人bFGF基因克隆表达及表达产物的纯化和生物学活性分析

目的：通过融合蛋白表达方式将编码人碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）ｃＤＮＡ在大肠杆菌ＤＨ５α中的表达，为ｂＦＧＦ进一步研究提供材料来源。方法：用多聚酶链反应（ＰＣＲ）及ＤＮＡ重组技术将ＰＣＲ产物克隆到ｐＧＥＭ－５Ｚ载体并测序，然后克隆到表达载体ｐＸＨ上。结果：转化重组质粒ｐＬＸ１的大肠杆菌经４２℃温控诱导４５ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示融合蛋白的分子量约３５０００，薄层扫描分析表明该蛋白占菌体总蛋白量的９９％。经ＦａｃｔｏｒＸａ酶切后得到分子量约为１７０００的ｂＦＧＦ，其生物学活性ＥＤ５０为２２９ｎｇ／ｍｌ。结论：经ＰＣＲ方法扩增的ｂＦＧＦ可在大肠杆菌中高效表达。

《肺癌平汤》治疗肺癌的实验研究

为了验证《肺癌平汤》治疗肺癌的有效性，做了《肺癌平汤》对Ｓ１８０及移植性Ｌｅｗｅｉｓ肺癌体内抑瘤试验。将动物随机分为４组：阴性、阳性对照组以及《肺癌平汤》１倍剂量、２倍剂量组。《肺癌平汤》的１倍量和２倍量对Ｓ１８０小鼠抑制率分别为３８．３８％，４１．１９％；对Ｃ５７小鼠Ｌｅｗｅｉｓ肺癌集落数有明显的抑制作用，与对照组比较差异显著，Ｐ＜０．００１，证实了《肺癌平汤》临床治疗肺癌的有效性。

血小板生成素突变体融合蛋白表达及纯化研究

目的：用大肠杆菌融合蛋白表达载体pMAL—c2构建人血小板生成素突变体融合蛋白表达质粒pMAL-TPOM。方法：采用基因重组和表达、SD-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白纯化技术。结果：SDS-PAGE分析表明，IPTG诱导5h后大肠杆菌JM109表达到最高水平，约占大肠杆菌菌体总体蛋白的36．6％。除了大肠杆菌RR1不表达以外，大肠杆菌DH5a、H101均有较高水平的表达，表达产物血小板生成素突变体融合蛋白经SephacyIS-200和DEAE-SepharoseFF层析纯化后，蛋白纯度约为87．6％。结论：人血小板生成素突变体融合蛋白在大肠杆菌JM109、DH5a和H101中均获得高效表达。

人单核细胞趋化蛋白—1融合表达质粒的构建

目的：用大肠杆菌融合蛋白表达载体pGEX—2T构建人单核细胞趋化蛋白—1融合表达质性pGT—MCP—1。方法：采用PCR技术和DNA重组技术。结果：将编码人单核细胞趋化蛋白—1（MCP—1）基因克隆至融合表达载体pGEX—2T中，DNA测序证实正确。结论：获得融合表达质粒pGT—MCP—1，为进一步研究MCP—1的高效表达奠定了基础。

利用RT-PCR从人胎肝获得血小板生成素cDNA

采用反转录-PCR（RT-PCR）技术，成功地从人胎肝细胞mRNA中获得了血小板生成素（TPO）信号肽和成熟肽编码区cDNA。序列分析表明，该cDNA序列与DeSauveg等报道的人TPO相应的核苷酸序列完全一致，为TPO基因工程的进一步研究打下基础。

利用PCR技术优化人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因

本研究利用ＰＣＲ技术将人单核细胞趋化蛋白－１基因（ＭＣＰ－１）５′端翻译起始区进行优化改构。结果表明，改构后的ＭＣＰ－１基因克隆入大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中，ＤＮＡ测序证实正确。上述结果为进一步研究ＭＣＰ－１的高效表达奠定了基础。

骨髓造血基质细胞对HL—60细胞逆转分化作用的超微结构观察

利用透射电镜技术观察正常人骨髓造血基质细胞对HL－60细胞的逆转分化作用，从而探讨基质细胞对异常实质细胞的调控作用。结果表明：正常人骨髓造血基质细胞对人急性早幼粒白血病HL－60细胞株有逆转分化作用，表现在促分化和抑制增殖作用两方面。其机理主要以直接接触而发挥其调控作用。

微量元素铜和维生素E对肝损伤的协同作用

利用ＣＣｌ＿４（２３０ｍｇ·ｋｇ￣（－１）．ｗｔ）造成大鼠的肝损伤模型。探讨Ｖ＿Ｅ和Ｃｕ对ＣＣｌ＿４肝损伤的协同作用。结果表明，Ｖ＿Ｅ和Ｃｕ联合灌胃可使ＳＯＤ的含量升高，并抑制脂质过氧化物的产生。

在大肠杆菌中融合高效表达人MCP-1

目的：利用含强启动子的融合表达载体ｐＧＥＸ－２Ｔ对编码人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的基因进行高效表达。方法：基因重组技术及蛋白纯化技术。结果：ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示表达产物占菌体蛋白的５０％ 。Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测表明，表达产物可与抗ＭＣＰ－１ 抗体特异反应。生物学活性测定结果表明，表达产物具有明显的单核细胞趋化活性。结论：融合蛋白对ＭＣＰ－１