精液参数分布在实验室质量控制中的应用

目的 通过分析实验室的精液参数分布,为监测实验室精液分析准确性提供新的质量控制评估方法。方法 回顾性分析2018年—2020年广东省生殖医院人类精子库捐精志愿者的精液分析结果,统计精液量、精子浓度、精子活力及精子正常形态率等精液参数的百分位数,并与《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)(以下简称WHO 5^(th))公布的源自性伴侣在停止使用避孕措施后12个月内怀孕的男性的精液参数值分布进行比较分析。结果 共纳入4 761例捐精志愿者,年龄22~45岁,中位年龄25岁;精液量和前向运动精子百分率的各个百分位数与WHO 5^(th)分布比较一致,说明本实验室精液量和前向运动精子百分率分析结果的准确度较高;精子浓度和精子正常形态率的各个百分位数与WHO 5^(th)相比较,在第75个百分位数之后一致性较差,说明本实验室在精子浓度或精子正常形态率较高时,精子浓度及精子正常形态率的分析结果存在较大偏差,需要进一步改进。结论 精液参数分布能在一定程度上监测实验室内精液分析的准确性,并通过分析数据的准确性来寻找问题的根源并进行改进。

子宫内膜乳酸杆菌主导的微生物群与生殖的关系

近年来,越来越多的研究关注了女性子宫内膜微生物群与生育的关联。一旦子宫内膜微生物菌群微生态失调,就会引起一系列子宫内膜病变,从而破坏子宫内膜容受性,影响胚胎植入,导致胚胎着床或移植种植失败。其中,最引发关注的是宫内膜乳酸杆菌主导的微生物群对生殖结局的积极意义,虽然子宫内膜微生物群与生殖结局的关系尚未达成共识,但多数研究认可乳酸杆菌主导的微生物群对生殖的积极影响。笔者检索近年来相关文献,为乳酸杆菌主导的微生物群与生殖结局的关系作一综述。

广东地区不育男性精液质量与细菌感染关系的研究

目的研究不育男性精液质量与细菌感染之间的相关性,为指导不育男性人群的生殖健康提供临床依据。方法采集不育男性精液200例作为研究对象,然后进行分离培养48 h,根据培养结果,分为无致病菌生长组、有致病菌生长组、无菌生长组,完成有致病菌生长组细菌耐药性分析,并进行各组间精液质量比较。结果分离培养48 h后,200例精液中无致病菌生长163例,占比81.5%,有致病菌生长33例,占比16.5%,无菌生长4例,占比2.0%;33例有致病菌培养结果前三位依次为大肠埃希菌、无乳链球菌和粪肠球菌,耐药率分别为80.0%、87.5%、100.0%。结论不育男性精液中细菌培养检出率较高,且致病细菌会对精液质量产生影响。

广东地区男科实验室的现状分析

目的调查了解广东地区男科实验室的现状及精液分析质量控制状况。方法对广东地区精液分析外部质控的41家实验室开展问卷调查,调查内容包括男科实验室现况、人员资质、培训以及实验室操作标准操作程序(SOP)执行情况、不育检测项目情况、精液分析相关仪器以及方法、质量控制体系的建立及执行情况等。结果 97.6%设有专门的男科实验室开展精液常规分析、精子形态学分析以及精子存活率检测。92.7%具备开展WHO 5th精液分析能力。95.1%建立了男科实验室内部质量控制体系,97.6%建立了男科实验室精液分析等SOP。87.8%的技术人员进行过为期3个月的专业岗位培训。55.1%在卫生部人类精子库技术培训基地接受男科实验室技术的岗位培训。68.3%的实验室派出专职技术人员参加国家或省内举办的《WHO 5th精液分析手册》培训。对于精子浓度超过50×106·m L-1的标本,仅有65.9%的实验室对标本稀释后再进行计算机辅助精液分析系统(CASA)分析。精子形态学分析时,36.6%实验室通常情况下计数正好200个精子。9.8%实验室内部技术人员分析结果一致,87.8%实验室技术人员分析结果基本一致。结论生殖男科实验室的场所、设备配置、技术力量与检测能力存在差异,精液分析技术的规范化与质量控制仍有待改进与提高,实验室技术人员的定期培训与考核有待加强。

肿瘤及其治疗对男性患者生育力的影响及遗传风险分析

伴随着肿瘤患者总生存期的延长,处于生育年龄的患者群体在治疗后的生育力及生育安全问题也越来越受到关注。本文探讨男性肿瘤患者肿瘤自身及抗肿瘤治疗对其生育力的影响并进一步分析可能由此导致的遗传风险。

