头颈部鳞癌颈淋巴结转移方式的临床病理学研究

为了探讨头颈肿瘤颈淋巴结转移的规律，对３８４侧根治性颈淋巴清扫标本进行连续切片观察。发现颈淋巴结转移病理阳性的总发生率为６０．４％，其中Ｎ０病例颈淋巴结转移率为３１．７％，Ｎ１～３颈转移率为８１．２％；口腔癌主要向Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ区转移，口咽癌、下咽癌和喉癌主要向Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ区转移。转移的淋巴结主要分布于一个或相邻的三个解剖区。颈淋巴结转移病理阳性和淋巴结包膜破坏的发生率随着临床Ｎ分期的增加而升高，且后者在Ｎ２，３中的发生率明显高于Ｎ０，１。提示对Ｎ０，１的病例可行区域选择性颈清扫并追加术后放疗。对Ｎ２，３的病例应行根治性颈清扫术，以彻底清除转移灶并改善患者预后。

两种基质金属蛋白酶在胆脂瘤和中耳癌中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶 (matrixmetalloproteinases,MMP)的MMP 2和MMP 9在胆脂瘤和中耳癌中的表达差异及其在骨浸润作用。方法 采用免疫组织化学方法检测 36例胆脂瘤上皮 ,10例胆脂瘤外耳道皮肤、16例中耳癌组织及正常组织中MMP 2和MMP 9的表达。结果 ①MMP 2和MMP 9在胆脂瘤上皮染色最强。而且在上皮组织的各层细胞均有表达 ,基底膜染色最强。②胆脂瘤上皮中的MMP 2和MMP 9的表达明显高于其对应的外耳道皮肤和正常外耳道上皮。MMP 2阳性表达在胆脂瘤上皮中为 83% ,胆脂瘤外耳道上皮为 5 0 % ,正常外耳道皮肤 2例有微弱表达。③ 16例中耳鳞癌组织中 ,MMP 9的阳性表达率为 5 0 % (8 16 ) ,MMP 2的阳性表达率为 5 6 .2 5 % (9 16 ) ,表达水平与肿瘤的病理分级和临床分期有关。④中耳癌组织中MMP 2的表达与MMP 9表达不一致 ,而胆脂瘤组织中MMP 2和MMP 9的表达密切相关。结论 胆脂瘤向周围骨质侵袭的特性与中耳癌相似 ,MMPs家族及其抑制剂之间的平衡紊乱所致的蛋白水解酶活性增高是引起中耳胆脂瘤骨吸收的原因之一。

增殖细胞核抗原在鼻咽癌中表达的定量研究

为了增加鼻咽癌的诊断和预后判定指标，应用抗增殖细胞核抗原（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｎｇｃｅｌｎｅｃｌｅａｒａｎｔｉｇｅｎ，ＰＣＮＡ）单克隆抗体，采用免疫组化染色ＬＡＳ－ＳＰ法及图象分析技术，对８２例鼻咽鳞状细胞癌和２５例鼻咽粘膜炎症组织标本进行了定量研究，并对鼻咽癌患者５年生存率与ＰＣＮＡ表达情况进行了相关性分析。结果：①根据ＰＣＮＡ阳性细胞计算的鼻咽癌细胞增殖指数与鼻咽癌的病理分级呈明显的正相关，与患者５年生存率呈明显负相关。②图像处理检测的ＰＣＮＡ表达量与鼻咽癌的病理分级也呈明显的正相关，与５年生存率呈负相关，但泡状核细胞癌虽属低分化鳞癌却不符合上述规律。结论：ＰＣＮＡ能很好地反映鼻咽癌的增殖活性，在临床病理上具有应用前景。

