正常男性以及20％～25％不育男性都有较严重的精子DNA 损害［1］。精子DNA 损伤可能会对精子的正常受精能力以及受精以后的胚胎发育过程产生影响，并通过人类辅助生殖技术（assistedreproductive technology，ART）造成医源性的传播。

新冠肺炎疫情下的辅助生殖工作应对策略

明确新型冠状病毒对生殖系统的潜在损害机制和应对策略,避免社会恐慌。针对新冠肺炎疫情背景下的备孕青年、不孕不育门诊患者、辅助生育技术(ART)助孕患者和已完成助孕周期患者,对生殖医学工作程序和流程提出建议,最大程度减少医护感染几率,保障辅助生殖工作有序、安全进行。

基质金属蛋白酶在女性生殖系统中的作用

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMPs）是一类蛋白水解酶,可高效调节和控制细胞外基质（extra cellular matrix,ECM）的逆转和平衡。MMPs参与多种生物学过程,例如胚胎发育、血管新生、软骨重建、肿瘤发生和角膜修复等[1]。由于女性生殖系统的结构和功能不断发生周期性的变化,其ECM水解和重建与MMPs的关系更密切。本文就其对生殖系统作用作一综述。

拮抗剂方案在胚胎植入前遗传学检测患者中的临床应用及费效比

探讨胚胎植入前遗传学检测(preimplantation genetic testing,PGT)患者中拮抗剂方案在的临床应用和费效比。方法 回顾性病例对照研究分析2016年1月—2020年1月期间在我院接受PGT治疗的卵巢功能正常的PGT患者154例,依照促排卵方案将其分为三组。比较卵巢功能正常的PGT患者使用三种方案的临床结局和费用上有无差别。结果 在卵巢功能正常的PGT患者中,长效长方案组Gn使用总量、Gn天数最高(P<0.05);每一启动周期总费用以拮抗剂组最低,短效长方案组次之,卵泡期长效长方案组最高(P<0.05)。结论 对于卵巢功能正常的PGT患者,从临床结局及费效比方面综合考虑,拮抗剂方案是比较理想的。

一氧化氮合酶3基因rs2070744位点的单核苷酸多态性与不明原因复发性流产的相关性研究

目的 探讨一氧化氮合酶3(NOS3)基因rs2070744位点的单核苷酸多态性(SNP)与不明原因复发性流产(URSA)的相关性。方法 选取2019年1月至2020年8月甘肃省妇幼保健院复发性流产门诊诊治的150例不明原因复发性流产患者作为研究对象,设为病例组。选取同期进行体检的150例健康女性设为对照组。采用SNaPshot多重SNP分型技术检测两组NOS3基因rs2070744位点的SNP分布情况。研究组间基因型分布差异,分析NOS3基因rs2070744基因多态性和RSA的相关性。结果 两组文化程度、职业及工作性质比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。在共显性遗传模型中,与T/T基因型相比,携带C/T基因型女性发生URSA的风险降低0.53倍(OR=0.53,95%CI:0.292~0.946)。等位基因模式中,与T等位基因相比,携带C等位基因的孕妇罹患复发性流产的风险降低0.46倍(OR=0.46,95%CI:0.269~0.790)。在显性遗传模型中,与T/T基因型相比,携带C/T-C/C基因型女性发生URSA的风险降低0.47倍(OR=0.47,95%CI:0.265~0.844)。rs2070744位点SNP与环境间交互作用均无统计学意义(P>0.05)。结论 NOS3基因rs2070744基因多态性可能与URSA的患病风险相关,但仍需要在大样本量的病例对照研究和不同人群中进一步验证。

异甘草素抗肿瘤活性及初步机制研究

目的探讨异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)抗肿瘤活性及初步机制。方法采用SRB法检测ISL对A549、SW620和HMEC-1细胞增殖的抑制作用;Transwell小室检测ISL对HMEC-1细胞迁移能力的影响;明胶酶谱法检测ISL对HMEC-1细胞MMP-2和MMP-9的表达;管样结构形成实验测定ISL对HMEC-1细胞管样结构形成能力;细胞内活性氧(ROS)通过荧光探针DCFH-DA进行测定;流式细胞术检测ISL对HMEC-1的细胞周期。鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验检测ISL体内抗血管生成作用。结果 ISL可明显抑制A549、SW620和HMEC-1细胞的增殖、HMEC-1细胞的迁移、管样结构形成以及细胞内MMP-2和MMP-9的表达,且均呈现浓度依赖关系。同时,ISL还可抑制HMEC-1细胞内由VEGF诱导产生的ROS量,且存在浓度依赖关系。流式细胞术检测发现高浓度ISL可将HMEC-1细胞阻滞于S期,而低浓度ISL通过诱导细胞凋亡来抑制HMEC-1细胞的增殖。ISL能明显抑制鸡胚尿囊膜新生毛细血管的生成。结论ISL具有明显的抗肿瘤活性,能抑制血管生成,其机制可能与清除HMEC-1细胞内ROS生成,诱导细胞凋亡有关。

