脂联素及其受体在不同年龄牦牛附睾中的表达与分布

为研究脂联素(APN)及其受体在不同年龄牦牛附睾中的表达与定位,笔者采集幼年(0.5~1岁)、成年(4~5岁)、老年(7岁)牦牛附睾(头、体、尾),通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western-blotting)和免疫组织化学(IHC)方法检测APN及其受体1(APNR1)和受体2(APNR2)在附睾(头、体、尾)中的表达与定位。qRT-PCR结果显示,APN和APNR1在老年牦牛附睾尾中的m RNA转录水平显著高于幼年和成年(P<0.05);APNR2在成年和老年牦牛附睾头、体、尾中的转录水平均呈上升趋势,并且APNR2在老年牦牛附睾尾中的转录水平最高(P<0.05)。Western-blotting结果显示,APN蛋白在幼年牦牛附睾头、体、尾中的表达量呈下降趋势(P<0.05),而在成年和老年牦牛的表达趋势相反(P<0.05),且在老年牦牛附睾尾表达量最高(P<0.05);老年牦牛附睾中APNR1的蛋白表达量显著高于幼年和成年牦牛(P<0.05),且在老年牦牛附睾尾表达量最高;APNR2蛋白在幼年牦牛附睾头中表达量最高,而在成年和老年牦牛附睾头、体、尾中均呈上升趋势,且在老年牦牛附睾尾中表达量最高(P<0.05)。IHC结果显示,APN、APNR1及APNR2分布于牦牛附睾上皮细胞、纤毛、间质和精子中。研究结果表明,APN及其受体在牦牛性成熟前后的表达差异显著,推测其对于牦牛附睾中精子成熟、转运和储存等方面具有重要的意义,本实验为高原环境下对于雄性牦牛生殖调控的研究提供了一定的理论依据。