改良MTT比色法测定、计算IL-2活性在临床上的应用

本研究将改良的MTT比色法应用于临床检测IL-2活性,并与3H-TdR掺入法进行了比较。结果表明,改良的 MTT比色法在应用 CTLL2增殖检测IL-2活性时,其敏感性,所需细胞数与3H-TdR掺入法无显著差别。由于改良MTT比色法的应用,使IL-2活性的计算得以用直接线性回归方法计算,同时还比较了直接线性回归法与增殖指数计算法的区别,观察到前者所选用的稀释度数量、比例均适用于临床检测,并明显精确于增殖指数法。

MTT比色检测细胞增殖方法的改良及实验影响因素的观察

探讨了改良前后两种MTT比色法的显色机制及区别,并进行了改良方法与未改良方法及同位素掺入方法检测敏感性的比较和改良方法实验影响因素的观察。结果表明①改良前异丙醇只能溶解细胞外部甲,改良后异丙醇不但能溶解细胞周围的甲,而且能将细胞内的MTT代谢物全部溶解。②改良后较改良前的敏感性有了较大的提高,其敏感性检测结果与~3H-TdR检测结果相一致。③改良方法可以测出约3×10~3个CTLL_2细胞和用6×10~3个细胞活化后的PBL。④适当提高MTT浓度能进一步提高检测敏感性及OD值。