中国医疗机构工作人员流感疫苗预防接种指南

为了加强中国医疗机构工作人员流感疫苗的接种,中华预防医学会医院感染控制分会联合中国临床实践指南联盟制定了《中国医疗机构工作人员流感疫苗预防接种指南》。本指南结合国内外研究进展和专家意见,主要关注了7个临床相关问题,并根据牛津循证医学中心2011版证据质量评估表对研究进行证据评级,最终形成推荐意见。指南强调了医疗机构工作人员接种流感疫苗的重要性,降低自身流感患病率可有效减少医院传播风险。本指南建议:如无禁忌证,医疗机构工作人员均应积极接种流感疫苗。推荐对感染传播风险极高的工作人员、高危人群和孕妇优先接种流感疫苗。另外,指南还提供了疫苗的选择、接种时间及接种频次的建议。鉴于目前我国医疗机构工作人员流感疫苗接种率偏低且地区差异明显,本指南建议进一步加强关于流感疫苗接种的健康教育,根据各个省市区具体情况,采取“多元化”方法,积极开展有组织的接种活动。

1995～2005年中国H3N2亚型人流感病毒血凝素基因变异与流行相关性研究

为了探讨中国H3N2亚型人流感病毒血凝素基因变异与流行关系，对1995～2005年中国分离的550株H3N2流感病毒的HA1序列进行分析。HA1基因进化树显示出以很长的主干和很短的侧枝为特征。HA1的氨基酸位点变异主要位于5个已知的抗原位点及其附近，同时其它位点也有改变。通过对HA1序列资料分析发现这期间导致H3N2流行的序列改变的三种可能，第一种是同时出现多位点变化，第二种是位点变化逐渐发生累积到多个位点变化，第三种是单个抗原位点和受体结合位点同时改变，均可以引起H3N2流行。

1981～2005年中国H1N1甲型流感病毒血凝素基因的HA1演变特征

为了解1981～2005年我国H1N1甲型流感病毒血凝素基因的HA1演变特征，选取H1N1甲型流感病毒370株，提取病毒RNA，经逆转录和聚合酶链反应扩增HA1并测序，测定的序列用生物信息软件分析，与GenBank中相关序列比较，并对推导的编码氨基酸序列进行基因特性分析。结果表明：HA1氨基酸的变异表现为抗原决定簇4个区均有变异，Sb区和Ca区变化较大；HA1受体结合位点（RBS）的前壁130环的第134位赖氨酸从1991年起在部分毒株HA1序列上开始缺失，以后缺失株逐步增多，自2000年起测定的所有毒株上该氨基酸全部缺失，同时这些缺失株的第137位氨基酸也全部由苏氨酸替换为丝氨酸；糖基化位点从增多到减少，最后稳定在7个；1981～2004年我国H1N1甲型流感病毒血凝素HA1编码的氨基酸在种系发育树上同年代基本呈现集中分布，与时间和地域无关，2005年毒株分成两个分支在时间上有明显差异。

全球B型流感病毒耐药相关突变株NA和HA序列特征分析

目的研究全球B型流感耐药相关突变株的NA和HA序列特征及分子结构特点。方法对我国2008-2012年B型流感病毒进行序列测定和分析,确定耐药相关突变株,进一步利用MEGA5.0软件分析我国与全球其他国家B型流感病毒的耐药相关突变位点和伴随位点的异同,并构建系统进化树,利用RasWin软件在NA、HA蛋白分子模型中展示突变位点。结果我国2008-2012年共发现6株B型流感病毒耐药相关突变株,其携带的NA、HA伴随突变较少,且与国外B型耐药相关突变株的NA、HA序列处于不同的进化分枝上。结论目前发现的B型耐药相关突变株的突变位点多种多样,且我国的B型流感病毒耐药情况与国际情况并不十分一致,这提示加强我国乃至全球B型流感病毒耐药监测的重要性。