亚临床甲状腺功能减退患者体外受精促排卵中促甲状腺素异常增高对临床结局的影响

目的:观察亚临床甲状腺功能减退(SCH)患者在体外受精(IVF)促排卵中促甲状腺激素(TSH)不同程度升高对临床结局的影响。方法:对拟IVF且TSH> 4.0 m IU/L患者(428例)给予左甲状腺素(LT4) 25~100μg治疗,待TSH <2.5 m IU/L后进入超促排卵周期,定期监测TSH。根据扳机后次日TSH的水平将患者分为4组:A组(TSH <2.5 m IU/L,135例)、B组(2.5 m IU/L≤TSH <4.0 m IU/L,149例)、C组(4 m IU/L≤TSH <8 m IU/L,84例)、D组(TSH≥8 m IU/L,60例)。比较4组患者的助孕及妊娠结局。结果:4组患者的获卵数、MII卵率、2PN率、优质胚胎率、可利用胚胎率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。新鲜周期中,4组的临床妊娠率、活产率及流产率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。冷冻周期(FET)中,D组与其他3组比较,活产率降低,流产率升高,差异有统计学意义(P <0.05)。结论:SCH患者促排卵中,TSH <8 m IU/L不影响妊娠结局,但TSH≥8 m IU/L时可能降低FET周期的活产率,增加流产率。

不孕症家庭病耻感在体外受精-胚胎移植中的研究进展

生育是人类基本的权利,而不孕是全世界育龄期妇女都有可能面对的问题。我国不孕的患病率从20世纪70年代的1%~2%上升至今天的10%~15%,且仍在继续升高[1]。体外受精-胚胎移植(In-vitro fertilizationand embryo transfer,IVF-ET)技术是治疗不孕的重要手段,成为许多不孕患者的最终希望,但现阶段IVF-ET妊娠率并不能达到100%,不孕患者生育的基本权利及社会繁衍功能不能得到充分的保证。近期研究[2]显示,大部分不孕患者家属出现连带病耻感,不仅影响IVF-ET成功率、患者婚姻质量,增加IVF-ET治疗中断率,同时影响患者接受治疗的依从性,导致患者社会关系紧张、生活质量下降等一系列的社会功能紊乱。笔者就不孕症家庭病耻感在IVF-ET中的结局研究展开综述。

宫腔镜检查IVF-ET不同妊娠结局的宫腔情况比较和再次妊娠结局分析

目的:观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)不同妊娠结局的宫腔情况以及对异常宫腔患者治疗后的再妊娠情况。方法:回顾性分析行宫腔镜检查的582例IVF-ET病例,A组IVF-ET周期前常规宫腔镜检查223例,B组ET后发生异位妊娠18例,C组1次或多次ET未孕225例,D组ET后早期自然流产116例,B、C、D组不良妊娠结局发生后均做宫腔镜检查。比较4组宫腔镜检查的结果,并对发现宫腔异常者进行相应的治疗,观察治疗后的IVF-ET妊娠结局。结果:A组宫腔镜检查宫腔异常率低于B、C、D组(P<0.05),D组中宫腔粘连发生率显著高于A、B、C组(P<0.01)。异常宫腔经治疗后妊娠率46.45%,异位妊娠率3.53%,早孕自然流产率12.94%。结论:对于IVF-ET助孕发生不良妊娠结局的患者,应将宫腔镜检查列为IVF-ET前的常规检查,以提高重复周期的临床妊娠率和着床率,进而提高活胎分娩率。

评价子宫输卵管碘油造影后自然妊娠结局

目的评价女性不孕症患者经子宫输卵管碘油造影（HSG）检查后1年内自然受孕率。方法对1 068例女性不孕患者行HSG检查后1年内进行随访,根据检查结果区分：A组：双侧通畅;B组：双侧阻塞;C组：一侧通畅,另一侧阻塞;D组：一侧通畅,另一侧不全阻塞;E组：双侧不全阻塞;F组：一侧阻塞,另一侧不全阻塞;G组：至少有一侧积水或粘连。比较不同输卵管检查结果的自然妊娠率。结果至少一侧输卵管通畅及双侧输卵管不全阻塞的自然妊娠率与双侧通畅相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;HSG术后2~5个月累计自然妊娠率最高,波动在15.3%~19.0%;6~7月居中（7.3%~9.2%）;8~12月最低（0.6%~2.5%）。HSG术后第8个月起,自然妊娠率呈现出明显下降趋势（P〈0.05）。结论至少一侧输卵管通畅或双侧输卵管不全阻塞仍可期待自然妊娠。对以上患者HSG检查后超过8月仍不孕,应该采取积极有效的治疗措施。对双侧输卵管阻塞患者应积极采取辅助生殖技术助孕。