早孕期胚胎绒毛膜下血肿与下生殖道感染的关系

目的 探讨孕早期绒毛膜下血肿与下生殖道感染及胚胎停育的关系。方法 采用前瞻性随机试验方法,选择早孕5~9周合并绒毛膜下血肿的女性180例作研究对象,依据阴道分泌物培养结果,分为下生殖道感染组(54例)与下生殖道无感染组(126例),分析下生殖道感染及绒毛膜下血肿面积与妊娠结局的关系。结果 下生殖道感染组与下生殖道无感染组在孕妇平均年龄、孕天数、孕次及体质指数上,均差异无统计学意义(P> 0.05)。在阴道出血持续的天数、下腹痛持续天数等症状上也差异无统计学意义(P> 0.05)。经过病因分析,发现下生殖道感染、绒毛膜下血肿出现的孕周<6周,及血肿与孕囊面积占比≥50%及25%~50%之间,均为早孕胚胎停育的独立危险因素。结论 孕早期胚胎停育,与女性下生殖道感染、绒毛膜下血肿出现的孕周<6周,及血肿与孕囊面积占比≥50%及25%~50%,均相关。早孕期应该及时重视调整阴道菌群微生态平衡,早期B超检查发现并处理绒毛膜下血肿,以获得更好结局。

超声视觉下附睾特征值与不育男性精子质量的相关性分析

目的探索超声视觉下附睾特征值与不育男性精子质量的相关性,为超声预测精子质量提供参考。方法回顾性分析2021年3—9月间广东省生殖医院101例不育男性附睾各部厚度的超声测量特征值及其精子相关参数,根据世界卫生组织标准,按精子浓度(C)分成少精子症组、无精子症和正常精子组;按照前向运动精子百分率(PR)分成弱精子症组和正常精子组;按照正常精子百分率(N)分成畸形精子症组和正常精子组;按照精子DNA碎片率(DFI)分成异常组和正常精子组。单因素ANOVA和t检验比较不同精子质量类型男性的附睾特征值差异。Pearson相关分析评估附睾特征值与各精子参数的相关性,探索利用超声评估精子质量的价值。结果101例中无精子症48例,少精子症9例,精子浓度正常44例;弱精子症26例,精子活力正常27例;畸形精子症16例,正常精子37例;DFI正常20例,异常33例。无精子症组的双侧附睾体、左侧附睾尾厚度显著高于精子浓度正常组,畸形精子症的左侧附睾体厚度显著低于正常精子组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关分析表明精子PR与双侧附睾体厚度呈负相关(r=-0.278、-0.236,P<0.05),而N与左侧附睾尾厚度呈负相关(r=-0.214,P<0.05),DFI与右侧附睾尾呈负相关(r=-0.201,P<0.05)。结论附睾厚度不同,精子质量存在显著差异,精子质量与附睾厚度关系密切,利用超声测量附睾的厚度对预测精子参数异常有帮助。

广东地区男性精液质量的流行病学调查

目的：探讨广东不同地区正常生育力男性的精液质量。方法招募年龄在20～45岁之间，无避孕同居生活12个月内使配偶获得妊娠的男性，填写问卷、体检，按照世界卫生组织手册第5版方法进行精液分析，调整年龄、禁欲时间等可能影响精液质量的因素，采用广义线性模型分析广东省内不同地区精液质量的状况。结果1461例分别来自珠三角地区（466例），粤北山区（603例），粤西沿海地区（392例），接受精液检查。3个地区生育力男性的精液质量除精液体积外，其余精液参数包括精子浓度、总精子数、精子存活率、活动率、前向运动精子百分数、正常形态精子百分数差异均有统计学意义。粤北山区高于粤西沿海地区，珠三角地区略低于粤西沿海地区（均P＜0.01）。结论广东省内正常生育力男性精液质量存在地区差异。

人胚胎干细胞表达生殖细胞分化相关基因的研究

目的探讨人胚胎干细胞(hES)系H1生殖细胞分化相关基因的表达。方法免疫荧光、碱性磷酸酶检测和核型分析等方法联合鉴定H1的基本生物学特性,RT-PCR方法检测未分化H1的生殖细胞分化相关基因的基本表达模式,分别以人正常睾丸组织和人胚胎成纤维细胞株HFF-1作为阳性和阴性对照组织。结果H1保持正常核型并维持未分化状态。未分化H1表达减数分裂前生殖细胞标志基因STELLAR、DAZL、FRAGILIS、PUM1、PUM2和GDF3;不表达原始生殖细胞(PGCs)标志基因BLIMP-1、减数分裂特异标志基因SCP1、减数分裂启动标志基因STRA8以及生殖细胞分化后期标志基因VASA。结论未分化H1细胞表达生殖细胞减数分裂前标志基因,但不表达分化后期基因,BLIMP-1可能成为区分未分化hES细胞与PGCs的特异性标志基因。

