“四结合,一体化”细胞生物学实验教学模式的探索与实践

培养创新型人才是高校教育的根本任务,而创新型人才培养的关键在于创新教学。近年来,理论教学研究已取得丰硕成果,但实验教学创新性不足,束缚了学生个性化发展,不利于创新能力的培养。针对传统实验教学存在的主要问题,经过三年的教学实践,我们对细胞生物学实验教学进行系统设计和综合改革,探索和构建“四结合,一体化”的实验教学新模式,将“线上与线下、课内与课外、虚拟与实操、基础与创新”进行四结合,实现大学生创新能力培养过程中的“创新意识、创新思维、创新实践”的一体化,将大学生创新能力培养贯穿于实验教学全程。

乳铁蛋白及其生物学作用

乳铁蛋白是免疫防御系统中的一个重要成分。本文介绍了乳铁蛋白的发现、产生和存在部位；乳铁蛋白的杀、抑菌作用和在炎症中的作用；乳铁蛋白与免疫系统：包括对初次体液免疫应答的调节作用，对淋巴细胞增殖的影响，对混合淋巴细胞反应的影响和抗乳铁蛋白抗体与自身免疫病的关系等；乳铁蛋白受体和乳铁蛋白释放因子。

福氏痢疾桿菌第4型的生物学性状及其变异的研究

福氏痢疾杆菌第4型,为我国近年来比较重要的流行菌型,国内外学者都曾进行过有关的研究报导,方纲等并进行了它的型抗原成分的分析。为了要深入了解它的生物学性状,特作进一步的研究。材料与方法实验用菌株及血清福州市分离的福氏4型菌(福氏痢疾杆菌第4型的简称,下同)55株,标准菌4a及4b各1株(来源捷克)。因子血清购自大连及上海生物制品研究所,部分系自制。实验方法生化反应检查及玻片凝集试验均按一般肠道杆菌的检定步骤进行。传代试验为先把待检菌进行平板分离。

现代生物技术的应用与展望

现代生物技术及生物工程是以重组DNA技术和细胞融合技术为基础,包括基因工程、细胞工程、酶工程和发醇工程四大体系组成的现代高新技术.

即早表达基因c-fos在电针抗局灶性脑缺血损伤中作用的研究

本文对即早表达基因c fos在电针抗局灶性脑缺血损伤中的作用进行了探讨。结果表明 ,局灶性脑缺血可以引起c fos在缺血侧皮层的大量表达 ,电针能部分抑制这种表达 ,使局灶性脑缺血动物模型的脑梗塞灶减小。但c fos反义寡核苷酸脑内注射可完全阻断c fos表达 ,导致脑梗塞灶体积明显增大 ;同时也取消了电针的抗脑缺血损伤作用。提示脑内c fos适度的表达 ,可能在脑缺血损伤中有一定的保护作用 ;电针可能通过部分抑制脑内c fos的过度表达 。

子宫内膜异位症不孕的腹腔巨噬细胞及其释放白细胞介素 I(IL-1)的活性改变

本文以18例轻度子宫内膜异位症不孕者作为研究对象;以正常生育力的妇女10例作为对照。检测各例腹腔液量、腹腔巨噬细胞(MΦ)数、巨噬细胞吞噬能力及腹腔液、巨噬细胞培养上清液IL-1活性。研究结果:轻度子宫内膜异位症不孕者比正常生育对照妇女腹腔巨噬细胞数量增多,对白色念珠菌的吞噬指数及吞噬百分率增高,腹腔液及巨噬细胞培养上清液IL-1活性增强。研究表明,子宫内膜异位症不孕者腹腔巨噬细胞及其释放的IL-1均有改变,MΦ及IL-1可能是不孕的因素。

c-fos反义寡聚核苷酸对脑缺血性损伤和电针抗损伤作用的影响

用c fos反义寡聚核苷酸脑内微量注射、TTC染色、c Fos免疫组织化学和电针等技术和方法 ,探讨即早反应基因c fos在大鼠局灶性脑缺血 (MCAO)模型的脑损伤中和电针抗局灶性脑缺血脑损伤中所起的作用。实验结果表明 ,局灶性脑缺血可引起c fos在缺血侧皮质的大量表达 ,电针能部分抑制这种表达 ,使脑缺血梗死灶体积减小。在缺血中心区注射c fos反义寡聚核苷酸后 ,脑内c fos的表达基本上被完全阻断 ,导致脑梗死灶的体积明显增大 ,电针抗脑缺血脑损伤的作用也被取消。提示脑缺血后 ,脑内的c fos适度表达可能对脑损伤有一定的保护作用 ;电针可能部分抑制了脑内c fos表达 ,调整了缺血后的c fos表达的程度 ,对脑缺血损伤起一定的保护作用。

