放射线治疗包虫病的实验研究

目的通过观察不同剂量6MV X线照射对大鼠继发性棘球蚴活性的影响,探讨放射线治疗棘球蚴病的可行性及其机制。方法对从大鼠体内分离出的棘球蚴囊分别以10、20、30和40Gy的6MV X线进行照射后,观察棘球蚴囊的超微结构,测定囊液中总蛋白和钙离子含量,并通过草酸盐一焦锑酸盐细胞化学法(PPA)探讨放射线治疗包虫病的机理。结果与空白对照组相比,各实验组棘球蚴囊超微结构均可见不同程度的改变和破坏;囊液总蛋白含量明显降低而钙离子含量明显增高,且以高剂量组更为显著。PPA法显示实验组内质网与线粒体扩张且膜上可见黑色光滑的钙盐沉积。结论6MV X线对棘球蚴囊有一定破坏作用,且在一定的范围内存在量效关系。

齐墩果酸抑制高脂饮食肥胖大鼠体重的实验研究

目的观察齐墩果酸对高脂饮食肥胖大鼠的影响并初步探讨其作用机制。方法SD大鼠44只随机分为正常对照组、高脂饮食组、高脂饮食+齐墩果酸低[20mg/(kg·d)]、中[40mg/(kg·d)]、高[80mg/(kg·d)]剂量组。每天定时灌胃,记录进食量,每周定时称体重1次。8周末股动脉采血,测血清生化指标。结果给予高脂饮食后大鼠体重明显增加,血清瘦素(leptin)、抵抗素(resistin)、游离脂肪酸(FFA)和低密度脂蛋白(LDL)增加,高密度脂蛋白减少(HDL),血清谷丙转氨酶(GPT)和丙二醛(MDA)升高。高脂饮食大鼠给予齐墩果酸后,体重减轻,血清瘦素、FFA降低,MDA减少,总抗氧化能力(T-AOC)增高。结论齐墩果酸可明显抑制高脂饮食大鼠的体重增加。其作用可能是通过降低血清瘦素水平,改善体内脂肪代谢,提高机体的抗氧化能力实现的。

柴黄片解热作用的实验研究

目的:研究柴黄片的解热作用。方法:应用干酵母及角叉菜胶致大鼠发热的模型研究柴黄片的解热作用。结果:3、6、12g/kg ig柴黄片均可以降低由干酵母及角叉菜胶所致的大鼠发热作用,大鼠体温呈逐渐下降趋势,其解热作用呈剂量依赖性。结论:柴黄片有解热作用。

扁蒴藤素对急性实验性炎症的作用及其机制研究

目的 研究扁蒴藤素对急性实验性炎症的作用及其机制。方法 用巴豆油致小鼠耳肿,角叉菜胶致小鼠足肿,醋酸诱发小鼠毛细血管通透性增高,角叉菜胶致大鼠腹膜炎模型,观察扁蒴藤素对小鼠耳肿、足肿、毛细血管通透性增高以及对大鼠腹膜炎渗出液中的白细胞计数、蛋白质含量、一氧化氮(NO)含量、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)释放、丙二醛(MDA)生成、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果 扁蒴藤素ip 0.156～0.625 mg·kg^(-1)或im 1～4 mg·kg^(-1)明显抑制小鼠耳肿和足肿(P<0.05);im 2～4 mg·kg^(-1)明显抑制小鼠毛细血管通透性增高(P<0.05);im 1～2 mg·kg^(-1)抑制大鼠腹膜炎白细胞渗出、蛋白质渗出及NAG释放,降低NO含量,抑制MDA生成,增强SOD及CAT活性。结论 扁蒴藤素有明显的抗炎作用;抗炎作用可能与其抑制NO生成、清除氧自由基、抗脂质过氧化、稳定溶酶体膜有关。

