绵羊CD14基因在临床型乳腺炎乳腺组织中的表达

白细胞分化抗原14(cluster of differentiation antigen 14,CD14)是由成熟的单核巨噬细胞分泌的多态类炎症细胞因子,在细胞激活、免疫反应调节和机体炎症反应过程中起到关键作用。到目前为止,关于CD14基因在绵羊乳腺炎乳腺组织发生过程的研究仍处于空白阶段。为分析CD14基因的序列以及在临床型乳腺炎乳腺组织中的表达特征,本研究基于NCBI网站已公布的绵羊CD14 CDS序列,对该基因生物信息学进行分析。使用qRT-PCR、Western blot与免疫组织化学染色的方法检测CD14 mRNA及其蛋白在健康和临床型乳腺炎绵羊乳腺组织中的表达与分布情况。生物信息学分析结果显示绵羊CD14为疏水性不稳定蛋白、分泌蛋白,在进化过程中CD14基因高度保守趋于稳定。qRT-PCR与Western blot结果显示,临床型乳腺炎乳腺组织中CD14 mRNA显著高于健康组(P<0.05),CD14蛋白的相对表达量极显著高于健康组(P<0.01)。免疫组织化学检测结果显示在健康绵羊乳腺组织细胞中的CD14蛋白主要存在于基质细胞中,而在临床型乳腺炎乳腺组织中于乳腺上皮细胞和基质细胞中均强烈分布。这可能是由于CD14基因表达的上调,导致患临床型乳腺炎乳腺组织中基质细胞与乳腺上皮细胞中炎症反应加剧。为进一步研究CD14基因在绵羊乳腺炎发病机制中的调控作用提供了基础信息。