MBP诱导小鼠免疫细胞凋亡的体内研究

为初步探讨ＭＢＰ与免疫细胞凋亡的关系，实验设置了超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）作为阳性对照，普通蛋白抗原ＢＳＡ为阴性对照。实验方法以检测ＤＮＡ断裂为主，配以形态学观察。结果表明，ＭＢＰ处理组免疫细胞ＤＮＡ经电泳可见“典型”的梯状带；通过比色法和流式细胞术定量检测了ＤＮＡ断裂的数值。结果显示，ＭＢＰ处理组ＤＮＡ断裂百分数与ＳＥＢ组无明显区别（Ｐ＜０．０５）。同时形态学观察表明ＭＢＰ处理组凋亡细胞数目与ＳＥＢ组基本相同。上述结果表明ＭＢＰ具有类似超抗原ＳＥＢ的效应。

人参皂甙对手术应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴及免疫靶器官中肾上腺皮质激素释放素、ACTH阳性细胞数的影响

目的和方法为探讨手术应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPAA）和脾脏中肾上腺皮质激素释放素（CRF）和促肾上腺皮质激素（ACTH）阳性细胞数及人参皂甙的调节作用，采用了免疫酶组化和免疫荧光检测方法。结果应激后15～30min，下丘脑、垂体中CRF和ACTH阳性细胞数较正常对照组减少。CRF阳性细胞在60min后逐渐增多，6h时达正常水平；ACTH阳性细胞于3h开始增多，12h时至正常水平。而肾上腺和脾脏内的CRF和ACTH阳性细胞数在应激后60min开始增多，6h达高峰，24h接近正常水平。人参皂甙（GS）组于应激后15～30min时下丘脑、垂体中CRF和ACTH阳性细胞数多于应激组，但肾上腺和脾脏变化不明显。结论GS可能通过作用于中枢神经内分泌细胞而抑制CAA和ACTH的释放。

双抗体夹心免疫PCR－检测神经肽Y

建立了一种双抗体夹心免疫ＰＣＲ方法。用神经肽Ｙ单克隆抗体包被；多克隆抗体作为夹心抗体；生物素标记的羊抗兔ＩｇＧ和游离的亲合素作为连接分子；生物素化的腺病毒六邻体基因重组质粒ＤＮＡ作为指示分子；用腺病毒六邻体基因的特异引物扩增指标分子。结果表明本实验方法检测神经肽Ｙ的敏感性可达５．０×１０^（－９）μｇ／ｍｌ，或５．０×１０^（－１０）ｇ／ｍｌ，比ＥＬＩＳＡ（０．７８μｇ／ｍｌ）敏感１．５６×１０~８或１．５６×１０~９倍。

超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B诱导小鼠免疫细胞凋亡

为探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ｓｔａｐｈｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎＢ，ＳＥＢ）对小鼠免疫细胞凋亡的影响，采用形态学观察及ＤＮＡ断裂指标检测了ＳＥＢ诱导小鼠免疫细胞凋亡的剂量和效应关系。结果表明，１２．５μｇ、２５μｇ和５０μｇＳＥＢ均可引起部分胸腺细胞、脾细胞和肠系膜淋巴结细胞出现核固缩、核断裂及凋亡小体形成等形态学变化。上述免疫细胞ＤＮＡ琼脂糖电泳可见典型的“梯状”带。而对照组免疫细胞未见上述明显变化。本实验结果表明超抗原ＳＥＢ可诱导小鼠免疫细胞凋亡。

交叉反应性抗类脂A单克隆抗体的制备及初步鉴定

应用杂交瘤技术得到２株可稳定分泌高效价抗鼠伤寒杆菌类脂Ａ单克隆抗体的杂交瘤细胞株，二株均为ＩｇＧ１，且与大肠杆菌类脂Ａ以及绿脓杆菌、布氏杆菌均有较好的交叉反应，并对大肠杆菌的致死性攻击具有一定的保护效应。

三种检测噬菌体阳性克隆的ELISA比较

本研究以抗白细胞介素２受体（ＩＬ－２Ｒα）单抗５Ｇ１筛选噬菌体六肽库为实验体系，比较了三种不同ＥＬＩＳＡ（噬菌体常规包板、固定包板及双抗体夹心法），证实固定包板优于常规包板，夹心ＥＬＩＳＡ效果最佳，实为一种检测噬菌体阳性克隆抗原性的简便。

