肠道病毒71型六安地区分离株VP1基因的生物信息学分析及B细胞表位预测

目的对肠道病毒71型(EV71)VP1基因编码衣壳蛋白进行系统结构与功能预测,为制备EV71疫苗和诊断抗原的研究提供理论基础。方法基于编号为1404-Luan(CHN)-08的EV71六安地区分离株VP1基因编码蛋白的氨基酸序列,应用ProtParam、SigalP、TMPRED、Sosui、SOPMA、Phyre、Bepipred等生物信息学方法预测其信号肽、跨膜区、疏水性、二级结构、三级结构等性质和潜在的B细胞表位。结果 EV71六安地区分离株VP1基因编码蛋白没有信号肽,无跨膜区,是一个亲水性蛋白;VP1蛋白二级结构以无规则卷曲和β-片层为主,含有少量的α-螺旋,少见β-转角;VP1的三级结构中4～121氨基酸部分在蛋白表面形成一环状结构(VPl GH loop);EV71 VP1潜在的B细胞表位共有6个可能的抗原表位。其中,预测分值最高的线性表位区域位于157～177位氨基酸残基。结论成功预测了EV71六安地区分离株VP1二级结构、三级结构和B细胞表位,为制备EV71基因工程疫苗和诊断抗原的开发提供了理论基础。

北疆棉花根际微生物对棉花立枯病拮抗作用的研究

从石河子地区棉花根际土壤中采集土样３６份，经室内分离、纯化后获得生长数量占优势的菌株各１０８个（细菌、放线菌、霉菌）共计３２４个，对棉花立枯病的病原菌进行平板双培养法拮抗测定，共筛选出１００个有拮抗活性的菌株，对之进行筛选、比较后，选出拮抗活性较强的９个菌株进行盆栽试验。

大鲵蛋白肽及其美拉德反应产物对体内血糖血脂、免疫功能及抗疲劳活性的影响

目的:探究大鲵蛋白肽(CGS)及其美拉德反应产物(CGSXyU)对Ⅱ型糖尿病小鼠降血糖血脂、免疫低下小鼠免疫调节功能及正常小鼠抗疲劳功能活性的影响。方法:将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(200 mg/kg盐酸二甲酸胍)、低剂量样品组(CGS/CGSXyU-L,50 mg/kg)和高剂量样品组(CGS/CGSXyU-H,200 mg/kg),使用100 mg/kg四氧嘧啶建模成功后,灌胃3周,测定小鼠空腹血糖浓度、血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(50 mg/kg左旋咪唑)、低剂量样品组(CGS/CGSXyU-L,50 mg/kg)和高剂量样品组(CGS/CGSXyU-H,200 mg/kg),使用100 mg/kg环磷酰胺建模成功后,灌胃3周,记录小鼠体重并测定免疫低下小鼠脏器指数变化以及细胞因子含量变化;将小鼠随机分为空白对照、阳性对照组(200 mg/kg牛磺酸)、低剂量样品组(CGS/CGSXyU-L,50 mg/kg)和高剂量样品组(CGS/CGSXyU-H,200 mg/kg),灌胃4周,测定小鼠负重游泳时间、尿素氮及肌酸激酶、血清乳酸含量及抗氧化酶活性。结果:CGS/CGSXyU-L/H处理组小鼠空腹血糖浓度、血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均有不同程度的降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平提高;CGSXyU-H可以显著(P<0.05)促进免疫低下小鼠体重、脏器指数升高以及免疫细胞因子(IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ)含量升高;CGS/CGSXyU-L/H处理组负重游泳时间升高,肌酸激酶活性、血清乳酸含量降低,CGS-H以及CGSXyU-L/H处理组尿素氮含量下降,CGSXyU-H处理组GSH-Px活性显著上升(P<0.05),CGS-H以及CGSXyU-L/H处理组SOD活性上升。结论:大鲵蛋白肽及其美拉德反应产物可调节Ⅱ型糖尿病小鼠血糖及血脂代谢,增强免疫低下小鼠免疫功能并有效提升正常小鼠的抗疲劳能力。