细胞因子对鸡胚胎原始生殖细胞(EPGCs)增殖的影响

采用MTT法分别检测mLIF、bFGF、hSCF、hIL-11四种细胞因子协同作用对体外培养的第19、28期鸡EPGCs生长的影响。结果表明与对照组相比较,19期的EPGCs体外培养72h后,mLIF、hSCF、bFGF、hIL-11对鸡EPGCs的增殖影响显著（P〈0.05）。mLIF的最佳作用剂量是10-20ng/ml,hSCF的最佳作用剂量是15-20ng/ml,bFGF的最佳作用剂量是10-20ng/ml。hSCF、bFGF的联合使用优于单因子作用的结果（P〈0.05）。单独使用hIL-11时,细胞的增殖情况比其他三因子单独使用的效果较差,但OD均值有随剂量增高而上升的趋势。在与其他因子联合使用的情况下,hIL-11的最佳作用剂量为0.10-0.20ng/ml。

精子顶体相关基因DKKL1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异

目的:研究精子顶体相关基因DKKL1在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。方法:采用RT-PCR和Western Blot方法检测DKKL1基因在人多组织中的表达特征,并比较其在正常人和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。采用免疫组化方法分析DKKL1蛋白在正常和男性不育患者睾丸组织中的表达差异。结果:人多组织RT-PCR和Western Blot结果显示DKKL1基因为睾丸组织特异性表达,与正常人睾丸组织比较,DKKL1基因在男性不育患者睾丸组织中表达减弱或消失。免疫组化结果显示DKKL1蛋白主要定位在正常男性睾丸的精母细胞和圆形精子细胞,而在唯支持细胞综合征(SCOS)和隐睾患者睾丸组织中不表达,在各种生精细胞阻滞患者的睾丸中观察到不同的表达特征。结论:DKKL1基因在男性不育患者睾丸组织中对精子发生可能具有重要作用,其表达降低或消失可能是男性不育症发生的重要原因之一。

胚胎干细胞分化过程中的表观遗传调控

作为一类既有自我更新能力,并具有多向分化潜能的细胞,胚胎干细胞具有非常重要的理论研究意义和临床应用前景。近期以胚胎干细胞为模型,研究有关干细胞分化的表观遗传调控已成为新的研究热点。本文就胚胎干细胞分化过程中DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA调控以及与胚胎干细胞分化密切相关的表观遗传学动态变化做一概述,对表观遗传学改变与胚胎干细胞分化关系的基础研究进行探讨。

UBE2B基因与男性不育的研究进展

男性不育是困扰全球的一个世界性难题,大约15%的不育病例与精子发生相关的基因变异有关。哺乳动物UBE2B基因与酵母菌Rad6基因同源。UBE2B属于泛素蛋白酶体系统,其在哺乳动物的精子发生过程中发挥着重要作用。小鼠实验表明UBE2B基因敲除小鼠精原细胞减数分裂受抑制,精子活力下降,畸形精子数目增多,表现为雄性不育。越来越多的研究证实男性UBE2B基因突变及单核苷酸多态性均可导致男性不育。本文综述了UBE2B基因与男性不育的关系,为临床男性不育的诊断、治疗提供理论依据。

308例唯支持细胞综合征患者睾丸生精功能与生殖激素的相关性分析

目的分析生殖激素的比值在评估睾丸生精功能上的应用价值。方法回顾性分析308例在外院诊断为非梗阻性无精子症,睾丸病理为唯支持细胞综合征且来我院要求供精人工授精的临床资料。按照体外射出精液是否有精子,分为隐匿精子组和无精子组,比较两组间的生殖激素水平和遗传学指标差异,分析这些指标对评估唯支持细胞综合征患者的睾丸生精功能的价值。结果研究对象FSH/LH比值均值为2.4,其中隐匿精子组2.0,无精子组2.5,两者差异有统计学意义(P=0.001),而两组FSH、LH、PRL、T、FSH/T比值以及LH/T比值比较无显著差异。两组染色体和AZF基因比较有显著统计学差异(P<0.001)。结论 FSH/LH比值联合染色体和AZF基因等指标在评估唯支持细胞综合征患者的睾丸生精功能上比睾丸体积、精液量、精液PH值、FSH、LH、PRL、T、FSH/T比值以及LH/T比值更具有参考价值。