西洋参茎叶总皂甙对骨髓受抑模型鼠造血相关因子的调节

本文探讨了西洋参(Panax.quinquefolia,or America ginseng)茎叶总甙(PNS)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)造成的骨髓受抑模型鼠细胞免疫及骨髓增殖的调节效应。结果表明PNS可部分恢复CY抑制骨髓细胞增殖能力和脾细胞的活性,且明显提高受抑小鼠IL—3,IL—6样物质的产生。提示PNS通过对造血相关因子的调节作用拮抗CY所致的骨髓抑制。

海马培养上清与海马内注入西洋参总甙对胸腺细胞的增殖效应

本研究探讨了大鼠海马培养上清、海马提取物及海马内注入 PNS对免疫细胞增殖反应的影响。结果表明,海马培养上清可显著促进胸腺细胞增殖;海马提取物对大鼠胸腺细胞增殖在一定浓度有促进效应;海马内注入PNS能促进胸腺及脾脏细胞的增殖。提示海马参与免疫调节。

APO-1/Fas及其配体介导超抗原SEB诱导的淋巴细胞凋亡

为了探讨超抗原诱导的淋巴细胞凋亡机制．本实验采用超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）处理人外周血单个核细胞，采用流式细胞术检测细胞DNA断裂的百分率；同时动态观察了细胞表面APO-1、FasL的表达及细胞内Bcl－2蛋白的表达。结果表明，SEB不但可引起人外周血淋巴细胞凋亡，而且可诱导淋巴细胞表达APO-1和FasL。细胞凋亡的百分率与细胞表面APO-1和FasL的表达呈正相关（r＝0．71，r＝0．98），与细胞内Bcl－2表达呈负相关（r＝－0．72）。由此可见，APO－1／Fas及其配体参与了超抗原SEB诱导的淋巴细胞凋亡。

淋巴细胞表面APO—1受体的表达与其凋亡敏感性的相关？…

采用ＦＡＣＳ及ＤＮＡ电泳等方法，检测了抗ＡＰＯ－１单抗对超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的影响，结果发现，ＳＥＢ可诱导淋巴细胞表达ＡＰＯ－１受体，并用随着ＡＰＯ－１受体表达量的影响，抗ＡＰＯ－１抗体诱导其凋亡的数目也随之增多，由此可见，ＡＰＯ－１受体是介导ＳＥＢ活化的淋巴细胞凋亡的主要途径。

抗APO-1单抗促进SEB活化的淋巴细胞凋亡及其与胞内游离Ca^(2+)浓度相关性研究

为探讨抗ＡＰＯ－１单抗处理的金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）活化的淋巴细胞胞浆中游离Ｃａ２＋浓度的变化，用形态学观察、流式细胞光度术观测了鼠抗人ＡＰＯ－１单克隆抗体对ＳＥＢ活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的诱导作用，同时采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针检测了ＡＰＯ－１单抗处理的淋巴细胞胞浆内游离Ｃａ２＋浓度。结果表明，抗ＡＰＯ－１单抗对ＳＥＢ活化１ｄ和对照组淋巴细胞无明显的促凋亡作用，但对ＳＥＢ活化５ｄ的淋巴细胞不仅可明显促进其凋亡，而且可使其胞浆游离Ｃａ２＋浓度升高，而Ｚｎ２＋则抑制了抗ＡＰＯ－１单抗的凋亡诱导作用。由此可见，抗ＡＰＯ－１单抗与其特异性抗体结合后可能是通过使胞浆中游离Ｃａ２＋浓度升高，激活了Ｃａ２＋／Ｍｇ２＋依赖的内源性核酸内切酶而导致ＳＥＢ活化的淋巴细胞凋亡。

肿瘤源性CTL表位研究进展

肿瘤源性 MHC 限制的表位肽是肿瘤免疫生物治疗的分子基础。近年来 ,由于表位肽鉴定的理论和技术的发展 ,大量的肿瘤源性的表位肽被鉴定出来。本文综述了表位肽鉴定的理论与技术、已鉴定肿瘤表位肽的分类情况及其在肿瘤免疫生物治疗中的应用 ;并且就表位肽应用存在的问题和可能的解决办法进行讨论。为肿瘤源性的肽表位在肿瘤生物治疗中的应用进行了初步探索。