1996～2005年中国H3N2亚型人流感病毒神经氨酸酶基因特性分析

测定了1996～2005年间在中国分离并保存的395株H3N2亚型人流感病毒神经氨酸酶（NA）基因序列，应用生物信息学工具进行了分析。结果表明：NA基因序列的进化树表现为一主要进化主干伴随多侧分支进化，同一年份的毒株可以分为几个分支存在；疫苗株在NA基因序列进化树上存在明显的滞后现象；NA没有氨基酸的丢失与插入；抗原决定簇大部分位点保守且各抗原决定簇之间的变异情况各有特点，其中197～199位、431～434位和339～347位点的变异频率最高，而153位、328～336位、367～370位、400～403位抗原决定簇的氨基酸变异频率相对比较小；除了抗原决定簇外还有些氨基酸位点的变异频率很高，它们分别是18、23、30、93、143、208、216、221、249、265、267、307、385、437位氨基酸，其中143位和267位这两个位点的变异频率高于抗原决定簇位点，具体生物学意义还需要进一步研究；NA蛋白的酶活性中心位点高度保守；二硫键和糖基化位点保守。NA基因的这些特点为流感的预防、控制以及NA抑制剂药物的应用提供了一定的参考依据。

人高致病性禽流感病毒H5N1安徽株HA、M2蛋白双顺反子表达载体的构建及表达研究

将我国分离的人H5N1亚型禽流感病毒A/Anhui/1/2005作为研究对象,扩增其HA和M2基因片段并克隆至DNA疫苗表达载体pVRC中,构建成真核表达质粒。为提高HA的表达量,按照人偏爱密码子将HA基因进行优化改造,经全基因合成后插入真核表达载体pVRC,以β-actin蛋白为内参比证明了优化后的HA蛋白表达效果明显提高。将M2基因和优化后的HA基因共同克隆入双顺反子表达载体pIRES中,获得同时表达HA或M2的双顺反子真核表达质粒;通过Western blot和间接免疫荧光检测方法,确认构建的重组质粒在真核细胞中成功地表达了目的蛋白HA和M2。通过上述结果为进一步开展人高致病性禽流感病毒安徽株HA和M2基因的功能与致病性研究及使用表达HA和M2蛋白进行新型人用禽流感双价疫苗研发奠定基础。

密码子优化的人H5N1流感病毒HA基因在哺乳动物细胞中获得高效表达

为了提高人禽流感病毒血凝素HA的表达量,应对流感大流行疫苗的需求,按照人的偏爱密码子将H5N1(A/Anhui/1/2005)流感病毒的HA基因进行优化改造,经全基因合成后插入到真核表达载体pDC315中,构建了真核表达质粒pDC315-Mod·HA;将此质粒和含野生HA基因的真核表达质粒pDC315-Wt·HA分别转染293T细胞,比较HA蛋白的表达量。结果表明:经间接免疫荧光实验及Western blot实验比较和鉴定,密码子优化后,HA蛋白在293T细胞中的表达水平显著提高,为流感大流行疫苗的研究打下了基础。

一种敏感的H5禽流感病毒血凝抑制试验方法

目的建立一种敏感的禽流感病毒血凝抑制方法检测H5禽流感病毒特异性抗体。方法采用不同动物来源的红细胞,用血凝抑制试验测定H5禽流感病毒特异性抗体,比较其灵敏性。结果通过对鸡、豚鼠、马等动物红细胞的比较,发现在采用血凝抑制试验测定H5禽流感病毒抗体时马红细胞灵敏度最高。结论可以利用马红细胞建立测定H5禽流感病毒血凝抑制抗体的敏感方法,该方法可以用于人群中禽流感病毒血清抗体水平的调查。

《人感染动物源性流感预防控制技术指南(试行)》浅析:动物源性流感与流感大流行

为适应新时期我国人感染动物源性流感疫情防控工作需要,提高应对流感大流行的能力和水平,2021年7月,国家卫生健康委员会印发了《人感染动物源性流感预防控制技术指南(试行)》。本文就甲型流感病毒及其变异、动物源性流感病毒及其致病性、动物源性流感与流感大流行等内容进行讨论,以期为各地科学有序地开展人感染动物源性流感疫情防控工作提供参考。