白血病患者血浆白细胞介素18的水平及其临床意义

本研究探讨白血病患者血浆白细胞介素 18(IL 18)水平与白血病发病、预后及治疗的相关临床意义。采用酶联免疫吸附测定法 ,对 3 7例白血病患者在初诊时及化疗后 2周分别采集静脉血 ,测定其血浆IL 18水平 ,以18名献血员为正常对照组。结果显示 ,白血病患者血浆IL 18水平治疗前略高于正常水平 ,但差异无显著性。其中急性淋巴细胞白血病患者血浆IL 18水平升高显著 (173 2 7± 3 4 2 4pg/ml) ,慢性粒细胞性白血病患者IL 18水平 (111.82± 50 .56pg/ml)低于正常对照组 (13 5.82± 47.0 0pg/ml)。化疗后 ,白血病各组患者血浆IL 18水平均明显低于正常对照组 (P <0 0 0 1)。结论 :白血病患者血浆IL 18水平是不均一性的 ,而其化疗后血浆IL 18水平均明显减低。这一点预示着白血病患者化疗后的免疫功能低下与其血浆IL 18水平下降 。

枸杞多糖增强效应T细胞增殖和杀瘤活性机制的研究

目的观察枸杞多糖对效应T细胞增殖和杀瘤活性机制的作用。方法通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞并培养其为树突状细胞,用冻融法制备肝癌细胞的全抗原并致敏树突状细胞;通过混合淋巴细胞实验,获取树突状细胞激活的特异性效应T细胞。用MTT法测定效应T细胞对肝癌细胞的杀伤率。观察枸杞多糖在树突状细胞的成熟及T细胞的激活、增殖和杀瘤过程中的作用。结果枸杞多糖单独对T细胞无明显的增殖能力,但能促进树突状细胞的成熟并且能增强效应T细胞的增殖能力和杀瘤活性。结论枸杞多糖能促进树突状细胞成熟和增强效应T细胞的增殖和杀伤肿瘤的活性。

在抗体介导下巨噬细胞吞噬精子的作用

近来,许多作者报道,一些原因不明的男性或女性不孕者有抗精子抗体。然而,抗精子抗体的抗生育机制并不完全清楚。本文研究了兔抗大鼠抗精子抗体在体外介导大鼠腹腔巨噬细胞吞噬精子的作用。结果表明,抗精子抗体能调理大鼠巨噬细胞吞噬大鼠精子;在抗体介导下吞噬百分率和吞噬指数均明显增加。扫描电镜下观察到精子被巨噬细胞折曲、包裹或吞没.实验说明,抗精子抗体可以通过增强巨噬细胞对精子的吞噬作用而参与抗精子免疫应答.

恶性肿瘤患者血浆白介素-18的变化及其临床意义

目的:进一步探讨血浆白介素(IL)- 18水平在恶性肿瘤化疗前、后的相应变化及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),对82例恶性肿瘤患者在化疗前、后及76名正常人的血浆IL-18、IL—6水平进行测定。结果:恶性肿瘤患者血浆IL—18水平在化疗前与正常人无明显差异(P>0.05),化疗后则明显低于正常人及自身化疗前(P<0.001),血浆IL—18水平是减低的,化疗后的2周内最低。化疗前血浆IL—6水平高于正常人(P<0.001)。结论:恶性肿瘤患者化疗后血浆IL—18水平明显降低,其细胞免疫功能是低下的。若适时的给恶性肿瘤患者补充IL—18,对于恶性肿瘤的治疗可能是有重要临床意义的。

四种北柴胡提取物在小鼠体内外的免疫效应

研究了四种北柴胡提取物对小鼠体内外免疫功能的影响。结果：柴胡水溶部分及药渣水煎剂对小鼠Ｔ、Ｂ淋巴细胞均有刺激增生作用，４０％醇提物能促进Ｂ淋巴细胞的增殖，正丁醇提物则对Ｔ淋巴细胞增殖有增强效应。四种提取物均能增强巨噬细胞吞噬功能，但对抗体形成细胞无明显影响。研究还发现药渣水煎剂能刺激活化的Ｔ淋巴细胞分泌白细胞介素－２（ＩＬ－２），该结果可能是柴胡促进细胞免疫、抗肿瘤效应的机理之一。

锰对人外周血淋巴细胞微核率和姊妹染色单体交换频率的影响

目的 探讨锰对正常人外周血淋巴细胞微核率和姊妹染色单体交换（SCE）频率的影响。方法 用不同浓度的硫酸锰溶液（培养液中锰浓度:0.05、0.15、0.25、0.75、1.50μg/ml）处理体外培养的人外周血淋巴细胞,观察其微核率和SCE频率的变化,同时以生理盐水为对照。结果 锰剂量≤0.25μg/ml时,实验组与对照组相比,其微核率和SCE频率变化均不显著（P>0.05）;锰剂量≥0.75μg/ml时,微核率和SCE频率均显著高于对照组（P<0.01）,且呈剂量-反应关系。结论0.25μg/ml以下低剂量锰对细胞遗传物质是比较安全的,而0.75μg/ml以上高剂量锰可造成不同类型DNA损伤。