MBP刺激的PBMC培养上清对内皮细胞促进T细胞增殖的作用

目的探讨髓磷脂碱性蛋白MBP刺激的PBMC培养上清作用的人脐静脉内皮细胞HUVEC对T细胞增殖的影响。方法用细胞免疫化学染色和FCM检测HUVEC的VCAM1ICAM1和HLADR的表达用MTT法测定MBP刺激的PBMC对T细胞增殖的影响。结果与对照相比较MBP刺激的PBMC培养上清可诱导HUVEC特异表达VCAM1和HLADR上调ICAM1的表达。经MBP作用的HUVEC可明显促进T细胞的增殖。结论MBP刺激PBMC的培养上清可引起内皮细胞结构和功能改变促进T细胞增殖。

肽文库及其在免疫学研究中的应用

肽文库是一定长度肽段的混合物,里面包含所有可能的氨基酸排列信息。肽文库可被分为两种,一种是合成肽文库（synthetic peptide library）,另一种是噬菌体肽文库（Phage peptide library）。关于这两种肽文库及其在免疫学的研究中的应用,在1997年国外医学免疫学分册上已有较好的综述。在此文中,仅对合成肽文库及其在免疫学研究中的应用谈一点我的理解,并介绍一下我采用合成肽文库做的一点工作。

试用ICAM-1相关小分子肽抑制角朊细胞介导的共刺激效应

目的：探讨ＩＣＡＭ１ 相关肽抑制角朊细胞将超抗原ＴＳＳＴ１ 递呈给Ｔ淋巴细胞。方法：应用鼠抗人ＣＤ５４ 单克隆抗体筛选噬菌体随机十五肽库，经４ 轮筛选后，挑取２０ 个克隆进行测序，利用含保守序列的阳性克隆噬菌体对角朊细胞递呈超抗原ＴＳＳＴ１ 给Ｔ细胞进行阻断试验。结果：得到保守序列为ＩＴＲＳＦＱＳＳＭＥＰＧＰＰＧ，所筛选的阳性噬菌体克隆与野生型噬菌体相比具有明显的阻断效应（ Ｐ＜ ００１） 。结论：ＩＣＡＭ１ 相关小分子肽可望降低超抗原介导的皮肤炎症反应。

急性髓系白血病细胞粘附分子的表达及意义

多种粘附分子在急性髓系白血病(AML)细胞上的表达与AML发生、发展及转归相关,对指导AML的治疗,监测AML的发展及预后有一定意义.本文将此方面的相关文献进行综述,以探讨AML细胞粘附分子表达的临床意义.

腺病毒重组质粒作为免疫PCR指示分子的研究

为探讨不同标记方式对制备免疫PCR指示分子的影响,首先制备了一个用于免疫PCR指示分子DNA片段的重组质粒（腺病毒六邻体基因片段）,用生物素-dUTP分别以不同的方式标记DNA:PCR产物标记、PCR直接标记、线性重级质粒标记和回收重组质粒插入片段的标记。结果表明,以线性重组质粒标记生物素制备的指示分子具有最佳的效果。

IL-1介导的胞内信息传递

IL-1通过胞膜 G 蛋白激活 cAMP、IP3等第二信使系统,进而活化一系列蛋白激酶,将信息传递至细胞核,通过活化 AP-1位点或胞核中原有的 NF-kB 分子,最终实现基因转录。

卵巢癌患者血清及腹水中可溶性白细胞介素－2受体水平测定

应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了３１例卵巢癌患者血清及腹木中可溶性白细胞介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平，并提纯腹水中的ｓＩＬ－２Ｒ，以观察其对正常者淋巴细胞转化的抑制。结果表明，卵巢癌患者血清中ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于正常者（Ｐ＜０．００１），其中粘液性癌患者的ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于浆液性癌患者（Ｐ＜００１），但与肿瘤的临床分期及是否发生转移均无明显相关；此外，在多数腹水标本中检出高浓度的ｓＩＬ－２Ｒ，经亲合层析纯化的腹水中的ｓＩＬ－２Ｒ对正常者淋巴细胞转化有明显抑制作用。