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AsiaⅠ口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
4
1
作者
林彤
常惠芸
+3 位作者
杜惠芬
邵军军
独军政
丛国正
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1034-1037,共4页
目的:制备AsiaI口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白为抗原免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠,经过3次免疫后,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA克隆和...
目的:制备AsiaI口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白为抗原免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠,经过3次免疫后,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用SDS-PAGE电泳、间接ELISA以及微量细胞中和试验对所获得的mAb的特异性进行鉴定。结果:成功获得3株能稳定传代并分泌抗AsiaImAb的杂交瘤细胞株,分别命名为:1B8、5E1、5E2,其分泌的mAb为IgG1(1B8)和IgG2a(5E1、5E2)亚类,他们均能特异性的识别VP1重组蛋白和AsiaI型全病毒,其腹水效价在1:105~1:106。微量细胞中和试验表明该mAb能很好地识别灭活的FMDV,中和效价达1:1024以上。交叉试验表明该mAb具有高度特异性,型间无交叉反应,证明所获得的mAb均完全针对AsiaI FMDV抗原决定簇。结论:在口蹄疫病毒mAb的研究中,VP1重组蛋白有望代替活病毒来制备mAb。AsiaI口蹄疫病毒VP1mAb的成功制备,为进一步研究和开发新型口蹄疫的检测方法和抗原表位奠定了基础。
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关键词
AsiaI型口蹄疫
VP1蛋白
重组抗原
单克隆抗体
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职称材料
题名
AsiaⅠ口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
被引量:
4
1
作者
林彤
常惠芸
杜惠芬
邵军军
独军政
丛国正
机构
中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原
生物
学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室
甘肃省雅华生物技术有限公司
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1034-1037,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA10A204)
文摘
目的:制备AsiaI口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法:用纯化的AsiaI型口蹄疫病毒VP1表位重组蛋白为抗原免疫6~8周龄的雌性BALB/c小鼠,经过3次免疫后,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用SDS-PAGE电泳、间接ELISA以及微量细胞中和试验对所获得的mAb的特异性进行鉴定。结果:成功获得3株能稳定传代并分泌抗AsiaImAb的杂交瘤细胞株,分别命名为:1B8、5E1、5E2,其分泌的mAb为IgG1(1B8)和IgG2a(5E1、5E2)亚类,他们均能特异性的识别VP1重组蛋白和AsiaI型全病毒,其腹水效价在1:105~1:106。微量细胞中和试验表明该mAb能很好地识别灭活的FMDV,中和效价达1:1024以上。交叉试验表明该mAb具有高度特异性,型间无交叉反应,证明所获得的mAb均完全针对AsiaI FMDV抗原决定簇。结论:在口蹄疫病毒mAb的研究中,VP1重组蛋白有望代替活病毒来制备mAb。AsiaI口蹄疫病毒VP1mAb的成功制备,为进一步研究和开发新型口蹄疫的检测方法和抗原表位奠定了基础。
关键词
AsiaI型口蹄疫
VP1蛋白
重组抗原
单克隆抗体
Keywords
Asial type FMDV
VP1 protein
recombinantantigen
mAbs
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
AsiaⅠ口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
林彤
常惠芸
杜惠芬
邵军军
独军政
丛国正
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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