食品安全风险监测预警系统构建研究

本文在食品安全风险监测的基础上加大了对相关信息技术的研究力度,分析了当前食品安全风险监测预警工作体系存在的不足,并依托地方工作现状与数据分析,为优化食品安全风险检测工作提供了全新的发展思路。

有机磷农药降解酶基因Oph2的克隆及甲基对硫磷降解效果研究

目的挖掘可高效表达有机磷农药降解酶的基因,并构建含有该表达基因的工程菌,提供一种高效降解甲基对硫磷的新方法。方法利用基因克隆获得高效表达有机磷农药降解酶基因Oph2,采用基因工程手段将其转化至毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统,对毕赤酵母的发酵产物进行十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)定性和酶活定量研究,通过与目标底物甲基对硫磷反应,分析工程菌表达降解酶对甲基对硫磷的降解效果。结果本研究成功克隆得到了高效表达有机磷农药降解酶基因Oph2,基因全长1000 bp,编码256个氨基酸,酶蛋白分子量为37 kD,并利用表达载体pPIC9K成功将其转化至毕赤酵母GS115。构建的工程菌GS115-pPIC9K-Oph2表达有机磷农药降解酶活性为11.57 U/mL,对6.8 mg/L的甲基对硫磷降解效率为90%以上。结论本研究得到的工程菌GS115-pPIC9K-Oph2可高效表达有机磷农药降解酶,该酶活性高,对甲基对硫磷降解能力强,可有效应用于甲基对硫磷的降解。