抗癌胚抗原单抗与生物素及链霉亲和素偶联物的制备及性能鉴定

目的 研究抗癌胚抗原(CEA)单抗与生物素及链霉亲和素(streptavidin, SA)偶联物的制备方法。方法 将CEA单抗按抗体与生物素活化酯物质的量之比为1:15～1:50进行生物素化。抗CEA单抗与SA的偶联采用3-（2-吡啶二巯基丙酸）-N-琥珀酰亚胺酯（SPDP）化学偶联法制备。抗CEA单抗偶联物的生物活性及免疫活性分别采用间接ELISA方法和放射免疫分析法进行测定。 结果 生物素化单抗每分子抗体中约偶联3分子生物素，具有良好的SA结合活性，经SDS-PAGE电泳证实为单一蛋白条带，仍保留95%的免疫活性。SA每分子中含有1～2个巯基，而抗CEA单抗每分子中含有2～3个3-（2-吡啶二巯基丙酸）-N-琥珀酰亚胺酯间接ELISA方法证实偶联物具有良好的生物素结合活性， SDS-PAGE电泳显示单抗-SA偶联物相对分子质量为210 000左右，仍保留着原单抗活性的70%左右。结论 所制备的两类抗CEA单抗偶联物基本保持完整的特异性结合肿瘤CEA的性质，可为进一步的预定位显像和治疗应用提供可靠的靶向载体。