硝化菌群在不同条件下的增殖速率和硝化活性

研究了不同环境因子变化对硝化菌群的增殖能力及其对硝化作用活性的影响，确定了硝化菌群的最佳生长条件．研究发现，温度（θ／℃）、ｐＨ、供氧状况、无机碳源浓度等对于硝化细菌菌群的增殖能力及硝化作用活性具有较重要的影响，而含盐量高低几乎无影响．最适（θ、ｐＨ、［ρ（Ｏ２）］、［ρ（ＮａＨＣＯ３）］分别为３０℃、ｐＨ８．５、３．５ｍｇＬ－１、１ｇＬ－１，此时最大比生长速μｍ可达５．１８ｄ－１，最大比降解速υｍ可达４８．４３ｈ－１．在含氧量较低时，氨氮浓度的升高使硝化菌群的μ值下降，υ值上升．考察有机碳对该菌群的影响发现，ｍ（Ｃｏｒｇ）ｍ－１（Ｎ）在０～０．５之间时，菌群有较大的比生长速率。

碳酸钙促进丙酮酸发酵过程中α-酮戊二酸的形成

在多重维生素营养缺陷型菌株光滑球拟酵母CCTCCM2 0 2 0 19发酵生产丙酮酸的摇瓶和发酵罐实验中发现 ,CaCO3的添加对发酵液中α 酮戊二酸 (α KG)的积累有重要影响。在维生素浓度不变且供氧充分的前提下 ,延迟CaCO3添加时间可明显抑制α KG的产生 ,并提高丙酮酸与α KG的碳摩尔比 (CPYR Cα KG) ;而增加培养基中的CaCO3浓度会导致α KG积累的增加。用不同物质调节发酵液中pH的实验证实 :在丙酮酸发酵过程中 ,Ca2 + 对α KG的积累起主要作用 ,CO32 - 起辅助作用 ,两者对α KG的积累具有协同效应。维持培养基中CaCO3浓度不变 ,改变培养基中硫胺素的浓度 ,对α KG的积累 ,特别是对CPYR Cα KG值没有影响 ;而增加培养基中生物素的浓度 ,则导致α KG的浓度不断上升且CPYR Cα KG 值不断下降。当有Ca2 + 存在时 ,胞内丙酮酸羧化酶的活性最高可提高 4 0 % ,而丙酮酸脱氢酶系的活性没有明显变化。结果表明 ,丙酮酸发酵过程中α KG的形成是由于CaCO3促进了丙酮酸羧化反应 ,其中Ca2 + 可显著提高丙酮酸羧化酶的活性 ,而CO32 - 则有可能作为丙酮酸羧化反应的底物。

添加TCA循环中间产物加速光滑球拟酵母积累丙酮酸

在维生素限制的条件下 ,研究了添加TCA循环中间产物对光滑球拟酵母多重维生素营养缺陷型菌株CCTCCM2 0 2 0 19生长和积累丙酮酸的影响。该菌株能以TCA循环中间产物为唯一碳源进行生长 ,且在以葡萄糖、乙酸和TCA循环中间产物为复合碳源的平板上菌落数高于分别以葡萄糖和乙酸或TCA循环中间产物为唯一碳源时的菌落数。与其它TCA循环中间产物相比 ,草酰乙酸更能促进细胞的生长、提高丙酮酸产量和对葡萄糖的得率。草酰乙酸能够促进细胞生长 ,是因为T .glabrataCCTCCM2 0 2 0 19菌株能够利用乙酸作为乙酰辅酶A供体。在含有10 0g L葡萄糖和 6g L乙酸钠的培养基中再添加 10g L草酰乙酸进行分批发酵实验 ,可使菌体浓度从 11 8g L提高到 13 6g L ,增长幅度为 15 % ;丙酮酸对葡萄糖的得率 (0 6 6g g)以及生产强度 (1 19g·L- 1 ·h- 1 )分别高出 6 %和2 4 % ,使发酵结束时间提前 8～ 12h。

角质酶产生菌Thermobifida fusca WSH03-11诱变及高产突变株发酵条件优化

以Thermobi fidafusca WSH03-11为出发菌株,经硫酸二乙酯诱变,获得一株遗传稳定性好的高产角质酶的突变菌株(酶活由2.3U/mL提高为8.9U/mL)。确定了以乙酸钠为碳源,并在2.5L发酵罐中研究了不同pH值对突变株角质酶分批发酵的影响。根据不同pH值下发酵过程中细胞比生长速率及产物比生长速率的变化,确定了分阶段控制pH值的策略,即在发酵前20h控制pH值7.3、20h后控制pH值7.6,这种条件下角质酶活达到19.8U/mL,比采用单一pH值7.0、7.3、7.6、7.9下的最大值分别提高了125%,64%,37%,47%。

