lncRNA GATA3-AS1靶向miR-515-5p对儿童急性淋巴细胞白血病细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lnc RNA)GATA3反义RNA1(GATA3-AS1)靶向mi R-515-5p对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞增殖和凋亡的影响。方法:RT-q PCR检测对照者和ALL患儿血浆中GATA3-AS1和mi R-515-5p的表达水平。将人ALL细胞Jurkat分为si-GATA3-AS1、si-NC、mi R-NC、mi R-515-5p、si-GATA3-AS1+anti-mi R-NC和si-GATA3-AS1+anti-mi R-515-5p共6组。CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,双荧光素酶报告实验用于确定GATA3-AS1和mi R-515-5p的靶向关系。结果:ALL患儿血浆中GATA3-AS1表达水平显著高于对照者(P<0.001),mi R-515-5p表达水平显著低于对照者(P<0.001)。与si-NC组比较,si-GATA3-AS1组细胞抑制率、凋亡率、mi R-515-5p表达水平显著升高(P<0.001)。与mi R-NC组比较,mi R-515-5p组细胞抑制率、凋亡率显著升高(P<0.001)。GATA3-AS1与mi R-515-5p直接特异性结合。与si-GATA3-AS1+anti-mi R-NC组比较,si-GATA3-AS1+anti-mi R-515-5p组细胞抑制率、凋亡率显著降低(P<0.001)。结论:下调GATA3-AS1可通过靶向上调mi R-515-5p的表达抑制儿童ALL细胞增殖,并诱导细胞凋亡。

闭塞性细支气管炎患儿血清LDH、SAA水平与病情严重程度及预后的关系

目的探讨闭塞性细支气管炎(BO)患儿血清乳酸脱氢酶(LDH)、淀粉样蛋白A(SAA)水平与病情严重程度及预后的关系。方法选取2020年5月至2023年5月本院收治的150例BO患儿作为观察组,根据患儿病情分为轻度组45例,中度组67例,重度组38例,另外选取150例同时期本院体检的健康儿童作为健康对照组。BO患儿经过治疗,根据治疗预后情况分为预后良好组(98例)和预后不良组(52例)。比较各组血清LDH、SAA水平;Pearson相关性分析血清LDH、SAA水平与肺功能指标每公斤体重潮气量(VT/kg)、达峰容积比(VPEF/VE)、达峰时间比(TPTEF/TE)的相关性;ROC曲线分析血清LDH、SAA对BO患儿预后不良的预测价值。结果与健康对照组相比,观察组血清LDH、SAA水平显著升高(P<0.05);轻度、中度、重度组BO患儿血清LDH、SAA水平及VT/kg、VPEF/VE、TPTEF/TE指标比较差异有统计学意义(P<0.05);与轻度组相比,中度组与重度组BO患儿血清LDH、SAA水平显著升高,VT/kg、VPEF/VE、TPTEF/TE指标显著降低(P<0.05);与中度组比较,重度组血清LDH、SAA水平显著升高,VT/kg、VPEF/VE、TPTEF/TE指标显著降低(P<0.05);BO患儿血清LDH、SAA水平与肺功能指标VT、VPEF/VE、TPTEF/TE呈负相关(P<0.001);与治疗前相比,治疗后血清LDH、SAA水平显著降低(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组血清LDH、SAA水平显著升高(P<0.05);ROC曲线分析显示血清LDH、SAA单独及二者联合预测BO患儿预后不良的AUC分别为0.869、0.782、0.931,而且二者联合的AUC要比单独预测的AUC高(Z=1.746,P=0.040;Z=3.434,P=0.001)。结论BO患儿血清LDH、SAA水平升高,与病情严重程度及预后有关,可能成为病情评估与预后判断的标志物。

儿科急诊惊厥病因分析和儿科急诊危重患儿状况的调查及分析

目的探讨儿科急诊惊厥病因并了解儿科急诊危重患儿状况。方法选取2017年9月至2019年9月本院接收的296例儿科急诊惊厥病患儿作为研究对象,通过分析其病因了解儿科急诊危重患儿状况。结果本次接收的296例儿科急诊惊厥病患儿中病因以热性惊厥、癫痫、颅内感染最常见,惊厥病容易使新生儿出现颅内出血的情况。>3~6岁儿童期惊厥病仍以热性惊厥为主,>6岁儿童期惊厥病因则以癫痫为主。结论儿童急诊危重患儿必须尽早接受治疗,并且在治疗的过程中医生要尽快判断病因,给予有效地治疗,控制病情。

