唾液乳杆菌L3生物合成纳米氧化锌的工艺研究

为获得晶体粒径为纳米级别且对致病菌有明显抑菌效果的纳米氧化锌产品,对乳酸菌生物合成纳米氧化锌的工艺条件进行探索。从断奶7～10 d健康仔猪的粪便中筛选出一株对高浓度锌离子具有耐受性菌株,并以此菌株为模板,氯化锌溶液为原料,分别研究了作用温度、作用时间、发酵后菌液的pH值、氯化锌原液的添加量四个因素对最终产品氧化锌的粒径、转化率及其对致病菌抑菌效果的影响。研究结果表明,当0.25M ZnCl2底物浓度、体系pH值为7.0,70℃水浴温度下作用25min时得到的氧化锌晶体粒径在70 nm左右,晶体形状均匀,且对大肠杆菌、沙门氏菌以及金黄色葡萄球菌等致病菌的抑菌效果较好,其最小抑菌浓度分别为0.024 mg/mL、0.029 mg/mL、0.016 mg/mL。将纳米氧化锌替代普通锌源添加在动物饲养中能有效改善猪仔生长性能。

发酵饲料对规模化猪场断奶仔猪生产性能的影响

研究了乳酸菌,嗜酸乳杆菌LH1F(Lactobacillus acidophilus strainLH1F),发酵饲料对规模化猪场断奶仔猪生产性能的影响。选用90头32日龄断奶长白仔猪,按体重相近随机分成3组,每组30头,分别为对照组Ⅰ饲喂基础饲粮、对照组Ⅱ饲喂湿拌料(40%过夜自来水+60%基础饲粮),和试验组(35%过夜自来水+60%基础饲粮+5%乳酸菌液体种子)。试验组饲料先进行约8 h的发酵,pH降至4.0左右,之后再饲喂仔猪,为期一个月。结果表明,对照组Ⅰ、对照组Ⅱ和试验组仔猪平均日增重分别为:0.36 kg、0.36 kg和0.41 kg,试验组比对照组Ⅰ和Ⅱ均高13.9%(P<0.01),差异极显著;料肉比分别为:1.84、1.99和1.55,同对照组Ⅰ和Ⅱ相比,试验组料肉比分别下降了21.7%(P<0.05)和13.9%(P<0.05),差异显著;腹泻率比对照组Ⅰ低50%,比对照组Ⅱ低75%;发酵试验组仔猪粪便中大肠杆菌数减少,乳酸菌数目大大增加,改善了仔猪肠道微生态平衡,降低了肉类制品被致病菌污染的风险,提高了肉类食品的屠宰前的安全性。另外,生产经济效益显著,试验组的头均毛利比对照组Ⅰ提高了25.8%,比对照组Ⅱ提高了41.6%。因此使用乳酸菌发酵饲料能明显改善断奶仔猪生长性能,提高饲料转化率,减少腹泻的发生,提高养殖效益。

鼠李糖乳杆菌半固态发酵法生产L-乳酸及发酵动力学分析

利用鼠李糖乳杆菌半固态发酵法生产L-乳酸,拟开发低成本饲料酸化剂。通过单因素实验、Plackett-Burman实验及响应面法对半固态发酵培养基进行了优化,并进行了发酵动力学分析。结果表明:优化后的发酵培养基最佳配比为:玉米粉18%、豆粕10.35%、麸皮4.5%、酵母粉0.53%、无水乙酸钠0.5%、K2HPO4·3H2O 0.3%、柠檬酸三铵0.3%、Mg SO40.058%、Mn SO40.025%、葡萄糖1.2%、初始水分含量70%(w/w),L-乳酸产量达到(120.82±1.60)g/kg(湿重),比优化前提高了56.16%;菌体最大比生长速率为(0.0951±0.001)h-1、L-乳酸最大比合成速率为(1.02±0.01)h-1、底物还原糖最大比消耗速率为(0.0855±0.009)h-1。利用鼠李糖乳杆菌半固态发酵法生产L-乳酸产量较高,可作为饲料酸化剂与灭活乳酸菌益生素相结合开发新型饲料添加剂。

益生菌群维持肠道健康分子机制的研究进展

益生菌对人和动物有益作用在过去已经得到大量的动物和人体试验实证,但对于其益生作用的分子机制的研究尚有待进一步完善.益生菌制剂的作用效果不稳定、不显著、不确定等问题依然存在.近年来大量针对益生菌及肠道细胞、益生菌对致病菌和益生菌对疾病的相互作用机制进行了研究,并取得了一些成果.因此,对以上三方面作用机制研究的进展进行了综述,对未来发展方向做了一些预测.图5,参27.

