mir-34a/sirt1在肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠中的表达

目的:研究mir-34a/sirt1在肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠中的表达。方法:选用72只雄性SD大鼠,采用随机数表法将其分为对照组(12只)、模型组(12只)、mir-34a激动剂(agomir)组(12只)、mir-34a agomir阴性对照组(12只)、mir-34a抑制剂(antagomir)组(12只)及mir-34a antagomir阴性对照组(12只)。向大鼠气管内接种肺炎克雷伯菌建立重症肺炎模型,药物处理中经尾静脉分别注射mir-34a agomir、mir-34a agomir阴性对照、mir-34a antagomir、mir-34a antagomir阴性对照组(5 ml/kg),对照组和模型组经尾静脉注射等量生理盐水,持续5 d。结束后处死大鼠,测定腹水量,肺组织干、湿质量,计算湿重与干重比值(W/D);采用苏木精-伊红(HE)染色法检测各组大鼠肺病理损伤情况并进行Holfbauer评分;以全自动血气分析检测仪检测大鼠腹主动脉血中氧分压(PaO_(2))、二氧化碳分压(PaCO_(2))、氧合指数(OI)=PaO_(2)/FiO_(2);采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测大鼠肺组织中mir-34a、sirt1 mRNA水平;免疫印迹(WB)、免疫组织化学法检测sirt1蛋白表达。结果:模型组与对照组相比,大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO_(2)、mir-34a水平升高,PaO_(2)、OI、sirt1蛋白表达降低(t=20.811,t=5.772,t=15.923,t=14.187,t=10.542,t=16.577,t=14.762,t=8.845;P<0.05)。与模型组比较,mir-34a agomir组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO_(2)及mir-34a水平升高,PaO_(2)、OI及sirt1蛋白表达降低(t=15.538,t=6.637,t=16.297,t=15.702,t=12.930,t=10.052,t=17.762,t=12.571;P<0.05);mir-34a antagomir组大鼠腹水量、W/D、Holfbauer评分、PaCO_(2)及mir-34a水平降低,PaO_(2)、OI及sirt1蛋白表达升高(t=15.932,t=4.863,t=12.865,t=14.146,t=9.916,t=13.793,t=14.261,t=8.969;P<0.05);mir-34a agomir阴性对照组大鼠和mir-34a antagomir阴性对照组大鼠各指标无明显变化。结论:mir-34a在肺炎克雷伯菌所致重症肺炎大鼠中的表达上调,sirt1表达降低,并可影响大鼠肺功能。