茵陈素调控HIF-1α/BNIP3通路对高胆红素血症新生大鼠模型神经损伤的保护作用

目的探讨茵陈素调控HIF-1α/BNIP3通路对高胆红素血症新生大鼠模型神经损伤的保护作用,以期探索新生儿高胆红素血症的治疗机制。方法通过腹腔注射胆红素建立高胆红素血症新生大鼠模型,随机分为模型组、茵陈素组、BAY87-2243[缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂]组、茵陈素+BAY87-2243组,每组12只,另取12只SD新生大鼠腹腔注射等量生理盐水,设为对照组。分组处理后,用横木行走测试检测大鼠运动协调及整合能力,检测大鼠小脑神经元凋亡情况、血清中枢神经特异性蛋白(S100β)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平、小脑组织凋亡蛋白(caspase-3、Bax)及自噬蛋白(Beclin-1、LC3B)、HIF-1α/BCL2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)通路蛋白(HIF-1α、BNIP3)的表达水平。结果各组大鼠小脑神经元凋亡率及caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3B、HIF-1α及BNIP3蛋白表达水平差异均有统计学意义(F值分别为101.447、76.904、94.253、113.717、112.062、109.716、128.531,P<0.05)。两两比较显示,模型组大鼠小脑神经元凋亡率及caspase-3、Bax、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白表达水平均高于对照组;茵陈素组大鼠小脑神经元凋亡率及caspase-3、Bax蛋白表达水平均分别低于模型组、茵陈素+BAY87-2243组,Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白表达水平分别高于模型组、茵陈素+BAY87-2243组;BAY87-2243组小脑神经元凋亡率及caspase-3、Bax蛋白表达水平均分别高于模型组、茵陈素+BAY87-2243组,大鼠Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白表达水平均分别低于模型组、茵陈素+BAY87-2243组,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论茵陈素可激活HIF-1α/BNIP3通路,促进自噬作用,抑制胆红素诱导的新生大鼠小脑神经元凋亡。

表没食子儿茶素没食子酸酯抑制MAPK/NF-κB通路减轻脂多糖诱导的RAW 264.7细胞炎症反应

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)调控丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB(MAPK/NF-κB)信号通路对脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症反应的影响。方法取对数生长期的RAW264.7细胞,随机分为对照组、LPS(1μg/mL)组、LPS+EGCG-L(12.5μmol/L)组、LPS+EGCG-M(25μmol/L)组、LPS+EGCG-H(50μmol/L)组、LPS+DEX(阳性对照,0.5μg/mL)组、LPS+EGCG-H+Anisomycin(300 ng/mL MAPK/NF-κB通路激活剂Anisomycin)组,细胞在添加对应的药物处理1 h后,再加入100μL 1μg/mL LPS,培养24h后,进行后续相关实验。利用倒置显微镜观察各组细胞的形态特征;MTT法检测各组细胞的存活率;Griess法检测各组细胞上清中一氧化氮(NO)含量;ELISA法检测各组细胞上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)的表达;Western blotting检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧化酶-2(COX-2)蛋白及MAPK/NF-κB通路相关蛋白的表达。结果各组细胞的存活率均大于92%;与对照组比较,LPS组RAW264.7细胞形态呈梭形,细胞中iNOS、COX-2、p-p38、p-IκBα、p-NF-κB蛋白及上清中NO含量、TNF-α、IL-6、IL-1β表达显著升高,IL-10表达显著降低(P<0.05);与LPS组比较,LPS+EGCG-L组、LPS+EGCG-M组、LPS+EGCG-H组、LPS+DEX组对应指标变化与上述相反,且EGCG浓度越高,趋势越明显(P<0.05);Anisomycin可逆转高剂量EGCG对LPS诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用。结论EGCG可抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞炎症反应,该机制与抑制MAPK/NF-κB信号通路有关。

Circ_0038467靶向miR-182调控肺炎链球菌(Sp)诱导的人肺泡上皮细胞系HPAEpiC损伤

目的探讨环状RNA 0038467(circ_0038467)靶向miR-182对肺炎链球菌(Sp)诱导的肺泡上皮细胞系HPAEpiC凋亡和内质网应激的影响。方法将HPAEpiC细胞分为对照(NC)组(未做任何处理)、Sp组(Sp感染)、Sp+si-NC组(转染si-NC后Sp感染)、Sp+si-circ_0038467组(转染si-circ_0038467后Sp感染)、Sp+miR-NC组(转染miR-NC后Sp感染)、Sp+miR-182组(转染miR-182 mimics后Sp感染)、Sp+si-circ_0038467+anti-miR-NC组(转染si-circ_0038467和anti-miR-NC后Sp感染)、Sp+si-circ_0038467+anti-miR-182组(转染si-circ_0038467和anti-miR-182后Sp感染)。实时定量PCR检测细胞中circ_0038467和miR-182表达量;流式细胞测量术检测细胞凋亡率;蛋白印迹法检测B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、重链结合蛋白(BIP)、Bcl相关X蛋白(Bax)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)和裂解的caspase-3(cleaved-caspase-3)蛋白表达量。结果Sp感染后HPAEpiC细胞凋亡率、circ_0038467、Bax、caspase-3、cleaved-caspase-3、BIP和CHOP表达显著升高(P<0.05),而Bcl-2表达显著降低(P<0.05)。抑制circ_0038467或过表达miR-182后Sp诱导的HPAEpiC凋亡率、circ_0038467、Bax、caspase-3、cleaved-caspase-3、BIP和CHOP表达显著降低(P<0.05),而Bcl-2表达显著升高(P<0.05)。抑制miR-182表达能够减弱circ_0038467抑制对Sp诱导的HPAEpiC凋亡以及内质网应激的影响(P<0.05)。结论抑制circ_0038467可减弱Sp诱导的肺泡上皮细胞凋亡和内质网应激,其机制与靶向调控miR-182表达有关。