基因工程链激酶纯化工艺的研究

本实验建立了洗涤重组链激酶（ｒ－ＳＫ）包涵体的方法，利用离子交换层析纯化ｒ－ＳＫ。比活性１×１０５ＩＵ／ｍｇ，回收率４０％。用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验对所纯化的ｒ－ＳＫ进行了鉴别，等电聚焦电泳显示其等电点在５．５～６．０。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳呈单带，分子量４７Ｋｄ，扫描显示其纯度达９５％以上。

生物无机铁磁纳米粒子酶活性能研究

采用酶标分析仪,在H2O2存在的情况下,研究了原核生物趋磁细菌天然合成的磁性纳米颗粒——磁小体具有内在的类似于过氧化物酶的酶活性能。结果显示,随着缓冲液的pH值、反应温度和H2O2浓度的增加,磁小体的所有酶活性能皆呈"抛物线"型变化,满足酶学中关于酶催化反应性能的解释。由此得出磁小体催化反应的最适pH是4.0值,最佳温度是30℃,最佳H2O2浓度是0.28mol/L。随后,进一步考察了磁小体的酶活稳定性。结果显示在pH值从0.2～12.9变化的不同缓冲液浸泡2h之后的磁小体的类酶活性保持在60%以上;从4～97℃不同温度孵育磁小体2h,磁小体的类酶活性没有明显下降。所有结果表明处理之后的磁小体仍能保持优异的酶催化稳定性。

一次和重复大强度离心运动前后大鼠骨骼肌超微结构变化

目的：探讨一次和重复离心运动后大鼠骨骼肌超微结构的改变。方法：72只Wistar大鼠分为正常对照组、一次离心运动组和重复离心运动组。一次大强度运动组采用速度18m／min、坡度-16°的下坡跑运动，大鼠先运动30rain休息5min。再运动30min。重复运动在一次运动结束一周后进行（运动2次），观察一次和重复运动后即刻、24h、48h、72h和168h大鼠股四头肌超微结构变化。结果：一次运动后48h肌节损伤情况最严重，肌节紊乱甚至消失，Z线断裂。肌丝溶解，72h出现部分恢复。重复运动后24h，线粒体严重破坏，48h线粒体结构逐渐恢复，72h肌纤维已经重建，但线粒体数量、结构和功能尚未完全恢复。结论：重复运动较一次大强度离心运动促进肌纤维再生及骨骼肌重建．特别是运动后48～168h线粒体结构与数量恢复速度加快。可能促进了受损组织有氧代谢能力提高．有利于受损组织再生。

磁性药物靶向治疗中MRI检测磁流体体内分布的实验研究

目的 :利用MRI技术探讨在磁性药物靶向治疗中磁流体作为药物载体的体内靶向性。材料和方法 :取大鼠 6只 ,实验组和对照组各 3只。将对照组大鼠从股静脉注射磁流体 ,同时将实验组大鼠的右肾部位置于C型磁体中 ,从股静脉注射磁流体后持续置于磁体中 1小时 ,取出半小时后同对照组大鼠一同进行MR扫描 ,分别检测磁流体在各大鼠右肾部位的分布情况。结果 :从MRI图像中可以明显看出大鼠右肾部位的信号强度大大减小 ,有较高浓度的磁流体在右肾部位聚集。结论 :采用磁流体作为药物的载体 ,在外磁场作用下可实现靶向控制 ,提高药物在靶部位的聚集浓度。

