甘肃省首例人感染H7N9流感病毒分子特征分析

目的分析甘肃省首例人感染H7N9禽流感病例的发现过程及病毒分子特征,为本省禽流感防控提供科学依据.方法分析病例发现过程,对病例呼吸道标本进行实时荧光定量PCR检测并对分离毒株进行测序,分析该毒株血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因特征.结果该病例明确暴露于A(H7N9)禽流感病毒污染的环境,标本经核酸检测为A(H7N9)阳性.分离病毒的HA基因和NA基因均属于欧亚系的长三角株,并与山东省和江苏省禽间分离的A(H7N9)禽流感病毒相似度较高.该病毒HA蛋白发生了G186V、T160A和Q226L基因位点突变,HA基因165~167增加了一个糖基化位点NKS,HA序列糖基化22~24、38~40、240~242、411~413和483~445位点均未发生明显改变.结论甘肃省首例人感染H7N9禽流感病毒与已报道的H7N9病毒亲缘关系较高,加强基因水平病毒变异的监测有助于疫情的科学防控.

甘肃省迭部县莱姆病自然疫源地调查

目的了解实施天然林保护后迭部县莱姆病在人群中的感染现状,自然疫源地的变迁及宿主的莱姆病感染情况。方法人群血清伯氏疏螺旋体抗体的检测采用免疫荧光法,以聚合酶链反应(PCR)检测伯氏疏螺旋体DNA。结果迭部县境内5个林场及7个乡镇采集居民血清522份,莱姆病抗体阳性57份,阳性率10.92%。捕鼠6种69只,平均捕获率15.33%;其中北社鼠25只,占捕获总数的36.23%,褐家鼠18只,占26.09%,大林姬鼠15只,占21.74%,小林姬鼠9只,占13.04%,小家鼠和黑线姬鼠各1只,各占1.45%。对62份鼠脾脏、66份肾脏,用PCR检测伯氏疏螺旋体核酸,结果阳性鼠脾6份,肾5份,鼠携带莱姆病病原阳性率为15.15%(10/66);其中北社鼠6只,褐家鼠2只,大林姬鼠及小林姬鼠各1只。用BSK培养基从采集的鼠肾、膀胱中分离培养出3株伯氏疏螺旋体。结论迭部县广泛存在莱姆病疫源地,人群感染率较高。

基于金标免疫层析技术SARS-CoV-2抗体检测COVID-19的临床应用价值分析

目的研究基于金标免疫层析技术新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体检测对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床应用价值。方法大肠杆菌表达SARS-CoV-2 N蛋白,应用重组N蛋白制备双抗原夹心SARS-CoV-2抗体金标检测试剂盒,用该试剂盒检测95例COVID-19确诊患者,41例疑似患者,88例排除COVID-19的发热和肺部感染患者及48例发热门诊工作医务人员血清样本,SARS-CoV-2核酸检测(RT-PCR)作为金标准对照,以特异性、灵敏度、阳性预测值、阴性预测值及准确度评价其临床应用价值。对比分析不同感染时期COVID-19确诊和疑似患者及境外输入性与本地COVID-19确诊和疑似患者SARS-CoV-2抗体检测结果。分析SARS-CoV-2抗体检测试剂交叉反应及基础性疾病干扰实验。采用SPSS 23.0软件进行统计分析,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果SARS-CoV-2特异性抗体检测试剂的特异性、灵敏度、阳性预测值、阴性预测值及准确度分别为96.32%、81.05%、93.90%、87.91%、90.04%。COVID-19疑似患者的血清抗体阳性率与COVID-19确诊患者之间差异有统计学意义(P=0.002),与非COVID-19患者之间差异有统计学意义(P<0.001)。COVID-19确诊和疑似患者入院首次血清抗体阳性率与其住院期间的检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。境外输入性COVID-19确诊和疑似患者抗体阳性率与本地患者之间差异均无统计学意义(P>0.05)。SARS-CoV-2抗体检测试剂与肺炎支原体和其他呼吸道病原体感染之间交叉反应较低,基础性疾病的干扰也较低。结论基于免疫层析的SARS-CoV-2抗体检测对COVID-19诊断特异性强,灵敏度和准确度高,与病毒核酸检测联合应用可用于COVID-19早期诊断和疑似患者的排除。

中性粒细胞胞外诱捕网在类风湿关节炎致病机制中的初步探究

目的探究中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)的潜在作用。方法取RA患者滑膜组织分离培养;提取健康人外周血中性粒细胞,刺激NETs形成并提取NETs;用CellTiter96 AQueous单溶液试剂(MTS)增殖实验评估NETs对RA-FLSs增殖的影响;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定NETs持续刺激RA-FLSs60h后细胞中结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达情况。采用配对样本t检验和单因素方差分析对结果进行处理。结果分离纯化的中性粒细胞体外刺激可形成NETs,提取的NETs测定DNA浓度为58.5ng/μl(1×10^6细胞);与对照组(0μlNETs)相比,NETs能促进RA-FLSs增殖,且随着NETs浓度增加其促进RA-FLSs增殖的能力也增强(F=99.519,P<0.01);与对照组(0μlNETs)相比,10μlNETs可以明显促进RA-FLSs增殖(t=-12.226,P<0.01);用脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)预处理NETs后,其促进RA-FLSs增殖的作用受到抑制(t=-2.376,P=0.049);NETs能刺激RA-FLSs内CTGFmRNA表达上调[(30.7±0.5),t=12.13,P<0.01]。结论NETs在体外能促进RA-FLSs增殖并刺激RA-FLSs内CTGFmRNA表达上调。