鼻部气道的气流感觉

为了观察正常人鼻部气流感觉与鼻通气度的关系，采用视觉类比标度法和前鼻测压法进行研究，发现鼻部对气流的主观感觉与实际鼻通气度即鼻气道阻力之间无明显相关性；并证实感觉鼻通气度的部位主要在鼻前庭。传统中药治疗鼻阻塞的挥发类药物（樟脑和薄荷）只能改善鼻通气的感觉，并不能改善鼻气道阻力。提示鼻部对气流的主观感觉不能完全反映实际的鼻通气程度。临床上诊断和治疗以鼻阻塞症状为主诉的患者时，应将患者鼻部对气流的主观感觉和测定鼻气道阻力结合起来，以对实际的鼻通气度和治疗效果作出客观评价。

遗传性耳聋家系的MYO7A基因突变检测

ＭＹＯ７Ａ基因的突变可引起遗传性耳聋，既有综合征性耳聋，又有非综合征性耳聋，其中又包含隐性遗传和显性遗传性耳聋。为研究此基因突变与先天性聋哑的关系，本文通过多聚酶链式反应（ＰＣＲ）及非放射性同位素标记的单链构象多态性分析（Ｎｏｎ－ＲＩＳＳＣＰ）方法检测一隐性遗传性耳聋家系，结果发现先天性聋哑患者有ＭＹＯ７Ａ基因第九外显子突变，其父母为突变基因的携带者，证实其先天性聋哑与此位点突变相关，ＭＹＯ７Ａ基因的突变分析对遗传性耳聋的临床诊断是非常重要的。

线粒体DNA突变与糖尿病相关性耳聋

线粒体（mitochondrial，MT）是高等动物细胞内含有DNA的细胞器，是进行氧化磷酸化反应的部位和为细胞提供能量的主要场所。近几年来，人们发现线粒体DNA突变可引发脑、心脏、骨骼肌、内分泌腺等器官病变，造成多种疾病。其中，线粒体DNA突变与耳聋的关系正受到国内外耳鼻喉学术界的关注，为探索耳聋的奥秘提供了一种新的思路。

顺铂及其耳毒性

顺铂是一种用于化疗的铂制剂,在临床上广泛应用于抗肿瘤治疗。然而由于顺铂所具有的肾毒性和耳毒性以及神经毒性等毒副作用,致使其临床应用受到一定的限制。顺铂损害耳蜗的三个主要靶目标分别是血管纹和毛细胞以及螺旋神经节,这三个靶目标在顺铂的作用下都以细胞凋亡的方式实现其程序化自我毁灭,因此顺铂耳中毒模型是一个典型的内耳细胞凋亡模型。顺铂造成的细胞内氧自由基活动增加和抗氧化酶类的活性丧失是产生细胞损害的重要因素之一,因而抗氧化治疗可有效降低顺铂对耳蜗中上述三个靶目标的破坏程度。顺铂在Caspase(半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶)径路上激发的毛细胞凋亡是首先启动Caspase-8的活动,说明毛细胞膜表面的细胞死亡因子受体是顺铂诱导毛细胞凋亡的一根导火索;螺旋神经节细胞的凋亡却是被顺铂同时启动了Caspase-8和Caspase-9,因此螺旋神经节细胞的凋亡不但是因为细胞膜表面的死亡因子受体因受顺铂刺激而发出凋亡的信号,而且还会被从线粒体释放出的细胞色素C启动其凋亡自毁程序。肿瘤抑制基因p53是出现在顺铂耳中毒早期的一个促使细胞凋亡的重要"杀手",应用Superarray技术发现顺铂激发的耳蜗毛细胞和螺旋神经节凋亡基因主要涉及p53,肿瘤坏死因子家族,Death domain family(死亡结构域家族),Bcl-2family,Card family(Caspase相关的招募域家族),和GTP signal transdution(三磷酸鸟苷信号转导)等多条凋亡通路,其中p53信号通路是顺铂诱导毛细胞和螺旋神经节凋亡的主线,因此应用p53抑制剂-Pifithrinα可以通过有效阻止p53的活动而减轻顺铂诱导的毛细胞凋亡。分裂素激活的蛋白激酶在顺铂诱导的内耳细胞凋亡过程中也扮演了重要的角色,应用PD98059可以通过暂时抑制分裂素激活的蛋白激酶活性和p53磷酸化以及Caspase的活动延迟耳蜗毛细胞凋亡的起始阶段,但不能完全阻止病变的扩展,因而PD98059对顺铂引起的耳蜗毛细胞凋亡仅具有短期保护效应。

