ANKRD6高表达是结肠癌不良预后的有效预测指标

目的探讨ANKRD6基因在结肠癌(COAD)中的表达情况以及其在结肠癌预后和治疗中的潜在作用。方法通过免疫组化检测20例配对的结直肠腺癌组织和癌旁组织,利用实时定量PCR方法比较结肠癌细胞系和正常结肠细胞中ANKRD6基因的表达差异。通过TCGA数据库下载521例COAD患者和41例正常组织的基因表达矩阵、免疫浸润数据和临床信息,利用R软件分析ANKRD6在COAD组织中与临床病理特征的表达差异、相关基因集富集和免疫浸润情况。采用单因素和多因素Cox回归以及Kaplan-Meier方法评估COAD的预后及相关因素,并构建含ANKRD6的预后列线图。最后进行体外实验,通过Westernblot、CCK-8实验、划痕实验和Transwell检测siANKRD6与siCtrl的COAD细胞生物学活性。结果ANKRD6在COAD细胞系中高表达,并在恶性程度较高的COAD组织中表达上调(P<0.05)。ANKRD6的表达上调与COAD患者的不良预后(总体生存期和无病生存期)相关(P<0.05)。单因素和多因素Cox回归分析显示,高表达的ANKRD6与患者整体生存率相关(P<0.05)。在此基础上,构建了预后Nomogram,其C-index值为0.739,能有效地预测患者1年、3年和5年的生存预后因素,Calibration校准曲线、DCA曲线和ROC曲线评估该模型的准确性较高。免疫浸润分析结果显示,ANKRD6的表达与巨噬细胞等免疫浸润程度呈正相关(P<0.05),而与Th17细胞等免疫浸润程度呈负相关(P<0.05)。GOKEGG的富集分析结果显示,ANKRD6在COAD中主要富集于Wnt信号通路、血管内皮生长因子受体信号通路和钙信号通路等。体外实验显示,相对于siCtrl,siANKRD6可减弱COAD细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论ANKRD6是COAD预后不良的有效预测指标,为COAD的诊断、治疗靶点的寻找和个体化治疗等提供了参考。