聚γ-谷氨酸生产菌地衣芽孢杆菌的He-Ne激光辐射效应

应用He Ne激光对聚γ 谷氨酸生产菌地衣芽孢杆菌BacilluslicheniformisATCC9945A进行辐射处理。研究了不同剂量激光辐射对菌体生长的影响 ,0 .48mw·cm-2 、15min的剂量利于菌体的诱变。 2种激光辐射方式中 ,“生理盐水菌悬液”辐射方式诱变效果较好。延滞期的菌体细胞对激光辐射最敏感 ,随着菌体培养进程 ,其激光辐射抗性逐渐增强。另外 ,发现菌体的芽孢对激光辐射不敏感。经聚γ 谷氨酸发酵试验和菌体扫描电镜观察 ,发现He Ne激光对地衣芽孢杆菌具有明显的生物刺激效应和诱变作用 ,并初步筛选到产聚γ 谷氨酸含量有较大变化的辐射变异菌株 ;同时 ,通过对变异菌株的细胞外、胞周间、细胞内三位区的PGA、RNA、DNA分析和发酵过程检测 ,进一步证实了He Ne激光对聚γ 谷氨酸生产菌地衣芽孢杆菌的诱变作用。

碳源和Mn^(2+)对地衣芽孢杆菌Bacillus lic heni for misWBL-3生产聚γ-谷氨酸的影响

The effects of carbon source and manganese ion on the production of γ -poly (glutamate) ( γ -PGA) was investigated.The results showed that the production of γ -PGA was different on varions carbon sources, and among those, citric acid and glycerol were much better than others.The production of γ -PGA was increased to 15.72?g·L -1 by using the citric acid and glycerol as a combined carbon source.It was also found that the production of γ -PGA could be regulated by control of manganese ion concentration in the medium.Without Mn 2+ ,there was no γ -PGA produced.The production of γ -PGA was increased by increasing Mn 2+ concentration, the optimal concentration of Mn 2+ was 39.0?mg·L -1 .The composition and morphology of γ -PGA were also affected by Mn 2+ .

赖氨酸发酵工业化研究——赖氨酸流加发酵中氮源浓度的选择及控制模式

以黄色短杆菌(Brevibacteriumflavum)WSHL1为产生菌,研究确定了2.5L罐赖氨酸流加发酵中氮源浓度的初始值及过程控制模式。首先分析了不同初始有机氮源浓度对赖氨酸流加发酵过程菌体生长、产物积累以及微生物稳定性的影响,并得到适宜的初始有机氮源浓度为20g/L;在流加糖液中添加10g/L的有机氮源使发酵产酸和产物对耗糖转化率分别达到109.0g/L和38.5%。在分析pH值反馈控制铵离子浓度时的发酵液硫酸铵浓度变化过程的基础上,提出了葡萄糖浓度反馈控制铵离子浓度的基质流加模式。对铵离子浓度采取复合反馈控制方式后,发酵64h,赖氨酸盐酸盐浓度和产物对葡萄糖的转化率分别达到119.0g/L和40.2%。

Streptococcus zooepidemicus H23生产透明质酸营养条件的优化

在发酵罐水平上研究了酵母粉用量、初糖浓度和碳氮比以及补加葡萄糖对Strepto coccuszoopeidemicusH2 3发酵生产透明质酸的影响。利用上述条件在 5L罐上进行发酵实验 ,16h时发酵液中透明质酸质量浓度为 4 83g/L。

辅酶Q_(10)产生菌的抗性筛选及发酵条件优化

以根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)WSHAT12为出发菌株,通过硫酸二乙酯诱变,获得遗传稳定性好的抗L-乙硫氨酸(Eth)突变株WSH-E01,通过进一步的诱变处理,获得L-乙硫氨酸和维生素K3(VK3)双抗性突变株WSH-V01,以双抗性突变株WSH-V01为出发菌株,再进行诱变处理,获得一株X-gal利用能力提高的突变株WSH-X01,与出发菌株WSHAT12相比,突变株WSH-X01的辅酶Q10产量提高幅度达50.6%,同时,对突变株WSH-E01的发酵条件进行优化。出发菌株WSHAT12、突变株WSH-E01、WSH-V01和WSH-X01在优化后的发酵条件下辅酶Q10产量分别达到23.1mg/L、26.8mg/L、29.5mg/L和34.8mg/L。