诱导多能干细胞在心血管疾病中的应用研究进展

干细胞以其自我更新和多向分化的能力得到了医学界广泛关注,成体干细胞移植治疗缺血性心脏病已成为现实。诱导多能干细胞(iPSC)是通过对多种终末分化的体细胞进行外源性重编程而获得,因其来源方便、不存在免疫排斥和伦理问题,立即成为细胞重建和组织修复领域的研究热点。该文就iPSC的研究现状以及其在心血管疾病再生医学的应用前景进行综述。

老年心力衰竭患者血浆CGRP和ET-1水平的相关性分析

目的初步探讨老年慢性充血性心力衰竭(CHF)患者次极量运动前后血浆内皮缩血管肽-1(ET-1)和降钙素基因相关肽(CGRP)变化及其与心功能的关系. 方法 44例NYHA心功能Ⅱ～Ⅲ级的老年住院患者,进行6 min步行运动实验(6-MWT),记录运动距离,运动前后患者ET-1、CGRP水平并分析其与心功能的相关关系. 结果老年CHF患者血浆ET-1、CGRP显著高于正常对照组,并与6-MWT距离负相关,与心功能显著正相关;运动后即刻,CHF患者血浆ET-1、CGRP显著增高,ET-1浓度与6-MWT距离显著负相关,与心功能显著正相关,CGRP浓度与步行距离显著正相关,与心功能无相关性. 结论老年心衰患者ET-1、CGRP分泌失调,可能与心功能损害以及运动耐力降低有关.

微量泵入硝酸甘油和米力农治疗慢性肺源性心脏病的临床疗效

目的观察采用微量注射泵泵入硝酸甘油（NTG）注射液和磷酸二酯酶抑制剂米力农治疗慢性肺源性心脏病（CPHD）的临床疗效。方法把CPHD患者随机分为两组,治疗组34例,在CPHD常规治疗基础上每日加用微泵泵入NTG和米力农注射液各5 mg/d,均加0.9%氯化钠注射溶液至50ml,分别按5-10μg/min,0.25-1.0μg·min^-1·kg^-1泵入,疗程一周。对照组27例,为CPHD常规综合治疗。观察治疗前后各组的临床疗效,对动脉血氧分压（PaO2）、动脉血二氧化碳分压（PaCO2）、血氧饱和度（SaO2）、平均肺动脉压（MPAP）、左室射血分数（LVEF）监测。结果治疗组与对照组在住院7 d内治疗总有效率分别为96%与78%（P〈0.01）,治疗组显效率更高（P〈0.01）、降低MPAP、PaCO2水平更显著（P〈0.01）。结论微量泵入硝酸甘油和米力农对慢性肺源性心脏有明显疗效,且无明显不良反应。

缺血预处理减轻心肌缺血再灌注诱导的Na^+-K^+-ATP酶异常表达

目的:探讨Na+-K+-ATP酶在心肌缺血预处理保护机制中的作用。方法:以前降支结扎30 min后复灌60 min制备心肌缺血再灌注模型,连续3次缺血5 min再灌注10 min制备缺血预处理模型。以毛花甙丙抑制Na+-K+-ATP酶功能,观察心脏收缩和舒张功能、心肌Na+-K+-ATP酶功能,免疫组化法检测Na+-K+-ATP酶α1、2α、α3及1β亚基的蛋白表达。结果:心肌缺血再灌注显著抑制心脏舒缩功能、Na+-K+-ATP酶活性以及1α、2α、3α及β1亚基的蛋白原位表达;缺血预处理可减轻心肌缺血再灌注诱导的Na+-K+-ATP酶异常,保护心脏功能;毛花甙丙可维持心脏舒缩功能,但显著抑制Na+-K+-ATP酶和蛋白表达。结论:缺血预处理能减轻心肌缺血再灌注诱导的Na+-K+-ATP酶异常,抑制Na+-K+-ATP酶功能导致缺血预处理保护作用丧失,维持Na+-K+-ATP酶功能是缺血预处理心肌保护重要机制之一。

微管稳定剂Taxol对缺氧心肌细胞Cx43蛋白的影响

目的观察微管稳定剂Taxol对缺氧心肌细胞Cx43表达和分布的影响,探讨其作为新的抗心律失常药物的潜在价值。方法酶解法分离的大鼠心肌细胞缺氧120 min,并以不同浓度的Taxol干预;台盼蓝排斥实验测定细胞存活率;免疫印迹检测Cx43的蛋白表达,免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜观察分析Cx43的分布。结果 Taxol在0.1～10nmol·L-1浓度下成剂量依赖性地提高杆状细胞数,促进细胞存活,而100 nmol·L-1～10μmol·L-1浓度下杆状细胞数开始减少;缺氧时心肌细胞Cx43蛋白表达下降,Taxol呈剂量依赖性地改善心肌细胞的Cx43表达,但过量的Taxol则抑制心肌Cx43;正常心肌细胞Cx43主要分布在细胞两端,缺氧时细胞侧边出现Cx43分布。0.1～10nmol·L-1的Tax-ol呈剂量依赖性地抑制侧边Cx43,100 nmol·L-1～10μmol·L-1的Taxol也抑制心肌细胞两端Cx43。结论缺氧导致心肌细胞Cx43表达降低,分布紊乱,低剂量微管稳定剂Tax-ol可以明显地保护缺氧心肌Cx43,具有潜在的抗缺血性心律失常的临床应用价值。

