季胺-辣根过氧化物酶-过氧化氢显色新体系及其在酶活性检测中的应用

建立了光度法测定辣根过氧化物酶(HRP)活性的季胺-过氧化氢-HRP新体系,探讨了反应机理.该方法基于含KI的pH4.5PBS介质中,HRP催化H2O2氧化季胺[二(4–二甲氨基苯基)甲烷]的显色反应在462nm处的吸光度.吸光度与HRP活性呈线性关系.该可溶性的季胺比目前临床常用显色剂3,3',5,5'-四甲基联苯胺更稳定,克服了后者的缺点.在选定的实验条件下,测定HRP的线性范围为2.0×10-9～2.5×10-7g/mL,检出限为3×10-10g/mL.应用于HRP标记马抗人甲胎蛋白免疫标记物的测定,结果满意.该方法操作简便,灵敏度高,在临床上有较好的应用前景.