单个体外受精周期仅获得≤2个低评分卵裂期胚胎的处置方式探讨

目的:比较体外受精周期仅获得≤2个4细胞或5细胞Ⅲ级低评分卵裂期胚胎新鲜移植或囊胚培养的临床结局。方法:收集2013年1月-2022年12月在广东省生殖医院行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕且单个取卵周期配成≤2个4/5细胞Ⅲ级胚胎且无其它胚胎的患者共185个周期,根据取卵后第3天(D3)患者意愿分为移植组(n=72)、养囊组(n=113),观察两组有效胚胎利用率、当次取卵周期的累积妊娠率及累积活产率。结果:养囊组可用囊胚形成率为3.9%,208个低级别胚胎进行囊胚培养共形成8枚可用囊胚,囊胚移植后临床妊娠率及种植率75.0%,移植周期活产率为50.0%;移植组妊娠率为19.4%,有效胚胎利用率(12.5%)高于养囊组(2.9%),取卵周期累积妊娠率(19.4%)及累积活产率(11.1%)均高于养囊组(5.3%、2.7%)(均P<0.05)。结论:4/5细胞低评分胚胎成囊率低下,但是一旦形成囊胚妊娠率较高;若患者无其它胚胎可选择且有强烈移植意愿,可在充分知情同意下进行新鲜移植,可获得一定妊娠率,但是此类胚胎新鲜移植仍需慎重考虑。

大于38岁女性冻融移植周期单囊胚与双囊胚移植妊娠结局比较

目的探讨大于38岁女性在冻融囊胚移植周期中移植不同囊胚数目和质量时的妊娠结局。方法纳入2017年1月至2021年12月在广东省生殖医院生殖中心接受冻融囊胚移植且移植年龄大于38岁的249例女性为研究对象,对其249个移植周期的临床资料进行回顾性分析。根据不同的囊胚移植数目和质量分为5组:移植单个优质囊胚组(A组,94个周期),移植单个非优质囊胚组(B组,103个周期),移植双优质囊胚组(C组,10个周期),移植单个优质囊胚+单个非优质囊胚组(D组,18个周期)和移植双非优质囊胚组(E组,24个周期)。比较分析不同囊胚移植数目和质量组间的一般资料、胚胎实验室指标及妊娠结局。结果各组患者的一般情况比较发现,D组的取卵年龄显著大于A组(P<0.05),C组的基础FSH(bFSH)显著低于A组,E组的bFSH显著低于B组(P均<0.05);各组间移植年龄、窦卵泡数、体质量指数(BMI)、促性腺激素(Gn)用量、移植日内膜厚度、人工周期方案比例均无显著性差异(P>0.05)。E组的获卵数显著大于B组[(12.67±4.98)vs.(10.69±4.08),P<0.05];各组间D3可用胚胎数、优胚数、囊胚培养数、囊胚形成数、囊胚冷冻数比较均无显著性差异(P>0.05)。A组与C组比较,多胎率显著降低(6.00%vs.33.30%,P<0.05),组间着床率、临床妊娠率、流产率、活产率及早产率比较均无显著性差异(P>0.05);A组与D组比较,着床率显著增高(53.20%vs.27.80%,P<0.05),活产率相似(35.10%vs.33.30%,P>0.05);A组与E组比较,多胎率显著降低(6.00%vs.33.30%,P<0.05),组间着床率、临床妊娠率、流产率、早产率、活产率比较均无显著性差异(P>0.05);B组与E组比较,临床妊娠率、多胎率显著降低(P<0.05),组间着床率、流产率、活产率及早产率比较均无显著性差异(P>0.05)。结论大于38岁高龄女性在冻融囊胚移植周期中若有优质囊胚,建议优先移植单个优质囊胚;若没有优质囊胚,也应考虑移植单个囊胚。

育龄女性多囊卵巢综合征患者焦虑抑郁负性情绪影响因素及健康管理的研究进展

多囊卵巢综合征(PCOS)是临床上较为多发的生殖内分泌疾病,发病原因与患者体内激素分泌紊乱具有重要关系,导致育龄女性PCOS患者相较于正常人群,更易表现出烦躁、紧张、情绪不稳定、焦虑、抑郁等负性情绪。而其中焦虑、抑郁是育龄女性PCOS患者最为主要的心理困扰,其对患者的生育、生活质量及生理健康均造成严重不良影响。近年国内外一系列研究表明,影响育龄女性PCOS患者产生焦虑、抑郁负性情绪的因素主要为社会人口学因素、睡眠质量、并发症及性功能障碍等。国内外PCOS临床诊疗指南指出,有效、规范化的健康管理可显著提高PCOS患者的治疗依从性,进而使其临床预后得到确切改善;而以管理师为主导的多学科协作全程健康管理、家庭参与式个案健康管理及基于"互联网+"的移动健康管理是目前有关育龄女性PCOS患者焦虑、抑郁负性情绪的主要管理策略,均可对患者焦虑、抑郁等负性情绪进行有效调节。基于此,本文将对育龄女性PCOS患者焦虑、抑郁负性情绪现状、影响因素及健康管理策略进行综述,希望以此引起对育龄女性PCOS患者焦虑、抑郁负性情绪的重视以及为帮助其建立长期依从的健康生活方式提供参考。