基质金属蛋白酶及其在中耳胆脂瘤骨吸收发病机理的研究

基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinases,MMPs)是机体内细胞外基质降解的重要蛋白水解酶系统 ,它们参与组织的再造和器官的形成。其基因表达的异常可导致细胞及其基质中蛋白水解酶活性增强 ,造成一些病理过程的发生。本文着重介绍了 MMPs的生物学特性及其在骨基质降解和中耳胆脂瘤骨吸收发病机理中的作用。

喉癌微血管生成中P53 nm23蛋白和血管内皮生长因子的作用

目的 探讨P5 3、nm2 3蛋白和血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfacor,VEGF)在喉癌微血管生成及转移中的作用。方法 通过免疫组化SP法对 42例喉癌标本中P5 3、nm2 3蛋白、VEGF及微血管密度 (microvesseldensity,MVD)进行了检测。结果 喉癌中P5 3、nm2 3蛋白及VEGF的阳性表达率分别占 47 6 %、5 7 1%和 71 4%。P5 3基因和VEGF呈正相关 (P <0 0 5 ) ,在有淋巴结转移的喉癌标本中P5 3、VEGF阳性表达率及MVD明显高于非转移组 (P <0 0 5 )。而nm2 3基因和VEGF在喉癌标本中无直接相关性 ,在nm2 3蛋白表达阴性和VEGF阳性标本中MVD较高 ,这种现象多见于有淋巴结转移的喉癌中。结论 突变型P5 3基因通过调控VEGF的表达影响肿瘤内MVD ,促使喉癌发生转移 ;而nm2 3基因可能不是通过调控VEGF的表达 ,而是通过其它途径影响喉癌转移。

胸大肌肌皮瓣手术的并发症

目的：为了正确预防处理胸大肌肌皮瓣手术的各种并发症。方法：本文系统回顾分析了购大肌肌皮瓣手术的并发症，并对其预防和处理办法做了详尽讨论。结果：在50例胸大肌肌皮瓣手术中15例发生了不同程度的并发症。其中咽瘘3例，皮瓣部分坏死3例，颈动脉破裂2例，食管吻合口狭窄3例，脱皮2例，胸壁血肿感染脓肿形成1例，癌肿肌蒂部种植1例。结论：只要处理和治疗正确及时，各种并发症是可以治愈的。

Myc基因家族在喉癌中的异常扩增及其意义

目的探讨Ｍｙｃ基因家族在喉癌中的异常扩增及其临床意义。方法应用ＰＣＲ非变性聚丙稀酰胺凝胶电泳激光扫描技术检测了３２例喉癌组织、１２例癌旁组织和６例正常组织。结果正常组织细胞Ｍｙｃ基因无扩增，３２例喉癌中４７％（１５／３２）有Ｃｍｙｃ和Ｌｍｙｃ扩增，４１％（１３／３２）有Ｎｍｙｃ基因扩增。Ｍｙｃ基因扩增率与年龄、性别、喉癌临床分期及分化程度无关（Ｐ＞０．０５），但有淋巴结转移的患者的Ｎｍｙｃ扩增率明显高于无淋巴结转移者（Ｐ＜０．０１）。结论Ｍｙｃ基因３个成员异常扩增是喉癌发生的原因之一，Ｎｍｙｃ扩增在喉癌淋巴结转移过程中可能起正性调控作用。