circ_0030018靶向miR-1298抑制急性淋巴细胞白血病细胞KOCL44增殖和诱导其凋亡的实验研究

目的:探讨环状RNA 0030018(circ0030018)靶向miR-1298对急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞KOCL44增殖、凋亡的影响。方法:实时定量PCR(RT-qPCR)检测circ0030018和miR-1298在ALL患者和健康志愿者骨髓组织中的表达。将KOCL44细胞分为si-circ0030018组(转染si-circ0030018)、si-NC组(转染si-NC)、miR-1298组(转染miR-1298模拟物)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-circ0030018+anti-miR-NC组(转染si-circ0030018和anti-miR-NC)、si-circ0030018+anti-miR-1298组(转染si-circ0030018和anti-miR-1298)。通过细胞计数试剂盒(CCK-8)、集落形成、流式细胞术检测circ0030018和miR-1298表达对KOCL44细胞活力、克隆形成能力和凋亡的影响。蛋白质印迹法(western blotting)检测裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)和cleaved-caspase9表达。运用双荧光素酶报告实验和RT-qPCR分析circ0030018和miR-1298靶向关系。结果:与健康志愿者比较,ALL患者骨髓单个核细胞中circ0030018表达量显著升高(P<0.05),miR-1298表达量显著降低(P<0.05)。干扰circ0030018显著降低KOCL44细胞活力、克隆形成数(P<0.05),增加凋亡率以及cleaved-caspase-3、cleaved-caspase9蛋白表达量(P<0.05)。过表达miR-1298显著降低KOCL44细胞活力、克隆形成数(P<0.05),增加凋亡率以及cleaved-caspase-3、cleaved-caspase9蛋白表达量(P<0.05)。miR-1298与circ0030018存在互补位点,干扰circ0030018显著增加miR-1298的表达量(P<0.05)。抑制miR-1298表达能够减弱干扰circ0030018对KOCL44细胞增殖和凋亡的影响(P<0.05)。结论:干扰circ0030018通过靶向上调miR-1298表达能够抑制ALL细胞KOCL44增殖,诱导细胞凋亡。

血清sTREM-1、PTX3联合脑电双频指数在脓毒症相关性脑病早期诊断中的应用价值

目的 对脓毒症相关性脑病(SAE)患者血清可溶性髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)、正五聚蛋白-3(PTX3)水平以及脑电双频指数(BIS)进行测定,并探讨三者在SAE早期诊断中的应用价值。方法 回顾性选取2020年6月至2022年6月成都市妇女儿童中心医院收治的120例脓毒症患者为研究对象。根据是否发生SAE,将患者分为SAE组(n=50)与非SAE组(n=70),根据格拉斯哥昏迷评分(GCS)将50例SAE患者分为轻度组(25例)、中度组(16例)与重度组(9例)。检测患者血清sTREM-1、PTX3及降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,测定BIS,计算序贯性器官衰竭(SOFA)、急性生理学及慢性健康状况Ⅱ(APACHEⅡ)评分。分析血清sTREM-1、PTX3水平及BIS对SAE的诊断价值和影响SAE发生的因素。结果 SAE组血清sTREM-1、PTX3、PCT、CRP、TNF-α水平及SOFA评分、APACHEⅡ评分高于非SAE组,BIS水平低于非SAE组(P<0.05)。SAE组中,依轻度组、中度组、重度组之序,血清sTREM-1、PTX3水平递升,BIS水平递降(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清sTREM-1、PTX3水平及BIS辅助早期诊断SAE的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.829、0.821,三者联合诊断的AUC为0.921,优于各自单独检测(Z=2.652、2.154、2.251,P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,APACHEⅡ评分、SOFA评分、sTREM-1、PTX3升高是脓毒症患者发生SAE的危险因素,BIS升高为保护因素(P<0.05)。结论 SAE患者血清sTREM-1、PTX3水平升高,BIS降低,并与SAE患者病情的严重程度密切相关,且三者联合检测对SAE患者的早期诊断有一定价值。