重视不孕患者的甲状腺功能筛查

甲状腺的内分泌状态对女性生殖活动有直接影响。不孕患者中有相当一部分是甲状腺内分泌功能紊乱或患甲状腺疾病,而且发病率高。甲状腺的异常内分泌或疾患可以改变女性生殖激素的水平和发生甲状腺自身免疫,从而干扰了女性生殖活动的正常调节,导致降低不孕治疗效果或产生不良辅助生殖临床结局。开展不孕患者的甲状腺功能筛查,对不孕患者的甲状腺内分泌功能进行评估或针对性治疗,可以改善不孕症的疗效。本文就不孕患者甲状腺疾病的流行病学、甲状腺内分泌功能紊乱与不孕的关系,以及不孕患者甲状腺疾病的诊断作一综述。

人类卵裂早期胚胎多核现象研究进展

移植日胚胎的选择在辅助生殖技术(ART)治疗过程中至关重要,如何挑选高质量胚胎进行移植与ART治疗结局息息相关。目前辅助生殖实验室常用胚胎形态学特征来评估胚胎的发育潜能,但其中暂未纳入早期胚胎的卵裂球多核现象。近年来,随着ART及医学遗传学诊断方法的飞速发展,生殖医学研究者逐渐认识到胚胎早期发育过程中的卵裂球多核现象可能与胚胎后续发育潜能之间有一定的相关性,并对其进行了深入研究。本文就胚胎早期发育过程中多核卵裂球的形成原因及其与胚胎后续发育潜能和临床结局之间的相关性展开综述。

IDO和Foxp3在胚胎反复植入失败患者黄体中期的表达

目的:探讨吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)和叉头状转录因子3(Foxp3)基因在胚胎反复植入失败中的作用。方法:采用荧光定量实时聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定50例胚胎反复植入失败患者(组1)黄体中期Foxp3和IDO基因的表达,并与50例正常生育能力妇女(组2)和50例首次行体外受精-胚胎移植(IVFET)并妊娠的妇女(组3)进行比较。结果:3组黄体中期外周血Foxp3 m RNA和IDO m RNA表达比较差异有统计学意义(P<0.05);组2和组3 Foxp3 m RNA及IDO m RNA的表达均高于组1(均P=0.000),组2 Foxp3 m RNA及IDO m RNA的表达高于组3(均P<0.05)。结论:Foxp3 m RNA和IDO m RNA在黄体中期的低表达可能是反复植入失败的免疫性不孕原因。

输卵管积水的不同治疗方法对冻融胚胎移植结局的影响

目的:探讨冻融胚胎移植(FET)前输卵管积水治疗的有效方案。方法:对FET伴有输卵管积水患者187例的临床资料进行回顾分析。其中行输卵管积水抽吸术配合耳穴贴疗组94例(抽吸耳贴组);行输卵管积水近端结扎及远端造口引流53例(结扎引流组);输卵管积水未治疗40例(未治疗组)。比较3组患者FET结局及移植日子宫内膜和内膜下血流分布。结果:3组患者一般情况均无统计学差异(P>0.05);抽吸耳贴组和结扎引流组的临床妊娠率、胚胎种植率及移植日子宫内膜和内膜下A型血流分布率均明显高于未治疗组(P<0.05),抽吸耳贴组与结扎引流组无统计学差异(P>0.05)。抽吸耳贴组早期流产率、移植取消率与结扎引流组也无统计学差异(P>0.05)。结论:输卵管积水抽吸配合耳穴贴疗方案治疗输卵管积水,简单有效且能提高体外受精-胚胎移植的累计妊娠率。