蛇葡萄素钠增强肝癌细胞放疗敏感性的实验研究

目的:研究蛇葡萄素钠(AMP-Na)对人肝癌HepG2细胞株的X射线增敏作用,并探讨其作用机制。方法:应用MTT法和集落形成法测定AMP-Na对HepG2细胞的X射线增敏作用,单因素方差分析确定增敏作用,单击多靶模型曲线拟合计算增敏比;流式细胞术检测其对细胞周期和凋亡的影响。结果:MTT检测结果表明,AMP-Na能显著抑制HepG2细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖效应;对X射线增敏作用方差分析表明,AMP-Na能增加X射线对肝癌HepG2细胞的敏感性,最佳增敏剂量为12.5～25μg/mL。集落形成法检测结果表明,应用增敏剂量的AMP-Na后,D0、Dq和N值减小,增敏比为1.94。流式细胞仪检测表明20μg/mL AMP-Na和X射线合用后出现明显的诱导细胞凋亡作用,细胞周期主要表现为S期阻滞,G2/M期细胞比例明显减少,表明联合应用具有增强效应,但细胞周期作用点仍以S期为主。结论:AMP-Na能增强肝癌HepG2细胞对X射线的敏感性,最佳增敏剂量为12.5～25μg/mL,其机理可能通过诱导细胞凋亡、调控细胞周期停滞于S期发挥作用。

养阴生肌散急性毒性及全身过敏性实验研究

目的:对养阴生肌散进行安全性试验,为临床安全用药提供依据。方法:将养阴生肌散按1∶0.7配成混悬液,0.02 mL/g灌胃,观察小鼠的急性毒性反应;运用养阴生肌散对豚鼠进行致敏和攻击,观察豚鼠有无全身过敏反应发生。结果:养阴生肌散LD50未能测出,按照毒理学评价标准,LD50>1 000 mg/kg,属无毒性物质,本实验剂量增加到12 000 mg/kg仍未出现毒性反应,表明养阴生肌散对小鼠安全无毒;对豚鼠全身过敏反应呈弱阳性。结论:养阴生肌散急性毒性及全身过敏性安全指标基本符合规定要求。

重组人碱性成纤维细胞生长因子对大鼠十二指肠溃疡的治疗作用及临床前安全性评价

目的:研究重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对大鼠十二指肠溃疡(DU)的治疗作用并评价其安全性。方法:用半胱胺制备大鼠DU模型;用小鼠及比格犬给药观察rh-bFGF的急性毒性;用大鼠及比格犬给药90d观察rh-bFGF的长期毒性。结果:rh-bFGF对半胱胺诱导的大鼠慢性DU有良好的治疗作用,剂量为5×103、1×104AU/kg时,DU面积较对照组显著减小,溃疡表面的柱状腺上皮再生速度明显增快。rh-bFGF组溃疡表面全部或几乎全部为再生腺上皮所覆盖者近60%,而法莫替丁组仅13%。rh-bFGF一次给药(i.g.和i.v.)对小鼠和犬的最大耐受量分别大于2×106AU/kg和3.5×105AU/kg,分别相当于人临床拟用量(24000AU)的4167倍和729倍。rh-bFGF连续p.o.给药90d,不影响大鼠和比格犬的外观、一般行为活动及生长发育;血液学和血液生化学指标与正常对照组比较,均未见明显差异;对骨髓造血功能也无明显影响;病理检查未见脏器组织形态学改变。结论:rh-bFGF能明显促进DU表面腺上皮再生与溃疡愈合,未见明显急性和长期毒性反应。

甘肃省民乐县人体泡型棘球蚴病2例报告

泡型棘球蚴病（alveolar echinococcosis,AE）是由多房棘球绦虫幼虫寄生于动物或人体内导致的人兽共患寄生虫病,绝大多数原发于肝脏,症状与肝癌类似,病死率较高。我国泡型棘球蚴病患者主要分布于新疆、青海、四川、甘肃和宁夏等地。

干预改变细胞容积对有核红细胞富集效果的实验研究

目的:通过观察干预脐血细胞K+/Cl-离子转运体(KCC)对细胞调节性容量减少(RVD)的生物学改变,为探讨富集胎儿有核红细胞(NRBC)方法提供线索。方法:流式细胞仪计数观察尿素干预脐血KCC转运体后不同密度介质下离心富集NRBC的效果。结果:在高渗400mmol/L尿素干预10分钟条件下,红细胞体积缩小最大(P<0.01)。干预脐血后1.065g/ml密度介质离心下层红细胞白膜层(未干预下层)NRBC富集量由12.20%升为69.90%,富集增长差异有统计学意义(u=7.96,P<0.05),单个核上层(未干预上层)NRBC由7.15%降为2.00%,减少量差异有统计学意义(u=5.47,P<0.05)。结论:尿素干预脐血可以增加有核红细胞富集率,较传统富集法的富集量更高。

