骨碎补总黄酮对口腔种植骨整合中牙槽骨成骨细胞增殖和凋亡的影响研究

目的 探讨骨碎补总黄酮(total flavonoids of rhizomadrynariae, TFRD)对牙槽骨成骨细胞的增殖和凋亡的影响及其机制。方法 分离和培养大鼠牙槽骨成骨细胞。将细胞分为对照组、低剂量TFRD组(50 mg/L)、高剂量TFRD组(100 mg/L);NC mimic和miR-93-5p mimic转染至成骨细胞后,与高剂量的TFRD孵育,分别记为TFRD+NC mimic组和TFRD+miR-93-5p mimic组;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;采用RT-qPCR和Western blotting分别检测miR-93-5p、成骨分化相关基因(Osteriex和RUNX2)和WNT通路相关基因(Dishevelled和β-catenin)的表达水平;ALP染色和活性测试检测细胞成骨分化。结果 TFRD处理后的牙槽骨成骨细胞增殖能力增加(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),ALP活性、Osteriex和RUNX2的表达增加(P<0.05),miR-93-5p的表达降低(P<0.05),FZD6、Dishevelled和β-catenin的表达增加(P<0.05),激活WNT通路。过表达miR-93-5p逆转TFRD对成骨细胞的保护作用,导致细胞增殖能力降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05),ALP活性和Osteriex和RUNX2的表达降低(P<0.05),miR-93-5p的表达增加(P<0.05),FZD6、Dishevelled和β-catenin表达减少(P<0.05),抑制WNT通路。结论 TFRD通过miR-93-5p/FZD6/WNT通路促进牙槽骨成骨细胞增殖,抑制凋亡。