优化的套式核酸体外扩增方法用于甲型流感病毒快速诊断的研究

目的临床上对流感的有效控制与治疗在于实验室快速与准确的诊断,这对于指导用药和避免滥用抗生素具有重要意义。RT_PCR在流感病毒检测中特异性和灵敏度较强,nestedmultiplexRT_PCR法可以在此基础上提高灵敏度。实验的目的是应用分子生物学方法对流感病毒进行快速诊断。方法我们结合流感病毒M基因、NS基因、HA基因的结构和进化特性设计多元引物达到流感病毒的型和亚型准确与快速的鉴定。结果甲型流感病毒以M基因保守区域设计引物,PCR后电泳带为413bp;甲型流感病毒以HA基因分亚型,H1N1亚型PCR后电泳带为348bp,H3N2亚型PCR后电泳带为291bp,H5N1亚型PCR后电泳带为326bp。结论应用优化的套式核酸体外扩增方法进行流感病毒的型与亚型的诊断是比较快速的,且所需要的病毒量少(0.01～0.1TCID50),灵敏度较高。

鄱阳湖地区禽流感病毒相关监测研究进展

鄱阳湖地区位于东亚-澳大利亚迁徙路线上,流感病毒能通过野鸟迁徙传播到其他国家和大洲。频繁的家禽贸易同样能使流感病毒基因间不断发生重配,导致病毒持续进化和传播。此外家禽的长距离运输和野鸟的捕捉贩卖等也是影响病毒传播的因素。本文总结了鄱阳湖当地禽流感病毒的流行、分布状况以及影响病毒传播的因素。长期监测能更好的了解禽流感病毒的分布和流行规律,更好地对禽流感进行预警和防控。

环鄱阳湖地区禽流感病毒外环境监测研究

目的观察环鄱阳湖地区外环境禽流感病毒感染情况,为当地开展禽流感风险评估和制定防控措施提供科学依据。方法采用随机抽样的方法在环鄱阳湖地区选取县区为研究地点,在每个县区中选取地理位置临近鄱阳湖的自然村作为采样点,分别于2014年9月和2015年3月期间,采集禽类粪便、禽类饮用水、禽类羽毛、笼具表面擦拭物和蛋表面擦拭物等标本,并对标本进行鸡胚接种后进行禽流感检测。结果 2014年9月和2015年3月期间,两次采集环鄱阳湖地区外环境标本均为2 500份,秋季采集标本的阳性率(9.04%)显著高于春季(3.96%);两次采集的活禽市场的阳性率(41.80%和26.33%)均高于养殖户(3.96%和9.09%);笼具表面擦拭物的阳性率(9.43%)高于其他类型标本的阳性率。结论秋冬季节环鄱阳湖地区禽流感疫情发生危险增高,要重视秋冬季节禽流感外环境和高危职业人群的监测工作。

深圳市首例人感染H5N1病毒病例的实验室诊断及分子特点分析

对深圳首例疑似人禽流感病人的标本,进行了RT-PCR、Real-timePCR检测及病毒分离培养、血清中和试验、抗原比检测及发病早期不同病程多份标本的病毒载量分析;对分离物进行了HA基因、NA基因及M基因的核酸检测。结果表明:患者气管吸出物的H5N1亚型和A型流感病毒的特异核酸均呈阳性,并通过细胞培养分离到禽流感病毒A/Guangdong/2/06(H5N1)株。气管吸取物病毒载量随着病程延长逐渐减少,而血清中和抗体水平逐渐上升达到1:160之后又缓缓下降。A/Guangdong/2/06株8个片段的核苷酸序列显示,其与2005～2006年中国南部的禽流感分离株高度同源,与越南、泰国、印度尼西亚等分离到的禽流感分离株存在明显的差异。