尿素干预膜KCC转运体对有核红细胞富集的实验研究

目的通过对尿素干预K-Cl同向转运体(K+/Cl-cotransporter,KCC)对红细胞(RBC)容积改变的观察,探讨建立有效富集分离有核红细胞(NRBC)方法。方法测量在不同渗透压环境下、不同尿素浓度和作用时间后脐血RBC直径,建立改变细胞容积的最佳干预条件。流式细胞仪观察最佳条件下尿素干预脐血KCC转运体后富集NRBC的效果。结果尿素浓度、渗透压条件及时间变化3种干预条件之间有交互作用(F=26.729,P<0.05)。在400 mM高渗环境下尿素干预10 min后可以使成熟RBC体积变小最明显(t=2.62,P<0.05)。干预脐血后1.065 g/mL密度介质离心下层RBC白膜层FNRBC富集量由12.2%升为69.9%(u=7.96,P<0.05),单个核上层FNRBC由7.15%降为2.00%(u=5.47,P<0.05)。结论尿素干预脐血可以增加NRBC富集率达69.9%,较传统富集法增加了约5倍的富集量。

新冠疫情下医学生物安全教育与实验室管理

新型冠状病毒疫情的流行给全球人民健康带来了巨大威胁,生物安全防控问题再一次引起国家的高度重视,对于医护人员感染的防护提出了更高要求,由此对于医学生的生物安全教育和生物安全实验室的管理有必要进行重新审视并进一步完善。以兰州大学医学部为例,在总结了高校开展工作的现状与已取得成绩的基础上,针对尚存的问题和新冠疫情下的新要求,从教育体系、管理体系和保障体系三方面对医学生物安全教育与实验室管理进行再思考,提出建议与实施方案,期望在不断的改进下,使我国医学院校在培养医务人才的初期,在生物安全防控的教育与管理方面更上一层楼。

荷叶水提物对实验性肥胖大鼠脂代谢的影响及机制

目的:探讨荷叶水提物的减肥降脂作用及机制。方法:通过离体脂肪组织灌流实验观察荷叶水提物对正常SD大鼠离体脂肪组织游离脂肪酸(FFA)释放的影响;利用高糖高脂饮食诱导建立实验性肥胖大鼠模型,探讨荷叶水提物给药4周后,大鼠体重和血脂水平的变化,并采用RT-PCR和免疫组化技术对脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和瘦素(leptin)表达进行检测。结果:离体实验发现荷叶水提物可明显促进离体脂肪组织FFA的释放。在体实验发现中剂量荷叶(60 mg/kg)与奥利斯他相似,可使实验性肥胖大鼠体重、血脂水平明显下降(P<0.05),使脂肪组织PPAR-γ和瘦素的表达明显下降(P<0.05)。结论:荷叶水提物可通过改善大鼠脂肪组织PPAR-γ和leptin的表达,促进脂肪的动员和分解,降低肥胖大鼠体重和血脂水平,有望研发为减肥药物。

自噬在As2O3诱导Burkitt淋巴瘤Raji细胞死亡中的作用及机制研究

目的研究自噬在As2O3诱导的Raji细胞死亡中的作用及机制。方法透射电镜和MDC荧光染色观察细胞自噬形态,MTT法测定细胞增殖活性;流式细胞术(FCM)及FITC-Annexin-V/PI染色检测细胞周期和细胞凋亡,Western blot检测细胞LC3-Ⅰ/Ⅱ表达及转换;RT-PCR检测细胞bcl-2 mRNA和p53 mRNA的表达水平。结果 As2O3明显抑制Raji细胞增殖,诱导其细胞周期G2/M阻滞和凋亡,抑制bcl-2基因和增强p53基因表达。同时,As2O3可同步诱发Raji细胞的自噬活性。自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)抑制As2O3诱导的自噬活性,上调bcl-2基因和下调p53基因表达,抑制As2O3对Raji细胞的杀伤效应、降低Raji细胞对As2O3的敏感性。而自噬诱导剂雷帕霉素(Rapa)的作用则与3-MA的效应正好相反。结论细胞凋亡和自噬性细胞死亡共存于As2O3诱导的Raji淋巴瘤细胞死亡中,Bcl-2和p53可能起着关键的调控作用。