地高辛抗体对大鼠再灌注心肌NO系统的影响

目的观察心肌缺血/再灌注(myocardial ischemiareperfusion,MIR)时大鼠心肌组织,血清NO水平及NOS同工酶蛋白表达的变化和内洋地黄素特异性抗体对MIR时心肌NO系统损伤的保护作用。方法采用左冠状动脉前降支结扎30 min,复灌45 min建立在体大鼠MIR模型,Sprauge-Dawley大鼠随机分成7组,每组10只,假手术组、缺血/再灌注模型组、生理盐水组、维拉帕米组、小剂量、中剂量、高剂量地高辛抗血清组。各组于再灌注45 min后立即取左室心尖部缺血区心肌并断尾取血,检测心肌匀浆和静脉血中NO含量,心肌匀浆中的eNOS、iNOS水平,免疫组织化学SABC法检测心肌组织eNOS、iNOS;光镜下观察心肌组织形态学变化。结果MIR时心肌组织NO水平明显降低,但血清中NO水平无明显变化;eNOS表达明显减少,iNOS表达明显增加,心肌组织结构发生明显损伤;中、高剂量地高辛抗血清能有效降低心肌组织iNOS表达,恢复心肌细胞eNOS活性,提高心肌组织和血液中的NO水平,减轻MIR导致的心肌组织结构损伤。结论内洋地黄素特异性抗体对MIR造成的心肌NO系统损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能通过拮抗内洋地黄素,调节心肌NOS同工酶的表达紊乱而实现。

地高辛抗血清对老龄大鼠心肌缺氧复氧损伤影响的体外实验

目的:观察内洋地黄素水平在老龄大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的变化以及地高辛抗血清的保护作用。方法:实验于2005-04/05在皖南医学院病理生理教研室完成。取10只24月龄和10只6月龄雄性普通级SD大鼠,分别制备青年和老龄大鼠心肌细胞匀浆,老龄和成年大鼠为两大组,每组分为7小组,即每只大鼠心肌随机分到各小组中,共计14小组,每组10支试管。正常对照组:给予CO2和O2的混合气体(1∶19)通气40min;缺氧复氧组:CO2,O2,N2混合气体(5∶4∶91)通气20min后换成CO2和O2的混合气体(1∶19)通气20min;阴性对照组:同缺氧复氧组,但于再给氧前加入0.1mL的非特异性灭活兔血清;地高辛抗血清组:同缺氧复氧组,但于再给氧前加入0.1mL的非特异性地高辛抗血清(分别为1∶90000,60000,30000,10000)。观察大鼠心肌细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶活性和线粒体内钙聚集程度,分析其剂量-效应关系。结果:①缺氧复氧时,青年组和老龄组大鼠心肌分泌内洋地黄素均显著升高,但老龄组显著低于青年组[(0.081±0.03),(0.153±0.06);(0.074±0.04),(0.125±0.05)ng/g;P<0.05]。②缺氧复氧时,老龄组与青年组心肌细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶活性显著受抑制[(0.239±0.015),(0.778±0.050);(0.350±0.047),(0.836±0.044)μkat/g;P<0.05],老龄组与青年组相比,其抑制效应显著增强(P<0.05)。③缺氧复氧时,老龄组线粒体内钙与青年组比较明显增强[(0.082±0.011),(0.495±0.095);(0.075±0.008),(0.412±0.084)mmol/L,P<0.05]。④老龄组和青年组相比,地高辛抗血清呈剂量依赖性的恢复钠-钾-三磷酸腺苷酶活性(r=0.695,0.797,n=5,P<0.05),减轻线粒体内钙聚集(r=-0.565,-0.649,n=5,P<0.05);经直线回归分析发现,老龄鼠回归系数大于青年组(酶活性抑制K=1.50,0.94,线粒体内钙K=-7.43,-6.46)。结论:心肌细胞缺氧复氧时,老龄鼠损伤较青年大鼠更显著,其机制与老龄大鼠心肌细胞钠-钾-三磷酸腺苷酶对内洋地黄素敏感性增加有关,地高辛抗血清对老龄大鼠心肌细胞缺氧复氧保护作用更有效。