Day3非优质胚胎继续培养囊胚的应用价值研究

目的通过分析第3天(day 3,D3)移植及冷冻后非优质胚胎继续培养的囊胚形成情况及其影响因素,探讨非优质胚胎继续培养囊胚在辅助生殖技术中的应用价值。方法 374例体外受精-胚胎移植新鲜周期资料,首先以是否有囊胚形成分为有囊胎形成组278例和无囊胎形成组96例,比较2组临床及实验室指标之间的差异;比较不同年龄组、常规受精(in vitro fertilization,IVF)和卵胞浆内单精子注射(intra cytoplasmic sperm injection,ICSI)2种授精方式、不同人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)注射日雌二醇(estradiol,E_2)水平、不同成熟卵子数等因素之间囊胚形成率及优质囊胚率的差异,分析影响D3非优质胚胎继续培养囊胚的临床及实验室因素;比较不同D3胚胎质量来源所形成囊胚的解冻妊娠率。结果 374例患者共进行D3非优质胚胎继续培养1 938个,形成囊胚952个,囊胚形成率49.1%(952/1 938),优质囊胚率30.4%(590/1 938)。按年龄分为2组,年龄<35岁组囊胚形成率50.7%(875/1 727)和优质囊胚率31.6%(546/1 727)均明显高于年龄≥35岁组的36.5%(77/211)和20.8%(44/211),差异有统计学意义(P<0.05)。采用IVF受精后对非优质胚胎继续培养,其囊胚形成率51.2%(694/1 356)、优质囊胚率33.0%(447/1 356)均较采用ICSI授精后43.4%(136/316)和25.6%(81/316)高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着HCG日E_2水平的增加和成熟卵子数量的增多,囊胚形成率和优质囊胚率也随之增加。将D3非优质胚胎继续培养后所形成的优质囊胚经单囊胚冷冻后行解冻移植,其临床妊娠率虽然明显较同期D3为优质胚胎来源的囊胚解冻妊娠率低(42.5%vs 57.5%)(P<0.05),但仍然获得了较好的临床妊娠率。结论非优质胚胎囊胚培养可在一定程度提高患者的卵子利用率,节约治疗成本,但根据患者年龄、受精方式、基础内分泌水平、成熟卵子数等自身条件的不同,其非优质胚胎继续培养的利用价值及应用效果也不尽相同。

卵泡液促血管生成因子在卵泡发育中的作用的研究进展

卵泡液由血浆渗出物和卵巢局部分泌物构成,卵泡液不仅为卵母细胞和卵巢颗粒细胞的生存提供适宜的生物环境,并且对卵泡发育、卵母细胞成熟起着直接调控作用。卵泡液中存在大量的细胞因子,它们都通过各自特有的机制作用于女性生殖过程,且随着辅助生殖技术的不断发展,卵泡液中各种细胞因子在女性生殖系统的作用逐渐被重视。本文以近年来生殖医学领域对卵泡液微环境的研究为基础,结合血管生成的机制和卵泡液中参与血管生成过程的各种细胞因子对女性生殖过程的调节,综述了卵泡液中血管生成相关因子在卵泡发育、卵子成熟及胚胎种植等女性生殖过程中的作用。

子宫内膜癌组织中CA125和EpCAM的表达及与临床特征的关系

目的:探讨子宫内膜癌组织中CA125和EpCAM的表达及与临床特征的关系。方法:选取本院2015年1月至2017年1月行手术治疗的45例子宫内膜癌患者标本,同时选取同期子宫内膜增生病例标本30例及正常子宫内膜标本10例作为对照研究。采用免疫组化学染色法检测子宫内膜病变组织中CA125及EpCAM表达情况,分析CA125及EpCAM的表达与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系。结果:正常对照组、子宫内膜增生组及子宫内膜癌组3组间CA125及EpCAM阳性表达率比较差异有统计学意义(P1=0.002,P2=0.006)。CA125及EpCAM在子宫内膜高组织分化程度、肌层侵袭深度≥1/2及FIGO分期Ⅲ-Ⅳ期患者中的阳性表达率均明显高于中低组织分化程度、肌层侵袭深度<1/2及FIGO分期Ⅰ-Ⅱ期患者(P<0.05)。CA125及EpCAM的阳性表达率在不同年龄患者、不同淋巴转移情况等临床特征中比较无显著性差异(P>0.05)。CA125与EpCAM的表达呈现正相关性(r=0.297,P=0.011)。结论:CA125和EpCAM的表达与子宫内膜病变进展有关,临床可通过监测患者癌组织中CA125和EpCAM的表达情况,对判定患者癌病进展及预后有一定的指导意义。

卵母细胞冷冻的临床应用进展

人类卵母细胞冷冻作为生育力保存的一种方式,在辅助生殖技术中起关键作用,目前已在辅助生殖领域得到越来越广泛的应用,并成为生殖医学的研究热点之一。卵母细胞冷冻技术经过多年的发展也取得了较大的进步,冷冻方法上新兴的玻璃化冷冻法逐步取代了传统的程序化慢速冷冻。但不同成熟期人卵母细胞冷冻保存的研究仍有诸多争议。卵母细胞的冷冻保存不论冷冻方法还是冷冻技术如何,都有与年龄相关的婴儿出生率下降的趋势。