高效液相色谱-串联质谱法同时测定沙棘中的11种黄酮类物质

建立了同时测定沙棘种子和叶片中异鼠李素、槲皮素、山奈酚、表没食子儿茶素、芦丁、没食子儿茶素没食子酸酯、柚皮素、表儿茶素没食子酸酯、木犀草素、柚皮苷和表儿茶素11种黄酮类物质的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。色谱采用C18柱分离,流动相为0.1%甲酸溶液-甲醇,等度洗脱,流速0.2mL/min;质谱采用电喷雾电离、负离子(ESI-)扫描,以多反应监测(MRM)模式检测。11种黄酮类物质在各自的线性范围内具有良好的线性关系(r>0.99),回收率>90.9%,相对标准偏差在10%以内。对11份种质种子及3份种质叶片的检测结果表明,不同种质种子和种质叶片中的不同黄酮类化合物间存在明显差异,沙棘叶片检测出的10种黄酮总含量(169.676~215.818μg/g)明显高于种子中检测出的10种黄酮总含量(37.060~134.419μg/g);种子中含量较高的黄酮类化合物分别为表儿茶素没食子酸酯(13.802~103.318μg/g)、表没食子儿茶素(2.113~22.456μg/g)、芦丁(9.684~21.367μg/g)和槲皮素(4.152~10.133μg/g);叶片中含量较高的黄酮类化合物分别为芦丁(80.694~143.169μg/g)、表儿茶素没食子酸酯(15.301~92.029μg/g)、表儿茶素(19.180~56.712μg/g)、山奈酚(8.455~16.393μg/g)和表没食子儿茶素(6.995~15.539μg/g)。本方法简便快速、准确可靠,可作为一种高通量快速测定沙棘种子和叶片中黄酮类化合物的方法。

液相色谱-串联质谱法同时测定油茶不同组织中5类内源激素

本文以油茶枝条、嫩叶、花芽和种仁为材料,建立高效液相色谱-串联质谱法同时对油茶不同组织中内源激素生长素(IAA)、赤霉素A4(GA4)、玉米素(tZ)、脱落酸(ABA)、茉莉酸(JA)5类内源激素的测定方法。油茶不同组织经液氮研磨后用提取液(含75%甲醇、5%甲酸水溶液)提取,通过固相萃取柱(MCX)纯化,用甲醇洗脱得到IAA、ABA、JA、GA4;氨化甲醇洗脱得到tZ;合并洗脱液后,利用液相色谱-串联质谱在多反应检测(MRM)模式下进行定量分析。IAA、ABA、JA、GA4的最佳洗脱体积为2mL,tZ的最佳洗脱体积为3mL。测定5种激素线性相关系数R2>0.995;方法检出限为0.4~1.2ng/g,加标回收率范围在88%~101%之间,相对标准偏差为7.3%。应用该方法对油茶不同组织内源激素含量的测定结果表明,油茶的花芽和嫩叶的生长素水平较枝条和果实高,种子中茉莉酸含量最高为978.3ng/g,GA4/ABA比例为嫩叶>种仁>花芽>枝条,与油茶各部位生长速度一致。建立的方法适于对弱酸性和碱性激素进行快速纯化分析。