2018-2022年辽宁省沈阳市季节性流感病毒流行特征及乙型流感病毒分子进化分析

目的通过研究2018—2022年辽宁省沈阳市监测周期中流感病毒的病原学监测情况,了解该市流感病毒的流行特征,同时,对乙型流感病毒的血凝素全长基因进行扩增,分析沈阳市流感病毒流行的分子特征及谱系进化特点。方法采集2018年10月1日至2022年3月31日沈阳市哨点医院门诊ILI咽拭子标本,应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)方法确认流感病毒核酸阳性后进行病毒分离,选取部分乙型流感毒株,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对其血凝素全长基因进行扩增测序,使用Snapgene软件对测序结果进行拼接,Clustal W比对多重序列,最后使用MEGA 7.0软件构建进化树分析氨基酸突变位点。结果2018—2022监测周期中沈阳市流感病毒检出总阳性率为5.00%,主要以A/H1N1型病毒为主(44.38%),其次是A/H3N2病毒(28.37%)和B/Victoria(27.24%),未检测到B/Yamagata系毒株。在2020—2021和2021—2022两个流行季中B/Victoria系毒株占比分别为83.33%和86.66%,为绝对优势株,且人群分布中5~14岁年龄组易感。沈阳市分离到的B/Victoria系毒株其血凝素基因均在V1A分支上。与疫苗株相比,流行株在HA蛋白的120环、150环、160环及190螺旋等关键抗原决定簇部位有多个氨基酸位点突变。结论在2018—2022年监测周期中,流感病毒流行的亚型多样性减少,但B/Victoria系遗传多样性增加,而且在多个关键抗原决定簇上发生突变,因此,需对流感的流行特征和乙型流感分子进化情况作以持续的监测,为以流感为主的呼吸道传染病防控提供科学依据。

我国流感疾病负担相关研究进展

流行性感冒(简称“流感”)作为全球广泛流行的急性呼吸道传染病,不仅对人群健康造成严重威胁,同时给社会带来巨大的疾病负担。分析流感造成的疾病负担,对于免疫接种策略的调整和公共卫生资源配置的优化具有重要意义。本文通过检索有关相关文章及流感法定报告数据,对我国近年来流感疾病负担研究进行综述,以期较为全面反映流感对人群健康和社会经济的影响,为流感防控政策的制定,特别是流感疫苗免疫接种的推广提供依据。

2017～2018年度中国大陆流行性感冒病例报告情况分析

目的通过法定丙类传染病报告中的流行性感冒病例数统计和分析,了解2017~2018流感监测年度中国大陆地区的流感疫情情况,为今后对流感季节的科学预警提供一定的参考依据。方法下载"传染病报告信息管理系统"中,中国大陆地区各级医疗机构于2017~2018监测年度报告的流行性感冒病例数据,使用Excel对相应数据进行处理分析,采用SAS 9. 1进行卡方检验、Spearman秩相关分析。结果 2017~2018流感监测年度共报告流行性感冒病例842 753例,其中268 009为确诊病例,574 744为临床诊断病例,死亡138例。2017~2018监测年度流行性感冒报告病例数与标本的流感病毒阳性率之间呈较高程度的正相关关系。与过去3个监测年度相比,2017~2018监测年度报告病例数远高于前三个年度水平,全年最高峰出现于2018年第3周,流感病毒阳性率也为全年最高(46. 27%)。报告发病例数最多的省级行政单位依次为广东、浙江和北京。本监测年度,男性患者略多于女性(P <0. 05),发病年龄主要集中在15岁以下的群体,儿童、学生发病数占大部分(65. 41%)。结论 2017~2018监测年度冬春季流感流行强度高,应加强流感高发地的流感防控工作,提高人群就诊意识,减少重症及死亡病例。重点防控人群为15岁以下人群,尤其是儿童、学生群体。

速度、反应和力量——中国流感监测网络在人感染H7N9禽流感疫情应对中发挥的作用

2013年3月,新型甲型流感病毒(H7N9)人类感染首次被发现在我国华东地区。覆盖我国大陆31个省(自治区、直辖市)所有地市以及新疆生产建设兵团的流感监测网络,从迅速确定病原,明确流行规律,到建立检测技术,及时下发各地检测试剂;从实时开展监测,到疾病防控和科研部门及时对该病毒特性进行了科学研究,评估了传播风险,为政府部门科学制订防控措施提供了依据。中国流感监测网络在这次疫情应对中发挥了至关重要的作用。