中药复合多糖的免疫调变作用

将中药黄芪、黄精、银耳、枸杞子、香菇、猪苓分别提取多糖成分,配成复合多糖注射液。给DBA小鼠连续注射7d,与同条件注射盐水的对照组相比;另给注射环磷酰胺所致免疫低下的小鼠加用中药复合多糖,与同条件只注射环磷酰胺的小鼠相比,观察中药复合多糖对小鼠免疫器官、腹腔巨噬细胞吞噬作用及免疫细胞产生白细胞介素—1与白细胞介素—2(IL—1、IL—2)的影响。结果表明,中药复合多糖能增强机体免疫机能,具有较好的免疫调变作用。

C型利钠肽及其受体的结构和功能

C型利钠肽（c-type natriuretic peptide,CNP）是利钠肽家族的一员,分子结构中也有一个由二硫键连接而成的含17个氨基酸的环状结构,CNP基因至少有两个外显子编码前CNP原,体内成熟的CNP以22和53肽的形式存在。CNP选择作用于受体NPR-B（natriuretic peptide receptorB）,也与心钠素、脑钠素一样作用于NPR-C（natriuretic pep-tide clearance receptor）。NPR-B为一次跨膜受体,其C末端有鸟甘酸环化酶活性,通过催化cGMP的产生来介导CNP的作用。CNP的合成和释放受多种细胞因子的调节,通过与NPR-C结合而内吞或直接被中性内肽酶水解两条途径降解。CNP及其受体广泛分布于血管、血液、中枢神经系统等组织细胞,起扩张血管、抗焦虑、调节细胞生长及内分泌等作用。

实验性鸭乙型肝炎病毒感染的干扰素反应

在实验性鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染的模型中,研究了用新城鸡瘟病毒(NDV)及双链RNA制剂(dsRNA)诱生白细胞及脾细胞的干扰素(IFN)反应。结果发现在樱桃谷鸭中,DHBV-DNA持续阳性鸭中,白细胞对dsRNA诱生IFN反应低下。在北京鸭DHBV-DNA持续阳性鸭中未能发现与对照组间的显著差别。在去党氏囊后感染DHBV的樱桃谷鸭中,发现其脾细胞及白细胞产生IFN效价均较未去法氏囊组为低,但仅脾细胞产生IFN低下有统计学显著意义。提出了用各种诱生剂检测IFN反应的重要性及测定肝内局部产生IFN的价值。

不同类型宫内节育器与细菌L型及子宫内膜感染的关系

1995年6月～1997年12月,对山东医科大学附属医院计划生育门诊选择的146例放置宫内节育器者,分为置器活性组32例(A组),惰性组56例(B组),正常对照组30例(C组),感染组28例(D组),观察不同类型宫内节育器对子宫内膜的感染情况。采取子宫内膜石蜡切片,经过革兰氏染色、HE、免疫组化、PCR等方法检查细菌及L型。A、B、C三组阳性结果均无明显差异(P>0.05),分别与D组比较,有明显差异(P<0.05),说明置不同类型宫内节育器并不增加子宫内膜感染。与微生物检查及培养结果基本一致。

MHCⅡ类抗原的异常表达与自身免疫病

七十年代初期,人们发现T 细胞和B 细胞之间的相互作用受MHCⅡ类抗原的限制。即T 细胞和B 细胞具有共同MHCⅡ类抗原时,才能发挥协同效应。同样,T 细胞与抗原提呈细胞之间的相互作用亦受到MHCⅡ类抗原的限制,这种遗传限制性对于免疫反应的诱发是至关重要的。近年来,免疫组织化学的大量研究表明,在自身免疫病靶器官的上皮细胞膜上,异常地表达MHCⅡ类抗原,其作用可能与自身抗原的提呈、触发自身免疫反应有关。一、MHCⅡ类抗原的组织分布在人类。

酗酒对机体免疫功能的影响

本文对灌饮白酒1个月的DBA/2小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬活性、脾淋巴细胞转化率、白细胞介素-1(IL-1)及白细胞介素-2(IL-2)活性进行了检测,观察酗酒对机体免疫功能的影响。研究结果,酗酒后小鼠腹腔巨噬细胞吞噬作用、淋巴细胞转化率、IL-1及IL-2活性均明显下降,表明酗酒可降低机体的免疫功能。

产超广谱β－内酰胺酶鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的：了解鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药性，以利合理使用抗生素。方法：采用琼脂稀释法对从临床标本分离的158株鲍曼不动杆菌做了ESBLs的检测及抗生素敏感性测定。结果共检出ESBLs阳性菌株78株，阳性率为49．4％。在18种受试抗生素中，对ESBLs阳性菌株耐药率<50．0％的仅有6种：依次为头孢哌酮／舒巴坦0％、亚胺培南2．6％、多粘菌素E3．8％、替卡西林／克拉维酸10．3％、哌拉西林／他唑巴坦16．3％、头孢哌酮43．6％。结论：鲍曼不动杆菌产ESBLs菌株比例很高：其多重耐药状况极其严重：对其感染的治疗，应以抗生素敏感性试验资料为依据，可选用碳青霉烯类、头孢哌酮／舒巴坦、多肽类及其他敏感的抗生素。