人巨细胞病毒pp65 IgG-AI快速诊断试剂的临床应用

目的评价人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)pp65 IgG-亲和力指数(Avidity index,AI)快速诊断试剂的临床应用价值。方法以自制的截短pp65重组蛋白作为诊断试剂,对本室血清库中保存的标本,采用ELISA间接法检测其特异性IgG抗体,分析该试剂的灵敏度、特异性和准确度。检测临床收集的89份患者血清标本(其中5例被明确诊断为HCMV活动性感染)的pp65 IgG抗体,并与意大利DIESSE公司IgG检测试剂盒结果进行比较。同时,对pp65 IgG阳性标本,运用尿素变性ELISA间接法检测其AI值,与意大利DIESSE公司IgM检测试剂盒结果进行比较,评价AI检测在HCMV感染诊断中的价值。结果用pp65快速诊断试剂检测阳性、阴性血清特异性IgG抗体,均与原确认结果相同,灵敏度、准确度和特异性均达100%。两种诊断试剂IgG抗体检测结果,差异无显著意义。pp65诊断试剂对pp65 IgG阳性标本的AI值进行检测,AI<60%标本共41份,阳性率为46.07%,较参比试剂IgM检测阳性率(23.59%)高;5份明确诊断HCMV活动性感染的患者血清标本中,pp65诊断试剂与参比试剂检测IgG抗体,各有4份阳性,一致率为100%,pp65诊断试剂检测AI值为阳性的标本有3份,其中,参比试剂检测IgM为阳性的仅有1份。临床明确诊断为HCMV肺炎的患者血清标本,诊断试剂检测AI值为可疑阳性,但参比试剂检测HCMV IgM抗体为阴性。结论pp65 IgG-AI快速诊断试剂可初步诊断HCMV感染,简单快速,重复性好,具有良好的临床应用前景。

重复大强度运动对骨骼肌蛋白质组变异研究

目的:通过蛋白质组学研究手段分析重复大强度运动对骨骼肌损伤修复过程中蛋白质组表达情况,并从蛋白质组变异角度分析重复运动对骨骼肌损伤修复可能的作用机制;方法:72只Wistar大鼠随机分为正常对照组、一次离心运动组及一周后重复运动组。对照组不运动,其余组大鼠进行下坡跑,速度为18m/min,坡度-16°,运动时间为30min后休息5min,再运动30min。运动时间共60min。重复运动在一次运动后一周后进行。在运动后即刻、24h、48h、72h、168h取股四头肌进行蛋白质提取、双向电泳及特异蛋白质鉴定,并按照蛋白质功能对特异蛋白质进行分类;结果:重复运动后的修复过程中,能量代谢相关蛋白和细胞损伤修复相关蛋白表达在重复运动组中主要表现为下调为主,特别是在运动后0～72h之间。重复运动组中骨骼肌细胞结构蛋白0～24h内上调和下调数目无明显差异,在72h时,下调数目明显多于上调蛋白数目。损伤修复过程中表达变化的蛋白质中,能量代谢相关蛋白有异柠檬酸脱氢酶、磷酸葡萄糖变位酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶、血色素结合蛋白、丙酮酸脱氢酶、磷酸丙糖异构酶,细胞损伤修复相关蛋白有泛素羧基末端水解酶、免疫球蛋白λ轻链、胞内氯离子通道蛋白、蛋白磷酸酶2C蛋白、谷胱苷肽过氧化物酶、双功能过氧化物酶等表达活跃,骨骼肌细胞结构蛋白有热休克蛋白、内质网驻地蛋白、角蛋白、肌球蛋白、线粒体内膜蛋白等。结论:重复运动后能量代谢关键酶表达,加速损伤细胞能量供应,同时在24h-48h之间进行可以减缓骨骼肌收缩蛋白降解、清除自由基、加快细胞胞吞、减缓炎症反应从而加快骨骼肌损伤修复。