国人connex in 26基因突变与先天性感音神经性耳聋的相关性研究

目的 :探讨国人耳聋人群中 connexin2 6基因的突变频率和位点。方法 :收集 15例有遗传性耳聋家族史的病例和 2 5 2例散发性先天性耳聋病例血液样本 ,使用 PCR- SSCP方法分析 connexin2 6基因编码区突变。同时采用 PSDM和 Bsi YI酶切的方法 ,直接检测异常 connexin 2 6基因 35 del G的突变。结果 :检出突变样本 4 6例 ,其中散发耳聋患者中 38例 ,突变率为 15 .1% ;有家族史的聋儿 15例中 8例 ,突变率为 5 3.3%。 4 6例中 5份有相似的异常电泳带 ,PCR产物直接测序 ,其形式为 79位 G→ A的突变 ;另外在散发耳聋患者中还发现 2例 2 5 1del T和 2 33del C,PDSM分析未发现有 35 del G的突变。结论 :国人先天性耳聋患者中存在着 connexin2 6基因的高突变率 ,但突变热点与国外报道的不同 ,推测 connexin2

鼻病理状态对鼻气道阻力的影响

采用前鼻测压法对１６６例鼻部及鼻咽部疾病患者进行鼻气道阻力（ＮＡＲ）测定，发现鼻气道阻塞可以引起ＮＡＲ升高；ＮＡＲ的升高幅度随病变部位的程度的不同而不同。表明测定ＮＡＲ可为判定鼻气道阻塞程度提供客观而可靠的指标。

头颈部鳞癌颈淋巴结转移诸因素对预后的影响

对382例头颈部原发鳞癌病人颈清扫标本连续切片病理观察结果和临床资料进行回顾性分析，探讨淋巴结转移的各项临床和病理学因素与病人预后的关系。发现总体5年生存率为46.1％，口腔癌、口咽癌、下咽癌和喉癌的5年生存率分别为49．7％，39．7％，35．0％和60．3％。表明颈淋巴结的临床分期、触诊淋巴结大小、病理转移淋巴结情况、颈淋巴解剖分区受累数和最低受累平面与病人5年生存率有密切关系（均P＜0．01），而阳性淋巴的个数对病人预后无明显影响。提示针对影响预后的淋巴结因素应采取相应的治疗措施，以提高病人的5年生存率。

端粒酶RNA组分和端粒酶活性与喉癌的相关性研究

目的 :进一步了解端粒酶活性和端粒酶 RNA组分 (h TR)与喉癌发生、发展的关系 ,并建立喉癌的早期诊断标准。方法 :采用端粒酶重复扩增法和原位杂交法对正常组织、声带息肉、癌前病变和喉癌进行 h TR和端粒酶活性分析。结果 :1所有组织均表达不同水平的 h TR,h TR阳性率随着喉癌的临床分期逐渐增加 ,但无统计学差异。 2 39例 (78% )的喉癌组织表达端粒酶活性 ,声带息肉仅 1例 (8.3% )表达 ,不同分化的喉癌组织端粒酶活性有差异。结论 :端粒酶活化是喉癌发生的早期事件 ,检测端粒酶活性可判定临床喉部肿瘤的良恶性。但 h TR与端粒酶表达不一致 ,不能作为预测端粒酶活性的指标。

同时检测三种Myc基因的聚合酶链反应技术

目的建立同时检测Ｍｙｃ基因３个成员Ｌｍｙｃ、Ｎｍｙｃ及Ｃｍｙｃ异常扩增的简便方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，用一对引物同时扩增Ｍｙｃ基因３个成员第２外显子中的高度保守区，扩增产物经非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及激光扫描。结果此法可以检测Ｍｙｃ基因家族中３个成员的扩增情况。经检测，正常组织细胞没有Ｍｙｃ基因扩增，３２例喉癌组织中４７％有Ｌｍｙｃ和Ｃｍｙｃ扩增，４１％有Ｎｍｙｃ扩增，与正常比差异均有显著意义（χ２＝６．７６４，７．６０９，５．９６１；Ｐ均＜００５）。Ｃｍｙｃ扩增率与用ＰＣＲ琼脂糖凝胶电泳检测的结果基本相符（χ２＝０．２５４，Ｐ＞００５）。结论此法对检测肿瘤组织中Ｍｙｃ基因３个成员提供了简易、特异、无放射污染，并且适于临床应用的、优于ＰＣＲ琼脂糖凝胶电泳的方法。