蜡样芽孢杆菌YSQ08与角质蛋白酶联合降解羽毛的研究

对蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶、酶菌联合降解羽毛3种方式进行比较,结果表明酶菌联合降解羽毛的效果更突出.深入研究蜡样芽孢杆菌YSQ08、角质蛋白酶添加顺序、菌培养时间以及酶添加时间对羽毛降解率的影响,结果显示采用菌+酶的方式能降解更多的羽毛,同时数据表明菌液在培养14h时产酶达到高峰,加入菌液后的24h再添加角质蛋白酶能保持其较高的活力.以pH值、羽毛添加量、酶添加量、菌液添加量、培养天数为试验因素,设计L16(45)正交试验,结果表明在pH9.0、羽毛添加量3.0%、酶添加量2000U/g、菌液添加量1.5%、培养时间为96h条件下,发酵结果最优,此时氨基酸含量为223.26mg/L,降解率为81.76%.菌+酶降解羽毛的方式为工业化处理羽毛废弃物提供新的思路.

婴儿粪便中乳酸菌的分离鉴定及其对小鼠腹泻的治疗作用

从健康婴儿新鲜粪便中分离纯化出6株产酸能力强的革兰氏阳性菌,并对其进行了体外抑菌试验研究。筛选出对致腹泻性大肠杆菌(O78、O88、O149)均具有良好抑制作用的3个菌株,经过生理生化试验以及16S rRNA分析的鉴定,表明3株均为干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)。然后,挑选一株对致病性大肠杆菌抑菌性最强的菌株进行小鼠和鸡的攻毒试验,其结果表明该菌株安全无毒,且能适当提高动物的料肉比,起到一定的预防和治疗腹泻的作用。

饮水添加灭活乳酸菌微生态制剂对胡须蛋种鸡生产性能的影响

本试验旨在探讨在饮水中添加液态灭活乳酸菌微生态制剂对胡须蛋种鸡产蛋期健康状况、生产性能的影响。本试验选择155日龄开产初期的惠州金种胡须蛋种鸡,根据鸡舍方位、内外部环境以及母鸡状况等因素几乎相近的原则,进行对比试验。试验组的鸡群日常饮水按照500 g/t(每吨水添加试验品500 g)添加试验产品,设立空白对照组,试验期30 d。结果表明,在饮水中添加灭活乳酸菌制剂能够促进开产初期蛋鸡的生产性能、改善机体健康,综合三个重复的实验数据可以看出,鸡群产蛋率提高3.14%、合格蛋率提高2.11%,死淘率降低0.05%;经济效益方面的直接年只利提升达2.76元。所以,液态灭活乳酸菌微生态制剂在提升蛋鸡生产性能,改善机体代谢,以及增加经济效益等方面都有明显的效果。

饲料酸化剂的现状与发展趋势

饲料酸化剂又称为酸制剂，是一类主要由一种或者以上的酸和酸盐组成的，用于降低畜禽日粮系酸力和胃肠道pH值的物质。酸化剂的发现和在饲料及畜牧业的应用已有将近50年的历史。现代养猪普遍采用早期断奶（3—5周龄），但是由于早期断奶仔猪具有抗病力低、

乳猪料中添加灭活乳酸菌对早期断奶仔猪生长性能的影响

本试验旨在探讨在乳猪料中添加灭活乳酸菌对早期断奶仔猪生长性能的影响。本试验选择550头杜×(长×大)三元杂交系23-25日龄早期断奶仔猪54窝,根据母猪胎次、公母比例、仔猪分娩日龄、窝产仔数、断奶日龄、断奶窝重、仔猪个体重及母猪泌乳能力近似的原则,随机分成试验I组、试验II组和对照组,其中试验I组和试验II组分别在乳猪料对照组基础上添加1 kg/t和2 kg/t的灭活乳酸菌,试验为期10天。结果表明,在乳猪料中添加灭活乳酸菌可显著降低早期断奶仔猪腹泻比率,试验I、II组分别比对照组腹泻比率降低75.27%和77.29%,差异极显著(P<0.01);添加1 kg/t组,无论在各项生长指标方面,还是在综合经济效益方面都有明显的改善。