人巨细胞病毒感染与系统性红斑狼疮病情活动性的关联性研究

目的探索人巨细胞病毒(HCMV)感染与系统性红斑狼疮(SLE)病情活动之间的关系。方法采用病毒分离、聚合酶链式反应(PCR)检测HCMVUL54基因和间接免疫荧光试验(IFA)检测HCMVpp65抗原的方法,对49份SLE患者血白细胞标本进行HCMV分离鉴定,并结合临床资料分析HCMV感染与SLE病情活动的相关性。结果49份SLE患者血白细胞标本中,HCMV病毒分离后出现典型细胞病变的有3份,经PCR和IFA联合检测鉴定阳性的有12份,阳性率为24.5%;Logistic回归分析显示,SLE活动期患者的HCMV感染率为38.5%,显著高于SLE非活动期患者8.7%的HCMV感染率(OR=8.7,95%CI:1.4～53.3,P=0.019)。结论HCMV感染与SLE病情活动呈现显著正相关。

磁场定位磁纳米化bFGF治疗大鼠腓肠肌钝挫伤恢复效果研究

骨骼肌钝挫伤是影响运动员运动能力及运动寿命的一种常见疾病。在骨骼肌损伤修复过程中,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)骨骼肌肌原细胞有增殖作用,可以加快损伤肌肉修复。通过免疫化学偶联技术,制备重组bFGF包裹的磁性纳米粒,采用重物下落装置建立急性骨骼肌钝挫伤模型,在外加磁场的牵引下靶向聚焦至损伤部位。在损伤后第2、10、17、24和30天分别取样,测定和计算肌肉收缩力和应力松弛,并利用实时荧光定量PCR法测定大鼠腓肠肌MHC-Ⅱb mRNA的表达。结果发现,检测大鼠腓肠肌在受到钝挫伤后的第17天及第24天收缩力,磁纳米化bFGF组较bFGF组有显著性提高;在损伤后第2天,磁纳米化的bFGF即能使应力松弛恢复接近正常肌肉水平;与注射bFGF组相比,bFGF包裹磁性纳米粒对损伤肌肉收缩力的提高更明显。损伤后第2-10天,磁纳米化bFGF组与其余各组之间的MHC-Ⅱb mRNA表达差异有统计学意义。因此,磁纳米化的bFGF能明显改善大鼠急性骨骼肌钝挫伤后的收缩应力和恢复应力衰减,增强损伤肌肉MHC-Ⅱb mRNA的表达,更好地促进损伤肌肉修复。

人巨细胞病毒原发感染BALB/c小鼠大脑皮质模型的建立

目的建立人巨细胞病毒（HCMV）原发感染BALB／c小鼠大脑皮质的模型，为进一步研究其发病机制奠定实验基础。方法分别用2×10^6、2×10^5、2×10^4、2×10^3、2×10^2PFU／ml的HCMV AD189株腹腔注射6～8周SPF级BALB／c小鼠雌雄各6只作为实验组，同时设立灭活病毒对照组和细胞对照组。1个月后取各组小鼠大脑皮质组织进行病毒分离与鉴定、PCR和RT-PCR分别检测各标本中HCMVUL83基因及UL54的转录、HE染色。结果2×10^6、2×10^5PFU／ml实验组的雌性小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性；HE染色可见海马区出现了明显的病理变化。雄性小鼠、低剂量（2×10^4、2×10^3、2×10^2PFU／ml）实验组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性。结论HCMVAD169株腹腔注射6～8周龄SPF级雌性小鼠1个月可测出大脑皮质发生急性炎症反应，为HCMV所致的原发感染状态，且小鼠性别及病毒的接种量可能与感染发生存在密切关系。

3个啤酒大麦品种的染色体核型、带型分析

对３ 个啤酒大麦品种进行了染色体核型与 Ｃ带带型分析，阐明了三品种间细胞学上的异质性，并进一步指出三者间的亲缘关系和进化程度：克拉卡奇与匈８４６２ 亲缘关系较近，在进化上均属于较原始类型，莫特４４ 与前二者亲缘关系较远，属于相对较进化的类型。

利用碱性成纤维细胞生长因子包裹的磁性纳米粒对大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌肉收缩力与松弛特性恢复的影响研究