锰超氧化物岐化酶模拟化合物诱导K562细胞凋亡的机制研究

目的观察锰超氧化物岐化酶模拟化合物（mimics of manganese superoxide dismutase,MnSODm）对人白血病K562细胞凋亡诱导作用,并探讨其分子机制。方法以人白血病K562细胞为靶细胞,四氮唑蓝比色法（MTT法）测定细胞增殖活性;Annexin V/PI双标记和细胞形态学法检测细胞凋亡;RT-PCR检测bcl-2和bax基因mRNA的表达水平;流式细胞术（FCM）测定Bcl-2和Bax蛋白表达水平、线粒体跨膜电位（Δψm）、细胞色素C（Cyt C）释放和Caspase-3活性变化。结果0.5~10mg·mL-1MnSODm明显抑制K562细胞增殖（P〈0.01）,Annexin V/PI染色显示凋亡细胞明显增多,光学显微镜和透射电镜观察呈现典型的凋亡形态改变;bcl-2基因mRNA和蛋白表达下调,bax基因mRNA和蛋白表达上调,线粒体Δψm降低,Cyt C释放增多,Caspase-3活性增强。结论MnSODm调控Bax/Bcl-2表达,通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。

高效液相色谱法同时测定少毛北前胡中6种香豆素

建立了同时测定少毛北前胡中6种香豆素（香柑内酯、蝉翼素、丝立尼亭、顺-3′,4′-二千里光酰基-3′,4′-二氢邪蒿内酯、白花前胡丁素和白花前胡素E）含量的HPLC分析方法。色谱柱为Lot Validation-C18（150mm×4.6mm,5μm）柱;流动相为甲醇-水;流速为0.8mL/min;检测波长为323nm;柱温30℃。6种香豆素在一定范围内线性良好,相关系数为0.9992-0.9999;精密度RSD均低于3.95%;平均回收率为93.0%-98.6%。本方法简便、快速、准确;并对其中一种香豆素化合物进行分离纯化,通过核磁、质谱等光谱分析方法确认了此化合物的结构。

红芪多糖的体外抗氧化活性研究

[目的]研究红芪多糖3(HPS-3)的抗氧化活性。[方法]在体外化学模拟条件下,研究HPS-3对超氧阴离子(O2-.)、羟基自由基(.OH)、DPPH和过氧化氢(H2O2)的清除作用。[结果]HPS-3具有一定的清除自由基的能力,在0.05～5.00mg/ml浓度范围内,对O2-.、H2O2、.OH及DPPH的最大清除率分别为55.92%、59.32%、53.69%和87.66%,且呈一定的量效依赖关系。[结论]红芪多糖在体外有直接的抗氧化能力。

IL-17和STAT3在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的检测IL-17和STAT3在结直肠癌组织中的表达,探讨其与结直肠癌临床病理特征和肿瘤血管生成的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测94例结直肠癌组织和31例正常肠黏膜组织中IL-17、STAT3蛋白的表达,并应用CD34标记微血管计算MVD。结果免疫组化结果显示IL-17主要表达在结直肠癌组织中的肿瘤细胞和肠黏膜固有层淋巴细胞胞浆内,阳性表达率明显高于正常肠黏膜(P<0.01);IL-17的表达与结直肠癌分化程度和Dukes分期有关(P<0.05)。STAT3在结直肠癌组织中的表达显著高于其在正常肠黏膜中的表达(P<0.01),且与肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移和Dukes分期有关(P<0.05)。IL-17和STAT3在结直肠癌组织中的表达与MVD有关(P<0.05)。Spearman等级相关分析表明IL-17和STAT3在结直肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.251,P=0.015)。结论 IL-17和STAT3在结直肠癌组织中高表达,可能在结直肠癌的血管生成和肿瘤的发生、发展中起重要的作用。