包膜肠溶性氧化锌对断奶仔猪生长性能的影响

本试验主要研究包膜肠溶性氧化锌在低剂量添加情况下对断奶仔猪生长及健康水平的影响。选体态相近,健康状况良好的28日龄断奶三元杂交(杜×长×大)仔猪396头,按照体重相近、遗传相近的原则,完全随机分为4组,每组4个重复,平均每个重复24头猪。分别在玉米-豆粕型基础日粮中添加0.05%、0.10%、0.15%包膜肠溶性氧化锌和0.25%氧化锌的玉米-豆粕型基础日粮,试验期为14d。结果表明,添加包膜肠溶性锌的断奶仔猪,其生长性能优于添加氧化锌组,而且仔猪的生长性能随着包膜肠溶性氧化锌添加量的增加而提高。但是在低剂量添加时(0.05%和0.10%)出现少量腹泻情况。因此,为了获得更好、更稳定的使用效果,我们建议包膜肠溶性氧化锌的添加量为0.2%。

唾液乳杆菌富锌工艺优化

对猪源唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius L3)的富锌情况进行研究,结果表明,唾液乳杆菌L3吸附的锌离子主要附着于细胞壁的多糖层。其最优富锌工艺为:ZnSO_4浓度为2.5 mg/mL(菌体接种量为5%v/v),培养20h至稳定期,继续加入ZnSO_4,使培养基中ZnSO_4总浓度达到2.7 mg/mL,pH值为7.0,吸附2.5h,唾液乳杆菌L3对锌离子的最大吸附量为1183.47μg·g。

CCK39／UreB双基因融合表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

本研究报道了猪源性胆囊收缩素39肽(Cholecystokinin 39,CCK39)和猪肠道大肠菌群脲酶B亚基(Urease B,UreB)融合的原核表达载体的构建,以及兼有CCK39和UreB功能活性域的融合蛋白的表达。利用RT-PCR从猪十二指肠总RNA中克隆CCK39,再通过PCR从猪肠道产脲酶大肠菌群质粒中克隆UreB,之后将扩增所得的两基因先后定向插入原核表达载体pET43a(+)中,构建双基因融合表达载体pET43a(+)/CCK39/UreB,并转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL-21(DE3)中。重组质粒pET43a(+)/CCK39/UreB经PCR、双酶切鉴定和序列分析,证实已成功构建双基因融合表达载体。重组表达菌经isopropylthio-β-D-galactoside(IPTG)诱导表达了分子量约为80kD的融合蛋白,与预期分子量相同,主要以可溶蛋白的形式存在于细胞质中;用Ni2+-NTA对可溶蛋白进行亲和纯化,纯度大于95%;Western blotting分析结果显示重组融合蛋白可分别为CCK8和UreB抗血清识别,具有良好的反应原性。本研究所表达的融合蛋白为研制抗CCK/Urease双效疫苗奠定了基础。

谢氏丙酸杆菌与不同乳杆菌混合培养

为了开发多菌微生态制剂,可通过混合发酵加以实现。该方法不但一次发酵得2种或以上益生菌细胞,又能获得对致病菌有抑杀作用的代谢产物,从而大大降低发酵成本。以谢氏丙酸菌与不同乳杆菌进行混合发酵,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,通过牛津杯法筛选,高效液相法测定其有机酸含量。得到:谢氏丙酸菌与鼠李糖乳杆菌6003混合培养抑菌效果最佳,乳酸、丙酸产量分别达到17.65、28.55 g/kg(湿重);对2种指示菌的抑菌圈直径分别为17.63、19.39 mm;之后结合单因素实验和响应面法优化,获得最佳培养条件:葡萄糖0.21 mol/L,复配氮源添加量2.17%,初始p H6.72,K2HPO4·H2O添加量为0.52×10-3 mol/L,MnSO4·H2O添加量为0.59×10-5 mol/L,优化后混合培养液对2种指示菌平均抑菌直径分别为18.49、22.63 mm,比优化前提高4.93%、16.72%。乳酸、丙酸产量为43.03、16.92 g/kg(湿重)。因此,谢氏丙酸菌与鼠李糖乳杆菌6003混合培养能提高产物抑菌效果,是一种值得开发的生产微生态制剂的新方法。