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)包裹的磁性纳米粒对大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌肉收缩力与松弛特性恢复的影响。方法:通过免疫化学偶联技术,制备重组bFGF包裹的磁性纳米粒。将雄性Wistar大鼠随机分为自然愈合组、生理盐水组、小牛血清白蛋白(BSA)包裹磁性纳米粒组、bFGF包裹磁性纳米粒组和bFGF直接注射组,采用重物下落装置建立大鼠急性骨骼肌钝挫伤模型,按上述分组方式分别于损伤部位皮下注射药物或不作处理,在外加磁场的牵引下靶向聚焦至损伤部位。在损伤后第2、10、17、24和30天分别取样,测定和计算肌肉收缩力和应力松弛。结果:磁纳米化的bFGF对大鼠腓肠肌钝挫伤后第17、24天的收缩力有明显提高作用;在损伤后第2天,磁纳米化的bFGF即能使应力松弛恢复接近正常肌肉水平;与bFGF直接注射组相比,bFGF包裹磁性纳米粒对损伤肌肉收缩力的提高更明显(P<0.05,第17天)。结论:磁纳米化的bFGF比直接注射bFGF能明显改善大鼠急性骨骼肌钝挫伤后肌肉收缩应力和恢复应力衰减。

新疆甜菜病毒病毒原类型的初步鉴定

１９９５～１９９８年从新疆甜菜主产区石河子、塔城、库尔勒、伊宁、奎屯等地采集病毒病样２２８个，初步归为４个类型，经寄主范围、病毒粒体形态观察、血清学试验、传播途径测定，初步确定这４个类型的病毒病样分属于黄瓜花叶病毒类群、马铃薯Ｙ病毒类群、真菌传杆状病毒类群、长线形病毒类群和甜菜黑色焦枯病害类群。

胎儿心率变异功率谱与胎儿宫内窘迫关系探讨

作者利用自行设计的胎儿心率变异检测分析系统采集的248例临床监护数据,研究胎儿心率变异(FHRV)功率谱的特征。对其中距分娩时间1周以内的150例数据(睡眠期52例和活跃期98例),以谱参数为特征变量,窘迫值为分类变量,建立判别函数,作判别统计分析。通过跟踪病历对结果作回顾性考核,其判别准确率分别达88.5%(睡眠期)和83.3%(活跃期),显示FHRV功率谱特征与胎儿宫内窘迫有密切的关系。

雀形目25种鸟羽的扫描电镜观察

以隶属于雀形目１０科１８属２５种鸟类的初级飞羽为材料进行扫描电镜观察。结果表明：有钩羽小枝上的腹齿数、纤毛对数、羽小钩数与无钩羽小枝上的腹齿数、背刺数在科间相似性较大，存在着性状特征的交叉与重叠；属种间差异较显著；种下亚种则未发现有显著差异。

补充磷脂对大鼠腓肠肌钝挫伤收缩力、松弛特性及自由基清除的影响

为了研究补充磷脂对大鼠腓肠肌钝挫伤恢复效果,采用重物下落装置建立急性骨骼肌钝挫伤模型,并于损伤后补充磷脂,检测补充磷脂对损伤肌肉的收缩力及松弛特性、自由基清除等的影响。结果发现,大鼠腓肠肌在受到钝挫伤后的第10天及第17天的收缩力,补充磷脂组收缩应力显著高于自然愈合组;损伤后第10天,补充磷脂能使应力松弛恢复接近正常肌肉水平,而自然愈合组仍显著性高于对照组;损伤后第2-10天,补充磷脂能显著提高腓肠肌超氧化物歧化酶活性,同时显著降低腓肠肌中丙二醛的含量。因此,补充磷脂能明显改善大鼠急性骨骼肌钝挫伤后的收缩力和恢复应力衰减,提高骨骼肌中超氧化物歧化酶活性,降低腓肠肌中丙二醛含量,更好地促进自由基的清除,促进损伤肌肉修复。