Kank1基因在肺癌中的表达及其意义

目的探讨Kank1基因在肺癌中的表达差异及其临床病理学意义。方法采用免疫组织化学方法,检测66例肺癌组织和20例正常肺组织中Kank1蛋白的表达,结合患者临床资料分析Kank1与肺癌发生发展的相关性。同时通过RT-PCR检测正常支气管上皮细胞与肺癌细胞中Kank1 m RNA的表达差异。结果Kank1基因在正常肺组织中的阳性表达率95.0%,其在肺癌组织中的阳性表达率为48.5%。Kank1在肺癌组织中的蛋白阳性表达率显著低于其在正常组织中的表达率(P<0.05);此外,其表达与患者有无淋巴结转移、年龄、性别、肿瘤病理分类及分化程度无关,且在正常支气管上皮细胞与肺癌细胞中Kank1 m RNA表达明显有差异。结论 Kank1在肺癌细胞及组织中表达降低,提示其表达下调与肺癌的发生发展密切相关。

肿瘤代谢异质性

有氧糖酵解以及谷氨酰胺(glutamine)分解代谢活跃是肿瘤细胞代谢的基本特征,两者互补以满足肿瘤细胞对能量和生物大分子合成原料的需求。因此,揭示肿瘤代谢异常的机制,研发干扰肿瘤代谢的药物,有望改善肿瘤的治疗效果。细胞代谢改变,尤其是能量代谢的改变,是肿瘤细胞十大特征之一。早在上20世纪初,Otto Warburg证实,即使在氧气充足的状态下,肿瘤细胞仍采取糖酵解的方式代谢葡萄糖。

羧基酯脂肪酶在结直肠癌中的表达及其生物学功能

背景与目的:尽管结直肠癌的治疗水平在不断提高,但目前其疗效仍难令人满意,因此继续筛选和鉴定在结直肠癌起始和进展中发挥调控作用的关键分子,揭示其功能和机制,是开发诊疗新靶标和进一步提高结直肠癌的治疗水平的重要途经。据此,本研究首次探讨羧基酯脂肪酶(CEL)在结直肠癌中的表达水平,并初步研究其在结直肠癌中的生物学功能。方法:基于收录肿瘤组织基因表达数据的UALCAN和GEPIA在线数据库,综合分析CEL在结直肠癌和正常组织中的表达水平及其启动子甲基化水平。分别用qPCR、免疫组化、Western blot实验检测CEL在结直肠癌组织/癌旁组织与结直肠癌细胞/人正常结肠上皮细胞中的表达。通过转染特异性靶向CEL的siRNA(siCEL),瞬时敲低人结肠癌SW620细胞中CEL的表达水平后,分别用CCK-8、平板克隆形成、Transwell迁移和侵袭实验分析CEL在结直肠癌中的基本生物学功能。结果:癌症相关数据库显示,CEL在结直肠癌组织中的表达水平明显高于正常组织(P<0.05;P<0.001),结直肠癌组织中CEL基因的启动子甲基化水平明显低于正常组织(P<0.001)。qPCR,免疫组化和Western blot结果进一步证实CEL在结直肠癌组织中的基因和蛋白表达水平明显高于癌旁组织,在结直肠癌细胞中的水平明显高于正常结肠上皮细胞NCM460(P<0.01;P<0.001)。转染siCEL敲低SW620细胞中CEL的表达水平后,SW620细胞的生长速度、克隆形成能力、细胞迁移和侵袭能力被明显抑制(P<0.05;P<0.01;P<0.001)。结论:CEL在结直肠癌中高表达,其高表达可能与其启动子区的低甲基化有关。敲低CEL表达能显著抑制结直肠癌细胞的恶性生物学行为,表明CEL高表达促进结直肠癌恶性进展,因此,CEL有望成为结直肠癌诊断和治疗的靶标。

谷氨酰胺分解代谢促进鼻咽癌自噬和放疗抵抗性

目的研究谷氨酰胺(Gln)代谢与鼻咽癌放疗抵抗的关系及作用机制。方法采用慢病毒感染技术建立肾型谷氨酰胺酶(GLS1)敲低的人鼻咽癌细胞系CNE1、6-10B及对照细胞系,脂质体转染技术建立GLS1过表达的人鼻咽癌细胞系CNE2及对照细胞系;采用谷氨酰胺酶抑制剂BPTES抑制GLS1的活性;采用Gln/Glu及Glu检测试剂盒检测细胞Gln代谢情况;体外放射克隆形成实验及流式检测细胞凋亡实验检测Gln代谢改变对放疗敏感性的影响;采用Western blot检测Gln代谢改变对自噬相关蛋白的表达;质粒转染LC3-EGFP后观察自噬荧光斑点。结果 Gln分解代谢降低后,体外放射克隆形成能力降低,细胞凋亡增加及细胞自噬水平降低;而分解代谢增加后,体外放射克隆形成能力增强,细胞凋亡降低及细胞自噬水平增加。结论 Gln分解代谢增强,激活鼻咽癌细胞自噬,增加鼻咽癌的放疗抵抗性。