宫腔灌注联合多西环素对慢性子宫内膜炎合并反复种植失败患者妊娠结局的影响

目的 探讨宫腔灌注联合多西环素对慢性子宫内膜炎(CE)合并反复种植失败(RIF)患者妊娠结局的影响。方法 选取102例CE合并RIF患者,按随机数字表法分为观察组与对照组,每组51例。观察组宫腔灌注左氧氟沙星加地塞米松和绒促性素,并口服多西环素,对照组单纯口服多西环素。比较两组患者治疗效果、妊娠结局及外周血炎症细胞因子[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。结果 治疗后,两组外周静脉血IL-6、IL-1β、TNF-α水平均降低,观察组IL-6(20.17±5.29)ng/L、IL-1β(101.23±13.14)ng/L、TNF-α(45.28±9.07)ng/L均低于对照组的(30.68±4.98)、(128.57±11.81)、(62.78±9.62)ng/L,组间比较有统计学差异(P<0.05)。观察组治疗总有效率96.08%高于对照组的76.47%,组间比较有统计学差异(P<0.05)。观察组临床妊娠率76.47%高于对照组的56.86%,组间比较有统计学差异(P<0.05);两组生化妊娠率、早期流产率、活产率比较,无统计学差异(P>0.05)。结论 宫腔灌注左氧氟沙星加地塞米松和注射用绒促性素联合多西环素口服治疗CE合并RIF患者,具有显著疗效,有助于提高患者妊娠率,改善患者妊娠结局,值得临床推广。

李广文种子转阴丹治疗免疫性不孕

不明原因不孕占比可达到不孕症10%~30%,其中免疫因素引起的不明原因不孕越来越引起临床的重视。免疫一词,顾名思义是免于疾病,亦即防病于未然之意。中医学在《黄帝内经》时期就有防病思想的萌芽,但并未形成系统的防治免疫性疾病理论。中医学典籍对免疫性不孕未有记载,根据其临床表现特点可归属“不孕”范畴。对免疫性不孕的诊治,可根据辨证求因,审因求治的原则进行论治。李广文教授根据中医基础理论,结合免疫性不孕的发病机制,提出本病以肾虚为本,房劳损伤、感染邪毒等为外所因,瘀血为主要致病因素,内外因相合,造成气血失调,阴阳相乘,冲任督带损伤,则胎孕难成。李广文教授自拟种子转阴丹,兼有双补气血、温肾助阳、解毒消抗功效,在临床取得良好疗效。但对种子转阴丹整个复方、单味中药及组方规律需要进一步深入的临床和基础研究,以阐明其在免疫性不孕中的作用机制。

性激素六项和性激素球蛋白对诊断男性梗阻和非梗阻无精子症的临床意义

目的探讨性激素六项和性激素球蛋白对诊断男性梗阻和非梗阻无精子症的临床意义。方法选择2018年3月—2020年3月收治的98例行睾丸切开取精手术的无精子症患者作为研究对象,将非梗阻无精子症患者作为A组(50例),将梗阻无精子症患者作为B组(48例),同期选择50例正常生育男性作为对照组。对3组进行性激素六项和性激素球蛋白检测,比较3组性激素六项与性激素球蛋白水平。结果对照组睾酮、孕酮、雌二醇高于A组和B组,促卵泡刺激素、催乳素、性激素球蛋白水平低于A组与B组,黄体生成素高于B组,且低于A组,差异具有统计学意义(P<0.05);A组黄体生成素、促卵泡生成素、性激素球蛋白水平高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。A组中黄体生成素水平、促卵泡生成素水平与性激素球蛋白水平具有相关性(P<0.05),在B组中黄体生成素水平与性激素球蛋白水平无显著相关性(P>0.05),促卵泡生成素水平与性激素球蛋白水平呈显著相关性(P<0.05)。结论黄体生成素、促卵泡刺激素、性激素球蛋白可作为诊断男性梗阻和非梗阻无精子症重要指标,可以反映无精子症严重程度,有效鉴别男性梗阻无精子症与非梗阻无精子症。