siRNA逆转白血病K562/ADM细胞对抗癌药物耐受性的研究

目的:研究小干扰RNA(smallinterfering RNA,siRNA)对多药耐药细胞K562/ADM耐药性的逆转效应。方法:以K562/ADM细胞为靶细胞,针对mdr1基因mRNA不同靶点设计合成4对siRNA分子,脂质体介导转染K562/ADM细胞,RT-PCR和实时荧光定量PCR检测mdr1基因mRNA的表达水平,流式细胞术(FCM)测定P-糖蛋白(P-gp)表达;MTT比色法检测K562/ADM细胞对多柔比星(ADM)、柔红霉素(DNR)和依托泊苷(Vp-16)的敏感性。结果:选择mdr1mRNA的4个靶点设计合成的siRNA中,针对333靶点的siRNA(simdr1/333)对mdr1基因的表达具有较好的沉默效果,RT-PCR和实时定量PCR检测,mdr1 mRNA表达分别降低69%和63%;FCM检测P-gp的表达强度(MFI)降低约50%。si-mdr1/333可提高K562/ADM细胞对ADM、DNR和Vp-16的敏感性,耐药逆转倍数分别为3.45、1.70和2.91倍。结论:siRNA能特异性地阻抑白血病多药耐药细胞K562/ADM细胞mdr1基因的表达,逆转其对抗癌药物的耐受性。

ELISA法研究新型重组人肿瘤坏死因子在小鼠体内的药代动力学

目的研究新型重组人肿瘤坏死因子(nrhTNFα)在小鼠体内的药代动力学。方法给小鼠分别im和ivnrhTNFα后,按不同时间点采血,分离血清,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中nrhTNFα的浓度,用DAS药动学软件进行曲线拟合并计算参数。结果nrhTNFα5.51μg·kg-1、24.60μg·kg-1小鼠im后药动学特征符合一室开放模型,呈一级动力学消除。nrhTNFαim给药能迅速吸收入血,Tmax分别为0.17h和0.33h。T1/2分别为1.25h和0.73h,AUC随剂量增加而成比例增加。nrhTNFα5.51μg·kg-1小鼠iv后符合二室开放模型,呈一级动力学消除,T1/2β为0.37h,AUC为771.24ng·L-1·h-1。结论nrhTNFαim和iv的药动学行为在小鼠体内分别符合一室和二室开放模型,均呈一级动力学消除。im给药的生物利用度为48.84%,可考虑作为替代iv的一种安全给药途径。

小鼠代谢综合征模型的特征及西布曲明的治疗作用研究

目的研究高脂饲料诱导C57BL/6 J小鼠形成代谢综合征(MS)模型的特点,以及盐酸西布曲明对MS小鼠的治疗作用。方法用含10%猪油、2%胆固醇及0.4%胆酸钠的高脂饲料喂养9 wk♂C57BL/6 J小鼠18.5 wk,然后用西布曲明8 mg.kg-1灌胃10 d。实验终点时测定体重、腹腔内脏脂肪及肝脏湿重和肝游离脂肪酸(FFA)含量;取血分离血清测定血脂、血糖和血清胰岛素水平,并计算胰岛素抵抗指数;肝组织进行HE染色和油红O染色,光镜下观察脂肪病变程度。结果模型组小鼠脂肪重量及系数、肝脏重量均明显升高,肝组织切片光镜下可见明显的脂肪病变;血总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均升高,且以LDL-C升高最为明显;高胆固醇喂养使模型小鼠血甘油三酯(TG)水平降低。西布曲明可改善MS小鼠的中心性肥胖、高血糖、高胰岛素血症和胰岛素抵抗,并进一步降低MS小鼠的血TG水平;但是,西布曲明可增加肝FFA含量,对MS小鼠的肝脏湿重及肝脂肪病变无改善作用。结论高脂饲料长期喂养C57小鼠可成功建立类似人类MS表现的动物模型;西布曲明可改善MS小鼠的中心性肥胖、糖脂代谢异常、增加机体对胰岛素的敏感性,对MS有一定的治疗作用。