尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ分离、抗血清制备、与其他出血毒素血清学关系研究

先用DEAE-Sephadex A 50离子交换层析,然后用CM-Sephadex C 50离子交换层析,最后用12%SDS-PAGE制备电泳纯化尖吻蝮蛇出血毒素Ⅲ。将含出血毒素Ⅲ的聚丙烯酰胺凝胶磨细免疫小鼠,制备抗血清。ELISA检测显示制备的抗血清IgG能够与天然的出血毒素Ⅲ结合,Western blot检测结果显示制备的抗血清只与出血毒素Ⅲ特异结合,制备的抗血清可以用于免疫组织化学实验,为以后检测血毒素Ⅲ的结合位点打下了基础。

侵染生姜的黄瓜花叶病毒检测试剂盒的研制

目的:研制出可以检测侵染生姜的黄瓜花叶病毒试剂盒。方法:先采用RT-PCR法检测侵染生姜的黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒,选择仅仅含黄瓜花叶病毒的生姜叶片,采用均浆和高速离心的方法提取黄瓜花叶病毒,通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳的方法分离出黄瓜花叶病毒的外壳蛋白CP,将含CP的聚丙烯酰胺凝胶磨细后免疫小鼠,获得抗血清。对抗血清进行质量的检测,特异性检查采用Western blot方法,结合性采用ELISA方法,合格抗血清通过亲和层析获得Ig G,经过浓缩、透析后与甘油混合获得试剂盒。结果:抗血清中的Ig G仅仅与黄瓜花叶病毒的CP结合,抗血清中的Ig G能够结合天然黄瓜花叶病毒颗粒。结论:该试剂盒能够检测生姜叶片中的黄瓜花叶病毒。

柚子皮膳食纤维提取工艺的研究

通过文献了解现今对于膳食纤维提取的几种基本方法,采用酸、碱法对柚子皮中的膳食纤维进行提取,并用正交试验得到碱浸过程中对于柚子皮膳食纤维提取的最佳条件:温度35℃、时间1.5h、物料比1(g)∶9(mL)、NaOH浓度0.4mol/L,此条件下产率为51.85%。最后对得到的柚子皮膳食纤维的持水性以及膨胀性进行测定,得出其持水力和膨胀力分别为2.823g/g、3.19mL/g。

皖西大别山松乳菇菌丝半固体培养研究

采用含琼脂的半固体培养基来培养松乳菇菌丝,优化了半固体培养基碳源和氮源以及培养温度,并将含同样营养成分的液体培养、固体培养和半固体培养进行了比较,试验结果表明,松乳菇菌丝采用半固体培养时,0.5%蔗糖与1.5%淀粉的组合碳源培养菌丝生长速度最快,蛋白胨是最理想的氮源物质,25℃是松乳菇菌丝的最适培养温度。3种不同培养基培养结果是半固体培养基菌丝生长速度明显超过了其他2种培养基,且菌丝颜色可以由纯白色转变为棕黄色,同时出现部分菌丝相互靠近集中生长的现象,此现象类似子实体原基的形成。松乳菇菌丝半固体培养方法为人工栽培松乳菇提供了新的思路。

益母草中水苏碱提取优化的研究

比较了不同提取方法对益母草中水苏碱提取的影响。通过正交试验测定并比较回流提取法与超声波提取法对益母草水苏碱提取效果的优劣。结果显示:超声波提取法与一般回流提取法比较,具有能耗低,能提高水苏碱提取率的优点,与其他方法比较具有优势。

白眉蝮蛇毒中出血毒素种类鉴定的简便方法

用DEAE-纤维素离子交换层析、分段洗脱的方法将白眉蝮蛇毒成分了若干个组分,收集、浓缩、透析并确定出血毒素所在的组分。分段洗脱液含NaCl的Tris-HCl缓冲液(0.05M、0.10M、0.15M、0.2M、0.5M,pH7.4)。然后用12%PAGE制备电泳方法进一步分离出血毒素,用生工生物工程(上海)股份有限公司生产的高灵敏快速考马斯亮蓝染色试剂盒(产品编号:C510041)染色。对染色和脱色方法进行改进,将含蛋白质的凝胶切下,磨细后注射到小鼠腹部皮下,观察小鼠腹部皮上的出血点,每一个出血点代表1种出血毒素。结果表明,浓度为0.10M NaCL洗脱的组份含出血活性,对该部分电泳检测发现总共有2种出血毒素。

舟山眼镜蛇毒α-神经毒素致突变性研究(英文)

目的对舟山眼镜蛇毒α-神经毒素的致突变性进行研究,为临床应用的安全性提供依据。方法应用中国仓鼠肺成纤维细胞CHL染色体畸变试验和Ames试验检测舟山眼镜蛇毒α-神经毒素是否有致突变性。结果 Ames试验:对于突变株TA97、TA100和TA102,α-神经毒素浓度达到或者超过2.56μg·m L-1,Ames试验阳性(P<0.05);对于突变株TA98,α-神经毒素浓度达到或者超过5.12μg·m L-1,Ames试验阳性(P<0.05)。但回复突变和畸变率与神经毒素的浓度不呈线性关系,也与是否有活化剂S9无关联。染色体畸变试验:α-神经毒素浓度达到或者超过0.64μg·m L-1,CHL细胞染色体畸变为阳性(P<0.05),但畸变率与神经毒素的浓度不呈线性关系,也与是否有活化剂S9无关联。结论舟山眼镜蛇毒α-神经毒素临床剂量为1μg·kg·d-1时在致突变性上是安全的。